Page 47 - 《中国药房》2023年19期
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AKT （p-AKT）/AKT in uterine tissue were all decreased （P＜0.05）； the embryo mortality rate， Th1 cell ratio， Th1/Th2 ratio， and
          serum levels of IFN-γ and TNF-α were increased （P＜0.05）. Compared with the model group， the pathological damage of uterine
          tissue  in  the  A.  sinensis  polysaccharide  group  was  reduced，  and  the  above  indexes  were  all  improved  significantly （P＜0.05）；
          LY294002  could  weaken  the  effect  of  A.  sinensis  polysaccharide  on  model  rats （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  A.  sinensis
          polysaccharides  can  improve Th1/Th2  imbalance  in  threatened  abortion  model  rats  by  activating  the  PI3K/AKT  signaling  pathway，
          thereby inhibiting immune inflammation， and promoting embryo survival.
          KEYWORDS    Angelica  sinensis  polysaccharides；  PI3K/AKT  signaling  pathway；  threatened  abortion；  tocolysis  effect；  Th1/Th2
          balance



              先兆流产是女性妊娠早期出现的腰痛、下腹痛或阴                         纯度 99.5%）、米索前列醇（批号 410004-201502，纯度
          道出血等症状，若不及时进行干预治疗最终会导致流                            98.9%）购自南京森贝伽生物科技有限公司；PI3K/AKT
          产，甚至给母体生命安全带来危害，严重影响孕妇身心                           信号通路抑制剂 LY294002（批号 L9908，纯度≥98%）购
          健康及家庭幸福。免疫细胞分化异常及其产生的细胞                            自美国Sigma公司；大鼠雌激素、孕激素、干扰素γ（inter‐
          因子失衡是妊娠失败及流产的重要原因，纠正 Th1/Th2                       feron-γ，IFN-γ）、白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）、肿瘤
          型细胞因子的病理偏移状态可改善先兆流产患者内分                            坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）酶联免疫吸
          泌水平，并减轻其症状        [1―2] 。此外，磷脂酰肌醇3激酶（phos‐         附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试
          phoinositide 3-kinases，PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase   剂盒（批号分别为 CB10268-Ra、CB11530-Ra、CB10173-
          B，AKT）信号通路与细胞代谢、免疫调节和激素水平调                         Ra、CB10216-Ra、CB11057-Ra）购自上海科艾博生物技
          节有关，参与介导了药对黄芩-白术对先兆流产的治疗                           术有限公司；苏木素-伊红（HE）染色试剂盒、FITC 标记
              [3]
          过程 。激活PI3K/AKT信号通路可降低Th1/Th2比值，                    的抗大鼠 CD4 抗体、APC 标记的抗大鼠 IFN-γ 抗体、PE
          减轻免疫炎症，进而促进肾移植存活 ；还可减轻巨噬细                          标记的抗大鼠 IL-4 抗体和兔源抗大鼠磷酸化 PI3K（p-
                                         [4]
          胞 M1 极化，进而通过抑制炎症来改善脂多糖诱导的小                         PI3K）、PI3K、磷酸化 AKT（p-AKT）、AKT、GAPDH 一抗
          鼠流产症状 。由此可知，通过激活PI3K/AKT信号通路                       以及 HRP 标记的山羊抗兔 IgG 二抗购自上海优宁维生
                    [5]
          来改善Th1/Th2平衡可能是防治先兆流产的重要手段。                        物科技股份有限公司；外周血单个核细胞（peripheral
              当归多糖是中药当归中的天然多糖类物质，可通过                         blood mononuclear cell，PBMC）分离试剂盒购自北京汇
          减少促炎因子的表达和释放，进而抑制妊娠期易栓症模                           智和源生物技术有限公司。
          型大鼠的血栓形成 。此外，胡燕等 研究表明，当归多                          1.3 动物
                                        [7]
                          [6]
          糖可上调 PI3K/AKT 信号通路相关蛋白表达，并降低复                          本研究所用动物为SPF级SD大鼠（雄性大鼠27只，
          发性流产模型大鼠的胚胎死亡率。但当归多糖是否可                            约7周龄，体重215～245 g；雌性大鼠54只，约8周龄，体
          通过激活PI3K/AKT信号通路来改善先兆流产患者Th1/                      重210～240 g），购自陆军军医大学医学实验动物中心，
          Th2平衡，并发挥保胎作用目前还不清楚。鉴于此，本研                         生产合格证号为 SCXK（渝）2022-0011。所有大鼠均饲
          究通过构建先兆流产大鼠模型，探究当归多糖调节                             养于贵州中医药大学第一附属医院SPF级动物房内，动
          PI3K/AKT 信号通路对其 Th1/Th2 平衡及胚胎存活的影                  物房内环境条件设为温度 22～25 ℃、相对湿度 55%～
          响，旨在阐明当归多糖防治先兆流产的作用机制。                             60%、光照/昼夜各12 h循环。本研究通过了贵州中医药
          1 材料                                               大学动物伦理委员会批准（批号为20220018）。
          1.1 主要仪器                                           2 方法
              RAYTO RT-2100C 型自动酶标仪购自北京华仪通                   2.1 造模、分组与给药
          泰环保科技有限公司；HS-3090 型冰冻切片机购自北京                           取 SD 雌性大鼠，灌胃己烯雌酚（2 mg/kg）1 次使其
          德耳斯仪器有限公司；EVOS M7000 型显微镜、Attune                   发情 ，然后与 SD 雄性大鼠以 2∶1 的比例合笼过夜，次
                                                                 [8]
                                                        TM
          NxT 型流式细胞仪均购自赛默飞世尔科技（中国）有限                         日清晨检查选出成功受孕的雌鼠（成功受孕特征为雌鼠
          公司；DYY-6C型双稳电泳仪、HE-120型电泳槽、VE-186                  阴道中有阴栓），此时记为妊娠第1天。取成功受孕的雌
          型转印电泳槽均购自南京普阳科学仪器研究所。                              鼠50只，采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、当
          1.2 主要药品与试剂                                        归多糖组、LY294002组和当归多糖+ LY294002组，每组
              当归多糖（批号 CY110320，纯度 98%）购自陕西慈                  10只。于妊娠第1天开始给药处理：对照组和模型组大
          缘生物技术有限公司；米非司酮（批号 410003-201301，                   鼠均灌胃 10 mL/kg 生理盐水+腹腔注射 10 mL/kg 生理


          中国药房  2023年第34卷第19期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 19    · 2345 ·
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