Page 62 - 《中国药房》2023年20期
P. 62

3             空白对照组
                                                              MBD/BDD组 a
                                                              FLX组
            60     a                空白对照组       2        a       a
           目的基因mRNA的相对表达量  40  a  a      a     目的蛋白的相对表达量  1  a          BDNF                            45 kDa
                                    MBD/BDD组

                                                                                                         140 kDa
                                                                          TrkB
                                                                                                         92 kDa
            20
             0                                  0                        β-actin  空白 MBD/ FLX 空白 MBD/ FLX 空白 MBD/ FLX 42 kDa
                                                                             对照 BDD  组 对照 BDD  组 对照 BDD  组
                Fezf2   Arx    Ostn    Nrgn          BDNF        TrkB         组  组     组   组     组  组
                 A.各组基因组表达变化情况（x±s，n＝8）          B.蛋白表达验证柱形图（x±s，n＝8）               C.蛋白表达验证电泳图
             a：与空白对照组比较，P＜0.05。
                                           图4 靶基因mRNA及蛋白表达的验证

          4 讨论                                                    目前，关于 PSD 的生理病理机制还没有统一结论，
              PSD 是脑血管疾病的常见并发症之一。作为抗抑                         其潜在机制包括单胺类水平降低，促炎细胞因子过量，
          郁药，5-羟色胺选择性重摄取抑制剂（selective serotonin               谷氨酸介导的兴奋性毒性，脑轴、下丘脑-垂体-肾上腺轴
          reuptake inhibitors，SSRIs）是临床治疗PSD的一线药物。            功能障碍和异常神经营养反应等，是多种因素共同作用
          然而临床实践显示，SSRIs会增加患者的出血风险，包括                         的结果   [22―23] 。本研究结果显示，经 MBD/BDD 干预后，
          胃肠道出血和脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）风            PSD模型大鼠脑组织中显著上调的DEGs共1 173个，其
            [19]
          险 。相关数据显示，服用 SSRIs 者的出血风险比未服                        中 Fezf2、Arx、Emx1、Foxg1、Emx2、Nr2e1、Dlx 等基因变
                                                    [20]
          用 SSRIs 者高 50%，其中发生 ICH 的风险高 40% 。因                 化尤为明显。经查询美国国立卫生研究院基因数据库
          此，有必要寻找新的且安全性更高的治疗方案。                               可知，上述基因大多与神经元增殖、发育、分化和迁移密
              中药具有不良反应少、疗效持久等优点，其应用价                          切相关，涉及 V 层锥体神经元树突变化和棘发育、轴突
          值得到了临床的广泛认可 。MBD/BDD由经典名方百                          生长等生理功能，提示MBD/BDD的抗PSD作用可能与
                                [21]
          合地黄汤加味而成，用于 PSD 的疗效确切，但具体作用                         促进神经结构、功能修复和神经元增殖等有关。本研究
          机制尚不明确。由于中药复方在疾病治疗过程中具有                             对转录组测序结果中上调较显著的 4 个基因（Fezf2、
          多靶点、多途径、整体协调的特点，故本研究首先使用网                           Arx、Ostn、Nrgn）进行 mRNA 表达验证，对 2 个常见神经
          络药理学方法对 MBD/BDD 治疗 PSD 的活性成分及潜                      营养因子（BDNF、TrkB）进行蛋白表达验证，结果显示，
          在靶点进行了分析，最终获得了MBD/BDD抗抑郁相关                          经MBD/BDD治疗后，大鼠脑组织中上述基因及蛋白的
          靶基因 131 个。随后，本研究通过构建组分-靶点网络、                        相对表达量均显著升高，初步验证了前述研究结果。
          PPI 网络，并进行 KEGG 通路富集分析发现，MBD/BDD                        综上所述，MBD/BDD 的抗 PSD 作用可能与上调神
          治疗PSD的机制可能涉及IL1B、AKT1等多个基因，与神                       经元增殖、发育、分化和迁移相关基因的表达，促进神经
          经活性配体-受体相互作用、cAMP 等信号通路密切
                                                              结构和功能的修复有关，是多成分、多靶点、多途径共同
          相关。
                                                              作用的结果。本研究可为 MBD/BDD 及相关中药在神
              为了进一步探讨MBD/BDD的抗抑郁机制，本研究
                                                              经发育和神经精神疾病中的药理作用及其分子机制分
          通过局灶性脑缺血手术结合慢性不可预见的温和应激
                                                              析提供参考。
          建立 PSD 大鼠模型，以 FLX 为阳性对照，通过 OFT 和                    参考文献
          FST初步证实了MBD/BDD能显著减轻模型大鼠的抑郁
                                                              [ 1 ]  DAS J，RAJANIKANT G K. Post stroke depression：the
          样行为。随后，本研究进行了转录组测序和生物信息学
                                                                   sequelae  of  cerebral  stroke[J].  Neurosci  Biobehav  Rev，
          分析，结果显示，MBD/BDD组大鼠脑组织中发生变化的
                                                                   2018，90：104-114.
          基因远多于 FLX 组，其中上调基因数超过 FLX 组的 2
                                                              [ 2 ]  GUO J L，WANG J J，SUN W，et al. The advances of post-
          倍，说明与 FLX 相比，MBD/BDD 能通过调控更多相关
                                                                   stroke  depression：2021  update[J].  J  Neurol，2022，269
          基因的表达来发挥治疗作用。基因变化热图分析结果                                 （3）：1236-1249.
          显示，MBD/BDD 组和 FLX 组的基因谱差异明显，提示                      [ 3 ]  CAI W，MUELLER C，LI Y J，et al. Post stroke depres‐
          两者治疗 PSD 的分子机制可能不同。MBD/BDD 组与                            sion and risk of stroke recurrence and mortality：a syste-
          PSD 模型组之间的 DEGs 共 1 351 个，涉及神经元分化、                       matic review and meta-analysis[J]. Ageing Res Rev，2019，
          化学突触传递调节等，与精神障碍、记忆障碍、神经发育                                50：102-109.
          障碍等疾病有关，提示神经结构及功能的修复可能是                             [ 4 ]  HU J J，WANG L Y，FAN K L，et al. The association be‐
          MBD/BDD治疗PSD的分子基础。                                       tween  systemic  inflammatory  markers  and  post-stroke


          · 2488 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 20                            中国药房  2023年第34卷第20期
   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67