Page 82 - 《中国药房》2023年20期

2.2.2 供试品溶液 548.40 ng/mL，猪去氧胆酸质量浓度分别为 5.38、26.92、
取八宝惊风散 0.1 g，精密称定，置具塞棕色锥形瓶 53.84、107.68、215.36、538.40 ng/mL，牛磺胆酸钠质量浓
中，精密加入甲醇 50 mL，称定质量，超声（功率 500 W， 度分别为 4.74、23.70、47.40、94.81、189.62、474.05 ng/mL
频率 40 kHz）处理 30 min，放冷，再称定质量，加甲醇补 的混合对照品溶液，按“2.1”项下检测条件进样测定，以
足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液 5 mL，置 各成分质量浓度（x）为横坐标，峰面积（y）为纵坐标，用
100 mL 棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，用 0.22 μm Analyst 工作站拟合标准曲线。精密吸取混合对照品溶

的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 液进行梯度稀释，分别以信噪比为 3∶1 和 10∶1 时对应
2.2.3 阴性样品溶液 的 质 量 浓 度 作 为 各 成 分 的 检 测 限 和 定 量 限 ，结 果
按八宝惊风散的处方及工艺制备缺人工牛黄和胆 见表1。
南星的阴性样品（因胆南星为天南星用胆汁炮制而成，
表1 待测成分的线性关系考察结果和检测限、定量限
其中含少量的胆汁酸类成分），按“2.2.2”项下方法制备 结果
成阴性样品溶液。 待测成分 线性方程 r 线性范围/（ng/mL） 检测限/（ng/mL） 定量限/（ng/mL）
2.3 方法学考察 胆酸 y＝1.36×10 x+4.61×10 5 0.999 3 5.48～548.40 1.64 5.48
4
猪去氧胆酸 y＝2.26×10 x－3.74×10 3 0.999 6 5.38～538.40 1.61 5.38
3
2.3.1 专属性试验
4
牛磺胆酸钠 y＝1.46×10 x+6.20×10 5 0.999 3 4.74～474.05 1.42 4.74
分别取阴性样品溶液、混合对照品溶液和供试品溶
液（编号 A1），按“2.1”项下检测条件进样测定。结果显 2.3.3 精密度试验
示，阴性样品溶液对检测无干扰，色谱见图1。 取供试品溶液（编号 A1），按“2.1”项下检测条件连
混合对照品 m/z 407.2 m/z 392.2 m/z 514.2 续进样 6 次，测定峰面积，计算 RSD。结果显示，胆酸、
×10 6 7.83 ×10 5 8.17 ×10 6 4.94
3.0 猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠峰面积的 RSD 分别为 2.1%、
3.0 4.0 1.9%、2.2%（n＝6），表明方法精密度良好。
intensity/cps 2.0 intensity/cps 3.0 intensity/cps 2.0 2.3.4 稳定性试验
2.0
1.0
1.0 1.0 取供试品溶液（编号A1），按“2.1”项下检测条件，在
0 0 0
0 5 10 0 5 10 0 5 10 室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时分别进样测定，记录峰
t/min t/min t/min
供试品 m/z 407.2 m/z 392.2 m/z 514.2 面积，计算RSD。结果显示，胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆
×10 5 7.83 ×10 5 8.17 ×10 6 4.92 酸钠峰面积的 RSD 分别为 2.9%、3.1%、3.5%（n＝6），表
8.0
2.0 明供试品溶液在室温下放置24 h内稳定。
6.0
1.0
intensity/cps 4.0 intensity/cps 0.5 intensity/cps 1.0 2.3.5 重复性试验
取八宝惊风散（编号A1）6份，每份0.1 g，精密称定，
2.0
0 0 0 按“2.2.2”项下方法制备成供试品溶液，并按“2.1”项下检
0 5 10 0 5 10 0 5 10
t/min t/min t/min
阴性样品 m/z 407.2 m/z 392.2 m/z 514.2 测条件进样分析，按外标法计算含量。结果显示，胆酸、
×10 3 6.61 ×10 3 6.67 ×10 3 7.00
8.0 猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠的平均含量分别为 1.483、
3.0
1.5
6.0 1.768、1.503 mg/g，RSD分别为2.5%、3.7%、3.2%（n＝6），
intensity/cps 4.0 intensity/cps 2.0 intensity/cps 1.0 表明方法重复性良好。
1.0
0.5
2.0
0 0 0 2.3.6 加样回收率试验
精密称取八宝惊风散（编号 A1）6 份，每份 0.05 g，
0 5 10 0 5 10 0 5 10
t/min t/min t/min 分别精密加入含胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠对照品
胆酸 猪去氧胆酸 牛磺胆酸钠
图1 混合对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液的 的甲醇溶液（胆酸 1 535.52 ng/mL、猪去氧胆酸 1 722.82
专属性试验色谱图 ng/mL、牛磺胆酸钠 1 516.92 ng/mL）50 mL，按“2.2.2”项
2.3.2 线性关系考察及检测限、定量限测定 下自“称定质量”起，同法制备成供试品溶液；再按“2.1”
精密吸取“2.2.1”项下各对照品储备液0.025、0.025、 项下检测条件进样分析，记录峰面积，并计算回收率及
0.025、0.2、0.2、0.25 mL，分别置 500、100、50、200、100、 RSD。结果显示，胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠的平
50 mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成胆酸 均回收率分别为 103.3%、103.3%、101.6%，RSD 分别为
质 量 浓 度 分 别 为 5.48、27.42、58.84、109.68、219.36、 3.3%、3.4%、4.2%（n＝6），表明方法准确度良好。

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