Page 60 - 《中国药房》2023年18期

200 nm 200 nm 200 nm

A. Fc-K（C 8 ）FFHK B. C 8-K（Fc）FFHK C. C 8-K（C 8 ）FFHK
图2 Fc-K（C8 ）FFHK、C8-K（Fc）FFHK和C8-K（C8 ）FFHK的TEM图

的纳米纤维，因而自组装形成长度较短的纳米纤维结 1.0 Ⅰ 1.0 Ⅰ
Ⅱ
Ⅶ
Ⅲ Ⅵ
构；当Fc残基处于多肽主链时，分子间氢键和芳香基团 0.8 Ⅳ 0.8 Ⅷ
Ⅴ
Ⅸ
之间的 π-π 电子堆叠作用成为了分子纵向延长的主要 吸光度 0.6 吸光度 0.6
0.4
0.4
驱 动 力 ，Fc-K（C8 ）FFHK 最 终 形 成 了 扭 曲 的 纳 米 带 0.2 0.2
结构 。 0 0
[19]
550 600 650 700 750 550 600 650 700 750
综上，Fc 位置的改变可以调节多肽的自组装驱动 波长/nm 波长/nm
A. Fc-K（C 8 ）FFHK组 B. C 8-K（Fc）FFHK组
力，如疏水相互作用、π-π电子堆叠作用等，进而调控多
Ⅰ：Control组；Ⅱ：Fc-K（C 8 ）FFHK组（20 min）；Ⅲ：Fc-K（C 8 ）FFHK
肽的自组装进程，而 C8-K（C8 ）FFHK 也进一步证明了 N 组（40 min）；Ⅳ：Fc-K（C 8 ）FFHK 组（60 min）；Ⅴ：Fc-K（C 8 ）FFHK 组
端官能团Fc对自组装的调控作用。 （120 min）；Ⅵ：C 8-K（Fc）FFHK 组（20 min）；Ⅶ：C 8-K（Fc）FFHK 组（40
3.4 Fc偶联自组装多肽的体外ROS生成效率结果 min）；Ⅷ：C 8-K（Fc）FFHK组（60 min）；Ⅸ：C 8-K（Fc）FFHK组（120 min）。
图3 Fc-K（C8 ）FFHK、C8-K（Fc）FFHK 的 MB 褪色反
MB 褪色反应结果显示（图 3），随着反应时间的延
应紫外吸收光谱图
长，Fc-K（C8 ）FFHK 组吸光度较 Control 组明显下降，而
C8-K（Fc）FFHK 组吸光度微弱下降；反应 120 min 时， 荧光强度（图 4），这表明微酸性环境也是芬顿反应能够
[20]
Fc-K（C8 ）FFHK组吸光度为0.17，C8-K（Fc）FFHK组吸光 高效进行的重要因素之一 。
度为0.36。 3.5 Fc偶联自组装多肽的抗菌活性结果
DCFH-DA 本身没有荧光且可以自由穿过细胞膜， 前文结果显示，Fc-K（C8 ）FFHK、C8-K（Fc）FFHK 的
可在胞内水解生成 DCFH，DCFH 被 ROS 氧化成有荧光 结构和 ROS 生成效率有明显的差异。为进一步探究上
的DCF。因此，检测特定波长下的荧光强度可以反映细胞 述差异对抗菌效果的影响，本研究以 OD600值来反映细
内的ROS水平。当pH为6.0时，与Fc-K（C8 ）FFHK共孵育 菌相对数量以验证细菌的生长情况。MRSA 生长曲线
的E. coli菌株绿色荧光强度最强，而与C8-K（Fc）FFHK共 （图 5）结果显示，Fc-K（C8）FFHK 和 C8-K（Fc）FFHK 的
孵育的E. coli菌株荧光强度较弱，这表明Fc-K（C8 ）FFHK MIC 值均为 50 μg/mL，C8-K（C8）FFHK 的 MIC 值则高
在微酸性环境下，ROS生成效率明显高于C8-K（Fc）FFHK； 达 400 μg/mL。对于 E. coli 菌株，Fc-K（C8）FFHK 和
当pH为7.4时，二者共孵育的E. coli菌株均显示微弱的 C8-K（Fc）FFHK也显示出抗菌活性的差异，Fc-K（C8 ）FFHK

pH6.0

pH7.4

Control组 H 2 O 2 组 Fc-K（C 8 ）FFHK组 C 8 -K（Fc）FFHK组 Fc-K（C 8 ）FFHK+H 2 O 2 组 C 8 -K（Fc）FFHK+H 2 O 2 组
图4 不同处理方式下E. coli菌株细胞内ROS的生成荧光图（×40）

· 2230 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 18 中国药房 2023年第34卷第18期