Page 79 - 《中国药房》2023年19期
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（2）THH：取净诃子，用面皮裹后置于煻灰火（木材                       2.4 诃子SP及不同炮制品的指纹图谱研究
          燃烧后所得灰烬，翻动可见火星而无明火）中，烧至面皮                          2.4.1 精密度试验
          焦黄色（大概烧 15 min），取出，放凉，砸去面皮及果核，                         取诃子SP（编号S1）按“2.2.2”项下方法制备供试品
          留取果肉，即得 。                                          溶液，按“2.3”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图。
                       [4]
             （3）DC：取净诃子置锅内，文火加热，炒至深黄色（大                      以诃黎勒酸色谱峰（峰15）为参照，计算得各共有峰相对
                                                    [8]
          概炒5 min），取出，放凉，砸去果核，留取果肉，即得 。                      保留时间的 RSD 为 0.68%～1.22%（n＝6），相对峰面积
             （4）FW：取净诃子与麸皮同置锅中[药材-麦麸（100∶                    的RSD为0.71%～1.16%（n＝6），表明方法精密度良好。
          30，m/m）]，文火加热，缓慢翻动，以（140±10） ℃煨至黄                  2.4.2 稳定性试验
          褐色（大概煨20 min），取出，筛去麸皮，放凉，砸去果核，                         取诃子SP（编号S1）按“2.2.2”项下方法制备供试品
          留取果肉，即得 。                                          溶液，分别在制备后 0、2、4、8、12、24 h 按“2.3”项下色谱
                       [9]
             （5）ST：取净河砂置锅内炒烫，倒入净诃子，以                         条件进样，记录色谱图。以诃黎勒酸色谱峰（峰15）为参
         （160±10） ℃翻炒 6 min，取出，筛去河砂，放凉，砸去果                   照，计算得各共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.84%～
                          [7]
          核，留取果肉，即得 。                                        1.06%（n＝6），相对峰面积的RSD为0.69%～1.34%（n＝
             （6）CT：取净诃子置锅内，武火加热，炒至亮黑色（大                      6），表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
                                                    [10]
          概炒6 min），取出，放凉，砸去果核，留取果肉，即得 。                      2.4.3 重复性试验
             （7）JZ：取净诃子加入黄酒浸润 30 min，置于蒸锅                        取诃子 SP（编号 S1）按“2.2.2”项下方法平行制备 6
                                                   [5]
          中，蒸24 h，70 ℃烘干，砸去果核，留取果肉，即得 。                      份供试品溶液，按“2.3”项下色谱条件进样，记录色谱图。
          2.2 溶液的制备                                          以诃黎勒酸色谱峰（峰15）为参照，计算得各共有峰相对
          2.2.1 对照品溶液                                        保留时间的 RSD 为 0.83%～1.47%（n＝6），相对峰面积
              分别精密称取诃子次酸、没食子酸、安石榴苷、柯里                        的RSD为0.94%～1.21%（n＝6），表明方法重复性良好。
          拉京、诃黎勒酸、鞣花酸、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄                    2.4.4 指纹图谱建立及相似度评价
          糖、诃子酸对照品各适量，分别置于10 mL容量瓶中，加                            取 10 批诃子药材，按“2.1”项下方法分别制备 10 批
          入 50% 乙腈定容制得相应对照品溶液。吸取上述各对                         SP及不同炮制品，按“2.2.2”项下方法分别制备各样品的
          照品溶液适量，混合，制得每1 mL含12.25 µg诃子次酸、                    供试品溶液，再按“2.3”项下色谱条件进样分析，记录色
          20.00 µg 没食子酸、32.10 µg 安石榴苷、17.60 µg 柯里拉           谱图。将各样品的色谱数据分别导入《中药色谱指纹图
          京、23.64 µg诃黎勒酸、52.80 µg鞣花酸、18.00 µg 1，2，3，         谱相似度评价系统（2012 版）》，各样品的分析条件均相
          4，6-O-五没食子酰葡萄糖、60.72 µg 诃子酸的混合对照                   同：设定药材编号S1的SP样品图谱为参照图谱，设置时
          品溶液。                                               间窗宽度为 0.1 min，采用多点校正和 Mark 峰匹配生成
          2.2.2 供试品溶液                                        指纹图谱（图略），并采用中位数法生成各样品的对照指
              取诃子SP及不同炮制品，粉碎，过65目筛。精密称                       纹图谱。经识别得到各样品的 20 个共有峰，见图 1A。
          取0.1 g各样品粉末，加入50%乙腈25 mL，称定质量，超                    各批次诃子SP、DC、FW、ST、THH、CT、JZ的相似度分别为
          声（功率 250 W，频率 40 kHz）提取 30 min，放冷，以提取              0.959～0.996、0.923～0.990、0.952～0.983、0.935～0.993、
          溶剂补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液 2 mL 用提                       0.915～0.997、0.924～0.999、0.980～0.997。
          取溶剂定容至 10 mL 容量瓶中，再经 0.45 µm 微孔滤膜                  2.4.5 共有峰指认
          滤过，取续滤液，即得指纹图谱用供试品溶液；将该指纹                              取“2.2.1”项下混合对照品溶液，按“2.3”项下色谱条
          图谱用供试品溶液以50%乙腈依次稀释，得质量浓度分                          件进样分析，记录色谱图（图1B），通过与对照指纹图谱中
          别为8.0、4.0、2.0、1.0、0.50、0.25 µg/mL的系列溶液，作为          各共有峰的保留时间进行对比，共指认出9个共有峰，分别
          测定诃子SP及不同炮制品抗氧化活性用供试品溶液。                           为色谱峰2（诃子次酸）、3（没食子酸）、6（安石榴苷A）、8
          2.3 色谱条件                                          （安石榴苷B）、12（柯里拉京）、15（诃黎勒酸）、18（鞣花酸）、
              采用Dikma Platisil ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm，         19（1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖）、20（诃子酸）。
          5 µm），以乙腈为流动相A、0.1%甲酸-5%甲醇溶液为流                     2.5 诃子SP及不同炮制品中8种成分的含量测定
          动相B进行梯度洗脱（0～5 min，2%A→4%A；5～10 min，                2.5.1 线性关系及检测限、定量限考察
          4%A；10～12  min，4%A→6%A；12～25  min，6%A→                 取“2.2.1”项下各对照品溶液，用50%乙腈稀释成系
          13%A；25～38 min，13%A；38～40 min，13%A→14%A；           列质量浓度的线性工作液，分别按“2.3”项下色谱条件进
          40～52 min，14%A；52～55 min，14%A→16%A；55～82           样分析，以进样质量浓度为横坐标（x）、峰面积为纵坐标
          min，16%A）；进样量为 5 µL；流速为 1 mL/min；柱温为              （y）绘制标准曲线。取“2.2.1”项下各对照品溶液，用
          25 ℃；检测波长为270 nm。                                  50%乙腈稀释成系列质量浓度的溶液，按“2.3”项下色谱


          中国药房  2023年第34卷第19期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 19    · 2373 ·
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