Page 36 - 《中国药房》2023年19期
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          药效成分和毒性来源 ，具有抗肿瘤               [4―5] 、调节免疫 、抗       限公司；乙腈、庚烷磺酸钠、磷酸二氢钾为色谱纯，氢氧
          炎镇痛   [7―8] 等多方面功效。历代本草典籍记载马钱子的                     化钠、无水硫酸钠为分析纯，水为实验室自制纯水。
          炮制方法有油炸、砂烫、甘草制等。清代《净缘一助》记                           2 方法与结果
          载了马钱子“水泡七日，同绿豆煮一炷香”的炮制方法。                           2.1 士的宁和马钱子碱的含量测定

          2022 年版《河南省中药饮片炮制规范》规定绿豆煮马钱                         2.1.1 色谱条件
          子的炮制工艺为：取净马钱子与绿豆同置锅内，加水适                                色谱柱为 ZORBAX Eclipse XDB-C18 （4.6 mm×250
          量，煮 8 h；捞出，除去绿豆，刮去皮毛，微凉，切顶刀片                        mm，5 μm）；以乙腈-0.01 moL/L庚烷磺酸钠与0.02 moL/L
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          0.6 mm 厚，晒干；每 500 g 马钱子，用绿豆 120 g 。但是               磷酸二氢钾等量混合溶液（用 10% 磷酸调节 pH 值至
          该法存在耗时较长、加水量模糊等问题，且未对毒性成                            2.8）（V/V，21∶79）为流动相；流速为 1.0 mL/min；检测波
          分的含量标准作出规定。本课题组前期预实验发现，加                            长为260 nm；柱温为30 ℃；进样量为5 μL。
          压煮状态下马钱子仍保持原有形态，且士的宁、马钱子                            2.1.2 对照品溶液制备
          碱含量变化所需时间比常压煮更短，因此，探究绿豆煮                                精密称定士的宁、马钱子碱对照品10.26、11.56 mg，
          马钱子的加压工艺对节约时间成本和控制质量具有重                             分别置于10 mL量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释
          要意义。                                                至刻度，摇匀，即得上述成分单一对照品溶液。精密量
              最小二乘法（又称最小平方法）是一种数学优化技                          取士的宁对照品溶液2 mL、马钱子对照品溶液1 mL，置
          术，其通过最小化误差的平方和寻找数据的最佳函数匹                            于同一10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得
          配，找到数据之间的映射关系；遗传算法是一种通过模                            上述成分质量浓度分别为 0.205 2 、0.115 6 mg/mL 的混
          拟自然进化过程搜索最优解的方法 。本研究以 2020                          合对照品溶液。
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          年版《中国药典》马钱子粉中士的宁、马钱子碱的含量要                           2.1.3 供试品溶液制备
          求为标准，采用正交实验考察炮制压力、炮制时间、绿豆                               精密称取绿豆煮马钱子样品粉末（过三号筛）约0.6
          用量、加水量等因素对绿豆煮马钱子炮制工艺的影响，                            g，置于具塞锥形瓶中，加氢氧化钠溶液 3 mL，放置 30
          然后结合最小二乘法和遗传算法获取最佳工艺参数，并                            min；精密加入三氯甲烷20 mL，密塞，称定质量；置于水
          进行验证，以期为绿豆煮马钱子炮制工艺的优化提供                             浴条件下回流提取 2 h，放冷，再次称定质量；用三氯甲
          参考。                                                 烷补足减失的质量，摇匀，取三氯甲烷部位溶液，滤过；
          1 材料                                                取续滤液 3 mL，置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻
          1.1 主要仪器                                            度，摇匀，即得供试品溶液。
              本研究所用主要仪器有 LDZX-75KBS 型立式压力                     2.1.4 线性关系考察
          蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂），BJ-150型高速多功                            分别精密量取“2.1.2”项下混合对照品溶液 0.5、1、
          能粉碎机（北京中兴伟业仪器有限公司），LC-20AD型高                        2、3、4 mL 至不同 5 mL 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
          效液相色谱仪（日本 Shimadzu 公司），SA224S-CW 型万                 得系列质量浓度的对照品溶液；分别精密吸取上述系列
          分之一天平、BT25S型十万分之一天平[赛多利斯科学仪                         对照品溶液10 µL，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以
          器（北京）有限公司]，UPT-I 型超纯水机（四川优普超纯                       成分质量浓度为横坐标（x）、峰面积为纵坐标（y），绘制
          科技有限公司）。                                            标准曲线，得到回归方程及线性范围，具体见表1。
                                                                  表1 士的宁、马钱子碱的线性关系考察结果
          1.2 药品与试剂
                                                              成分       回归方程               r       线性范围/（mg/mL）
              马钱子药材购自河南省新乡市药材公司，经河南中
                                                              士的宁      y＝10 197 797x+4 812.78  0.999 2  0.020 52～0.205 2
          医药大学药学院张振凌教授鉴定为马钱科植物马钱 S.                           马钱子碱     y＝14 179 298.95x+4 000  0.999 6  0.011 56～0.115 6
          nux-vomica L. 的干燥成熟种子，符合 2020 年版《中国药                2.2 炮制工艺的单因素实验
          典》相关规定；绿豆分别网购于吉林省长春市、山东省济                               以 2022 年版《河南省中药饮片炮制规范》中绿豆煮
          南市、山西省大同市、河南省开封市、云南省昆明市（编                           马钱子饮片的炮制工艺为参考，考察因素包括炮制时
          号 S1～S5），经张振凌教授鉴定为豆科植物绿豆 Vigna                      间、绿豆用量、加水量、炮制压力。
          radiata （L.） R. Wilczek的种子，符合《中国植物志》相关              2.2.1 炮制时间考察
          描述。马钱子碱、士的宁对照品（批号分别为PS000661、                           参考高压灭菌常用饱和蒸汽绝对压力 2.049 MPa、
          PS000844，纯度均为 98.0%）购自成都普思生物科技有                     2022年版《河南省中药饮片炮制规范》中每500 g马钱子


          · 2334 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 19                            中国药房  2023年第34卷第19期
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