Page 41 - 《中国药房》2023年15期

翘脂素等成分 [2―6] 。为了提高连翘的综合利用价值，进 2.3 对照品溶液的制备
一步开发连翘花的相关产品，有必要建立连翘花中主要 分别称取芦丁、连翘酯苷 A、（+）-松脂素-4-O-β-D-
化学成分的含量测定方法，以控制其质量。基于此，本 吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素对照品适量，加80%甲
研究采用超高效液相色谱（ultra-performance liquid chro‐ 醇制成上述成分质量浓度分别为 0.950、1.050、1.180、

matography，UPLC）- 一 测 多 评（quantitative analysis of 1.822、1.270 mg/mL 的单一对照品储备液。分别精密量
multi-components by single marker，QAMS）法 [7―9] 测定连 取上述单一对照品储备液适量，置于同一 10 mL 量瓶
翘花中芦丁、连翘酯苷 A、（+）-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡 中，加 80% 甲醇至刻度，即得上述成分质量浓度分别为
萄糖苷、连翘苷、连翘脂素5种成分的含量，以期为连翘 95.0、105.0、118.0、182.2、63.5 μg/mL 的 混 合 对 照 品
花的质量控制提供依据。 溶液。
1 材料 2.4 阴性对照溶液的制备
1.1 主要仪器 按“2.2”项下方法制备缺连翘花的阴性对照溶液。
Acquity H-CLASS型超高效液相色谱仪、QSM四元 2.5 专属性试验
泵、eλ光电二极管阵列检测器、EMPOWER3型色谱工作 分别精密吸取“2.2～2.4”项下供试品溶液、混合对
站均购自美国Waters公司；XS105型十万分之一分析天 照品溶液及阴性对照溶液适量，按“2.1”项下色谱条件进

平购自瑞士Mettler Toledo公司。 样测定，结果显示，芦丁、连翘酯苷 A、（+）-松脂素-4-O-
1.2 主要药品与试剂 β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素的保留时间分别
芦丁、连翘酯苷 A、连翘苷对照品（批号分别为 为9.03、9.70、10.77、15.04、16.83 min，阴性对照溶液在相
100080-202012、111810-202108、110821-202117）均购自 应位置无干扰，结果见图1。
中国食品药品检定研究院；连翘脂素对照品（批号 0.14 1
0.12
200813）购自上海融禾医药科技发展有限公司；（+）-松 0.10
0.08 2
脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品（批号 210103）购自 AU 0.06 3
0.04 4 5
上海羽朵生物科技有限公司；上述对照品纯度均不低于 0.02
0
99.0%。 甲 醇 、乙 腈 均 为 色 谱 纯 ，购 自 美 国 Thermo 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
Fisher Scientific 公司；其余试剂均为分析纯。连翘花采 t/min
A.混合对照品溶液
自山西省长治市屯留区、临汾市汾西县（共 6 批，编号 2
0.32
0.28
S1～S6），经山西省药品审评中心（山西省医药与生命科 0.24 1
0.20
学研究院）秦金山高级工程师鉴定为真品。 AU 0.16
0.12 3
2 方法与结果 0.08 4 5
0.04
2.1 色谱条件 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
色谱柱为 ACQUITY UPLC HSS T3 C18 （2.1 mm× t/min
B.供试品溶液
100 mm，1.8 μm），以乙腈（A）-0.1% 磷酸溶液（B）为 0.14
0.12
流 动 相，进行梯度洗脱（0～5 min，15%A；5～15 min， 0.10
0.08
15%A→30%A；15～25 min，30%A→50%A；25～30 AU 0.06
0.04
min，50%A→60%A； 30～32 min，60%A→15%A）；流速 0.02
0
为 0.3 mL/min；检测波长为 275 nm（0～8 min）、330 nm 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
t/min
（8～10.5 min）、275 nm（10.5～32 min）；柱温为25 ℃；进 C.阴性对照溶液
样量为1 μL。 1：芦丁；2：连翘酯苷A；3：（+）-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；4：
2.2 供试品溶液的制备 连翘苷；5：连翘脂素。
图1 连翘花供试品溶液、混合对照品溶液及阴性对照
取连翘花药材，粉碎成细粉，精密称取 0.2 g ，置于
溶液的色谱图
25 mL 容量瓶中；精密加入 70% 甲醇 20 mL，密塞，称定
质量；超声（功率250 W，频率40 kHz）处理40 min，放冷， 2.6 线性关系考察
加甲醇至刻度，摇匀，用0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤 精密吸取混合对照品溶液，加甲醇稀释成不同浓度
液，即得。 的系列对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，以

中国药房 2023年第34卷第15期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 15 · 1827 ·