Page 41 - 《中国药房》2023年17期

表2 各组小鼠耳部皮肤组织中GRα、GRβ表达情况的 表3 各组小鼠耳部皮肤组织中AKT/S6K1信号通路相
测定结果（x±s，n＝10） 关蛋白表达水平测定结果（x±s，n＝10）
阳性细胞数/个 蛋白表达水平 组别 Gαi1/GAPDH Gαi3/GAPDH S6K1/GAPDH p-S6K1/GAPDH AKT1/2/GAPDH p-AKT/GAPDH
组别
GRα阳性细胞数 GRβ阳性细胞数 GRα/GAPDH GRβ/GAPDH A组 0.274±0.045 0.296±0.050 0.798±0.074 0.280±0.050 0.785±0.076 0.288±0.042
A组 6.5±1.9 7.5±1.9 0.276±0.042 0.253±0.038 B组 0.764±0.066 a 0.761±0.063 a 0.834±0.039 0.727±0.043 a 0.812±0.034 0.758±0.081 a
B组 6.7±2.3 24.8±2.5 a 0.293±0.039 0.490±0.034 a C组 0.591±0.067 b 0.562±0.084 b 0.801±0.054 0.570±0.053 b 0.755±0.049 0.595±0.077 b
C组 7.3±1.9 32.2±2.6 b 0.291±0.030 0.645±0.070 b D组 0.493±0.042 bc 0.506±0.036 b 0.785±0.047 0.462±0.067 bc 0.763±0.029 0.482±0.050 bc
D组 22.5±1.9 bc 22.7±2.1 c 0.462±0.028 bc 0.480±0.050 c E组 0.452±0.057 bc 0.443±0.037 bc 0.813±0.061 0.477±0.059 bc 0.778±0.084 0.448±0.070 bc
E组 29.5±2.9 bc 9.5±1.9 bc 0.628±0.067 bc 0.293±0.039 bc
a：与A组比较，P＜0.05；b：与B组比较，P＜0.05；c：与C组比较，
a：与A组比较，P＜0.05；b：与B组比较，P＜0.05；c：与C组比较，
P＜0.05。
P＜0.05。
4 讨论
GRβ蛋白表达水平均进一步升高（P＜0.05），E组小鼠总
中国医学科学院的研究人员早在20世纪60年代就
蛋白中 GRβ 表达水平显著降低（P＜0.05）。与 C 组比
对我国境内沙棘的资源分布及药理作用展开了研究，在
较，D、E 组小鼠核蛋白中 GRα 蛋白表达水平显著升高
后续的动物实验中证实沙棘油具有抗炎作用且无明显
（P＜0.05），总 蛋 白 中 GRβ 蛋 白 水 平 显 著 减 低（P＜
[14]
毒性 。近年来，随着对沙棘研究的深入，更多学者聚
0.05）。结果见表2、图3。
[15]
焦于沙棘果油的抗炎作用 。关于沙棘油在皮肤科的
GRα 97 kDa 应用，早有报道其除了具有美容功效外，对皮肤烧伤、紫
外线损伤、皮炎损伤等也有效，可促进皮肤再生、减轻组
GRβ 86 kDa [16]
织炎症、促进伤口愈合 。在外用 GC 进行 AD 治疗时，
GAPDH 36 kDa 即便严格遵守用药规范，仍有可能随着病程和治疗时间
[17]
的延长出现激素抵抗，影响治疗效果 。本研究结果显
A组 B组 C组 D组 E组
图3 各组小鼠耳部皮肤组织中GRα、GRβ蛋白表达的 示，使用 DNCB 联合 SEB 刺激后，小鼠皮肤组织炎症表
电泳图 现明显，血清 IgE、IL-4 水平显著升高；沙棘果油联合地
塞米松对AD小鼠炎症反应的抑制作用较二者单独应用
3.4 小鼠耳部皮肤组织中 AKT/S6K1 信号通路相关蛋
时更为显著，表现为皮损局部的炎症表现趋于消退，小
白表达的测定结果
鼠血清中 IgE、IL-4 水平降低。本研究结果进一步验证
与A组比较，B组小鼠Gαi1、Gαi3、p-S6K1、p-AKT的
了沙棘果油在皮肤炎症性疾病中的抗炎作用。
蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）；与B组比较，C、D、
GC需要与细胞内的GRα结合形成复合物转运至细
E组小鼠Gαi1、Gαi3、p-S6K1、p-AKT的蛋白表达水平均
胞核内方能发挥作用，GRβ是GC负调控因子，能够抑制
显著降低（P＜0.05）；与 C 组比较，D、E 组小鼠 Gαi1、p-
[18]
GRα 的活性 。本课题组通过免疫荧光单标法检测了
S6K1、p-AKT 的蛋白表达水平及 E 组小鼠 Gαi3 的蛋白
各组小鼠皮损部位皮肤组织中 GRα、GRβ 阳性细胞数
表达水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图4、表3。
量。结果发现，使用 DNCB 联合 SEB 刺激后，小鼠皮肤
Gαi1 40 kDa 组织中 GRα 阳性细胞数与正常小鼠比较差异无统计学
意义，GRβ阳性细胞数显著增加。作为GC负调控因子，
Gαi3 42 kDa GRβ 阳性细胞数的增加抑制了 GC 作用的发挥，促使激
素抵抗发生。使用地塞米松（常用的 GC 药物）干预后，
S6K1 70 kDa AD 小鼠皮肤组织中 GRα 阳性细胞数与干预前比较差
异无统计学意义，而应用沙棘果油或沙棘果油联合地塞
p-S6K1 70 kDa
米松干预后，小鼠皮肤组织中 GRα 阳性细胞数显著增
加；单独应用地塞米松干预时，GRβ 阳性细胞数增加最
AKT1/2 56 kDa
为显著，而沙棘果油单用或者联合地塞米松应用后能够
p-AKT 56 kDa 减少GRβ阳性细胞数，抑制激素抵抗。为了进一步验证
GRα、GRβ 的蛋白表达情况，本课题组分别提取了各组
36 kDa
GAPDH 小鼠皮肤组织中的核蛋白和总蛋白，并检测了 GRα、
GRβ 蛋白在皮肤组织中的表达情况。结果显示，使用
A组 B组 C组 D组 E组
图4 各组小鼠耳部皮肤组织中AKT/S6K1信号通路相 DNCB联合SEB刺激后，小鼠皮肤组织核蛋白中GRα蛋
关蛋白表达的电泳图 白表达水平与正常小鼠比较差异无统计学意义，总蛋白

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