Page 82 - 《中国药房》2023年19期

－10 －6 －2 0 2 4 6 8 10 5 4 3 2 1 0 －1 －5 知，诃子酸、诃黎勒酸、没食子酸、鞣花酸4种成分对诃子
t[2]
8 8 SP及不同炮制品指纹图谱信息影响较大；结合含量测定
6 6 SP
4 4 THH 结果可以看出，诃子炮制前后其诃子酸、诃黎勒酸、没食
2 2 DC 子酸、鞣花酸的含量变化较明显，这可能是因为炮制使
FW
0 0 ST 诃子的化学成分发生了转化。此外还可以看出，炮制时
－2
－2 CT
－4 JZ 间和温度不同，诃子的化学成分会发生不同程度的转
－4
－6
－6 化，其中 CT 经过高温炒至炭化，JZ 经过 24 h 长时间蒸
－3 t[1] 制，导致大部分成分被破坏、分解，使得二者指纹图谱信
t[3] －6 －1
－2 1
2 息与其他炮制品相比区别明显。
6 3
10 5 《本经逢原》首次提出诃子生熟异用的观点，认为炮
图3 诃子SP及不同炮制品的PCA得分图
制可使诃子固肠止泻的作用增强，更适用于“肠澼”的治
－100 －60 －20 0 20 60 t[2] 100 40 20 0 －20 －40 疗。“肠澼”与现代临床溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，
60 60
UC）相对应。本课题组前期对诃子 SP 及不同炮制品治
40 40 SP
THH 疗UC的药效学进行了比较，证实了诃子在炮制后对UC
20 20 DC
[7]
FW 的治疗作用确有增强 ，该作用与其对氧化应激指标的
0 0 ST
CT 调控有关。同时文献研究表明，诃子拥有强抗氧化活
－20 －20
JZ
－40 性，其清除自由基的能力为临床常用药依达拉奉的数
－40
[13]
倍 ，通过抗氧化途径能够起到心脏保护、神经保护、抗
t[3] －60 －20 t[1] 肿瘤、抗炎等作用 [14―15] 。本研究采用 DPPH 自由基清除
－20 0
20 20
60 法测定了诃子 SP 及不同炮制品的抗氧化活性，GRA 结
100 40
图4 诃子SP及不同炮制品的OPLS-DA得分图 果显示，色谱峰 7、2（诃子次酸）、9、18（鞣花酸）、3（没食
子酸）、4、1 所对应的成分与抗氧化活性联系较为紧密；
表4 诃子SP及不同炮制品各共有峰和IC50的关联度
结合PLSR，可初步判断诃子酸、诃黎勒酸、柯里拉京、没
峰号 关联度 排序 峰号 关联度 排序
7 0.725 1 13 0.568 11 食子酸是诃子抗氧化活性的重要药效成分。文献亦报
2 0.722 2 5 0.562 12 道这4种成分均具有明确的抗氧化作用 [16―19] 。结合诃子
9 0.716 3 8 0.561 13 SP 及不同炮制品含量测定与抗氧化实验中 IC50结果可
18 0.673 4 6 0.560 14
3 0.664 5 19 0.556 15 知，诃子CT和JZ中上述4种成分总含量均较SP明显降
4 0.608 6 17 0.553 16 低（4种成分总含量均在3%左右），所表现出的抗氧化活
1 0.604 7 12 0.535 17 性也较低；而诃子SP及其他炮制品中上述4种成分的总
14 0.592 8 20 0.530 18
11 0.586 9 15 0.515 19 含量高达 20% 以上，所表现出的抗氧化活性也明显升
10 0.576 10 16 0.494 20 高。虽然诃子的抗氧化活性是多种成分共同作用的结
3 讨论 果，单从4个已知成分含量变化来评价其抗氧化活性不
笔者在前期实验中发现，诃子中部分鞣质类成分在 够全面，但本研究结果足以证明不同炮制方法对诃子化
高浓度甲醇中存在不稳定现象，但在乙腈-水不同配比 学成分产生了不同的影响，进而影响到其抗氧化活性。
下，部分色谱峰选择性较差，经在洗脱体系中加入少量 根据本研究结果可推测，化学成分的变化将导致诃子其
甲醇调节后分离效果得以改善，同时加入少量甲酸可以 他生物活性亦随之变化，从而影响其临床疗效的发挥。
改善峰形，因此本研究最终选择乙腈（A）、0.1%甲酸-5% 本研究发现，现代常用炮制方法制备的诃子DC、FW、
甲醇溶液（B）组成流动相体系。另外，在测定前对诃子 ST 与古法炮制的 THH 的 HPLC 指纹图谱信息较为相
提取液进行 200～400 nm 波长范围的吸收光谱扫描，发 似，均表现出较强的抗氧化活性，通过抗氧化谱效相关
现其在270 nm波长处有最大吸收，因此本研究选择检测 性分析所得的4种主要药效成分（诃子酸、诃黎勒酸、柯里
波长为270 nm。 拉京、没食子酸）总含量均较高，其中以DC的抗氧化活性
诃子 SP 及不同炮制品共标定出 20 个共有峰，指认 最强；而诃子JZ与CT的4种抗氧化活性主要药效成分总
出其中 9 个色谱峰。通过 CA、PCA、OPLS-DA 3 种化学 含量均较低，其抗氧化活性与其他炮制品相比大大减弱。
计量学方法分析，结果均显示CT和JZ能各自区分为一 综上所述，诃子DC具有与THH相似的化学成分及
类，而SP、DC、ST、FW、THH区分不明显。对比3种分析 更优的抗氧化活性，且单炒法操作简单，适用于工业化
方法，有监督模式的OPLS-DA区分效果更明显，更适用 生产，因此可初步判断单炒法是与诃子炮制经典古法煻
于多种炮制品指纹图谱的分析。由 OPLS-DA 结果可 灰火煨法相近且更为优良的现代炮制方法。

· 2376 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 19 中国药房 2023年第34卷第19期