Page 65 - 《中国药房》2023年20期

significantly increased （P＜0.05）. Compared with the model group， low-dose and high-dose astaxanthin could significantly improve
the pathological status of brain tissue and nerve cells and neurological function scores （except for the first day of drug intervention
in the astaxanthin low-dose group）， increase the contents of SOD， CAT， GSH-Px and NO and the relative expression levels of
Nrf2， HO-1， NQO1 protein and mRNA in brain tissue in a dose-dependent manner， and reduce inflammatory infiltration scores，
the contents of MDA and inflammatory reaction indexes （P＜0.05）. ML385 could significantly inhibit the above effects of
astaxanthin （P＜0.05）. CONCLUSIONS Astaxanthin may reduce the oxidative stress of TBI model rats， alleviate the neurological
damage and reduce the level of inflammation reaction by activating the Nrf2/HO-1 signaling pathway.
KEYWORDS astaxanthin； traumatic brain injury； oxidative stress； inflammatory reaction； Nrf2/HO-1 signaling pathway

创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）是神经 司；肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白
外科常见疾病之一，发病率高 。当创伤事件造成脑部 细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6、诱导型一氧化
[1]
原发性机械损伤后，患者脑组织中氧自由基和多种细胞 氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）酶联免疫
因子表达出现异常，从而导致神经细胞结构受损，并造 吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分别为 HAS-48611、
成脑损伤后神经细胞继发死亡，最终导致患者残疾甚至 HAS-47926、HAS-47902、HAS-48231）均购自深圳海思
死亡，严重影响其生存质量 。目前，针对TBI的有效治 安生物技术有限公司；过氧化氢酶（catalase，CAT）、超氧
[2]
疗药物较为匮乏，因此深入探讨 TBI 病理机制，寻找新 化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧
的、有效的脑保护药物具有重要意义。 化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、一氧化氮（ni‐
多种中药提取物及活性成分对 TBI 具有潜在的改 tric oxide，NO）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）试剂盒
善作用，如广泛存在于海洋生物体内的虾青素，具有强 （批号分别为20220827、20220807、20220814、20220829、
[3]
抗氧化、抗炎、抗凋亡等作用 。虾青素属类胡萝卜素类 20220816）均购自南京建成生物工程研究所；荧光定量
成分，可透过血脑屏障，对神经系统疾病具有积极的干 PCR试剂盒（批号DRR137A）购自宝生物工程（大连）有
预作用；同时，该成分可改善缺血缺氧性脑损伤大鼠的 限公司；兔抗大鼠Nrf2、HO-1、NAD（P）H醌氧化还原酶
预后，具有神经保护作用 [4―5] 。研究发现，氧化应激是引 1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1，NQO1]、β-肌动
[6]
起 TBI 的重要因素 。核转录因子红系 2 相关因子 2 蛋白（β-actin）一抗和辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊
（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）/血红素 抗 兔 IgG 二 抗（批 号 分 别 为 ab158523、ab189491、
加氧酶 1（heme oxygenase-1，HO-1）信号通路是机体内 ab80588、ab210319、ab203875）均购自英国 Abcam 公司；
重要的抗氧化应激通路，其中Nrf2是氧化应激的中枢调 ECL 发光试剂盒（批号 170-5031）购自上海翌圣生物科
节因子，可在氧化应激状态下激活下游 HO-1 等抗氧化 技有限公司。
因子的转录和表达，从而发挥对氧化应激损伤的改善作 1.3 实验动物
[7]
用 。研究表明，虾青素可通过调节Nrf2/HO-1信号通路 SPF级雄性SD大鼠75只，10～12周龄，购自成都药
来缓解多种疾病的氧化应激和炎症反应，从而发挥器官 康生物科技有限公司，动物使用许可证号为SYXK（川）
保护作用 [8―9] 。本研究旨在探讨虾青素对 TBI 模型大鼠 2020-0034。所有动物均饲养于温度 20～25 ℃、相对湿
氧化应激和炎症反应的影响，并基于上述通路探讨其可 度 40%～70%、每 12 h 昼夜交替并定期以紫外线消毒的
能机制，为该成分的进一步开发和应用提供理论基础。 动物房内，适应性喂养1周后进行后续实验。本研究方
1 材料 案经萍乡市第二人民医院动物实验伦理委员会审批通
1.1 主要仪器 过，批件号为2022007。
本研究所用主要仪器包括EnSight型多功能酶标仪 2 方法
（上海玮驰仪器有限公司）、Axio Scope A1型光学显微镜 2.1 分组、造模与给药
（德国Carl Zeiss公司）、H-7650型透射电镜（日本Hitachi 采用改良 Feeney 自由落体撞击法复制 TBI 大鼠模
公司）、ABI 7500型定量聚合酶链式反应（PCR）仪（美国 型：大鼠经麻醉后固定于立体定位仪上，剪毛消毒后沿
Applied Biosystems公司）、Amersham Imager 600RGB型 矢状缝切开头皮，露出右顶骨后行颅骨钻孔术，打开直
超灵敏多功能成像仪（美国GE Healthcare公司）等。 径约 4 mm 的骨窗并保持硬脑膜完整；用 40 g 砝码从 40
1.2 主要药品与试剂 cm高处自由落体撞击，造成大鼠右侧大脑半球脑损伤，
[10]
虾青素对照品（批号 A832359，纯度≥98%）购自上 以出现短暂呼吸暂停、四肢抽搐为造模成功 。造模
海麦克林生化科技股份有限公司；Nrf2抑制剂ML385对 前，选择 14 只大鼠作为假手术组，仅开骨窗但不撞击。
照品（批号 HY-100276，纯度≥98%）购自美国 MCE 公 剔除造模未成功和死亡的大鼠（分别为3、2只），将造模成

中国药房 2023年第34卷第20期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 20 · 2491 ·