Page 46 - 《中国药房》2023年15期

表1 6种N-亚硝胺类基因毒性杂质检测的MRM参数
1.0×10 6
定量离子 定性离子 定性离子
化合物名称 强度 5.0×10 5
m/z CE m/z CE m/z CE
NDMA 74.00→44.10 6.00 74.00→42.00 15.00 74.00→59.00 15.00 0
NDEA 102.00→85.10 6.00 102.00→56.20 15.00 102.00→29.10 6.00 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5
NEiPA 116.00→99.10 6.00 116.00→44.10 12.00 116.00→43.00 15.00 t/min
NDiPA 70.00→42.10 15.00 70.00→55.00 15.00 70.00→44.10 15.00 A.空白溶剂
NDPA 70.00→43.10 6.00 70.00→41.10 15.00 70.00→39.10 27.00 1.5×10 6
6
NDBA 84.00→56.10 15.00 84.00→42.10 15.00 84.00→41.00 15.00 强度 1.0×10 6 4 5
m/z：质荷比；CE：碰撞电压。 5.0×10 5 1 2 3
0
2.2 混合对照品贮备液的制备
3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5
精密称取 NDMA 对照品 9.72 mg、NDEA 对照品 t/min
B.系统适用性溶液
9.76 mg、NEiPA 对照品 9.04 mg、NDiPA 对照品 13.68
2.0×10 6
mg、NDPA 对照品 10.50 mg、NDBA 对照品 10.40 mg，置 1.5×10 6
于 10 mL 容量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇 强度 1.0×10 6 5
5.0×10
匀。精密量取各对照品溶液1 mL置于同一200 mL容量 0
3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5
瓶中，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品贮 t/min
C.供试品溶液（氯沙坦钾氢氯噻嗪片）
备液。
2.3 供试品溶液的制备 2.0×10 6 6 4 5 6
1.5×10
分别取氯沙坦钾原料药（500.0 mg）或氯沙坦钾片剂 强度 1.0×10 6 5 1 2 3
5.0×10
0
的细粉（约相当于氯沙坦钾 500.0 mg）或氯沙坦钾胶囊
3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5
内容物（约相当于氯沙坦钾 500.0 mg）于 50 mL 离心管 t/min
D.高质量浓度回收率溶液（氯沙坦钾氢氯噻嗪片）
中，加入溶解液（取氢氧化钠约4 g，加水500 mL溶解，再
1：NDMA；2：NDEA；3：NEiPA；4：NDiPA；5.NDPA；6：NDBA。
加入乙腈 50 mL，用水稀释至 1 000 mL，即得）20.0 mL， 图1 系统性试验的GC-MS混合离子色谱图
涡旋混合并振荡5 min，精密加入二氯甲烷4.0 mL萃取，
表2 6 种 N-亚硝胺类基因毒性杂质的线性关系、定量
振摇5 min，以10 000 r/min离心5 min，取下层（二氯甲烷
限与检测限考察结果
层）作为供试品溶液。
化合物名称 线性方程 r 线性范围/（ng/mL） 定量限/（ng/mL） 检测限/（ng/mL）
2.4 系统适用性试验 NDMA Y＝1 378.4X+1 951.1 1.000 0 4.9～486.0 4.86 0.97
精密量取混合对照品贮备液1 mL，置于10 mL容量 NDEA Y＝1 097.3X－3 104.1 0.999 9 4.9～488.5 4.88 0.98
NEiPA Y＝1 735.7X－2 233.7 0.999 9 4.5～451.5 4.52 0.90
瓶中，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶
NDiPA Y＝441.68X－212.1 0.999 8 6.8～683.5 6.84 1.37
液。取空白溶剂（二氯甲烷）、系统适用性溶液、供试品 NDPA Y＝1 092.8X－179.47 0.999 9 5.2～525.0 5.25 1.05
NDBA Y＝1 150X－1 024.2 0.999 8 5.2～520.0 5.20 1.04
溶液（氯沙坦钾氢氯噻嗪片）和“2.7”项下高质量浓度回
收率溶液（氯沙坦钾氢氯噻嗪片）各 1 μL，按“2.1”项下 噪比≈3 时，确定其检测限；当信噪比≈10 时，确定其定
检测条件进行测定，记录色谱图，详见图 1。结果表明， 量限，结果见表 1。由表 1 可知，各成分的定量限约为 5
空白溶剂不干扰NDMA、NDEA、NEiPA、NDiPA、NDPA、 ng/mL，最低检测限约为1 ng/mL。
NDBA的测定，且待测成分相邻色谱峰之间的分离度均 2.7 加样回收率试验

大于3.8，分离效果良好。 分别取氯沙坦钾原料药②（500.0 mg）或氯沙坦钾
2.5 线性关系考察 片、氯沙坦钾氢氯噻嗪片（约相当于氯沙坦钾500.0 mg）
精密量取混合对照品贮备液适量，用二氯甲烷分别 或氯沙坦钾胶囊内容物（约相当于氯沙坦钾 500.0 mg）
稀释 5 000、1 000、500、200、100、20、10 倍制成系列线性 于 50 mL 离心管中，分别加入 8、80、160 μL 混合对照品
工作液。分别取上述线性工作液，按“2.1”项下检测条件 贮备液，按“2.3”项下方法进行处理，制得低、中、高质量
进行测定，记录峰面积。以各成分质量浓度为横坐标 浓度的回收率溶液（每个质量浓度3份），按“2.1”项下色
（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，结果见表2。 谱条件进行测定，计算各质量浓度回收率溶液的加样回
2.6 检测限和定量限考察 收率，结果见表3。由表3可知，低质量浓度回收率溶液
精密量取混合对照品贮备液，用二氯甲烷逐步稀释 的平均加样回收率为 83.4%～103.0%（RSD 为 1.6%～
后，按“2.1”项下检测条件进行测定，记录色谱图。当信 6.3%，n＝3），中质量浓度回收率溶液的平均加样回收率

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