Page 45 - 《中国药房》2023年15期
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formulations.  CONCLUSIONS  The  method  is  good  in  separation  effect，  highly  accurate，  sensitive  and  simple.  It  can  be  used  in
          the determination of the 6 kinds of N-nitrosamines genotoxic impurities.
          KEYWORDS    GC-MS/MS； losartan potassium； raw material； formulations； N-nitrosamines； genotoxic impurities



              氯沙坦（losartan）是第一个非肽类高选择性血管紧                    1 材料
          张素Ⅱ受体拮抗剂，被广泛用于治疗高血压和心力衰                            1.1 主要仪器
          竭 [1―2] 。氯沙坦在降压的同时还可明显降低尿酸水平，                          本研究所用的主要仪器有：GC2030/TQ8050型GC-
          使高血压患者的心血管获益增加 ，且其效果好、不良反                          MS 仪（日本 Shimadzu 公司），XP205 型电子天平（美国
                                      [3]
                    [4]
          应发生率低 。                                            Mettler Toledo公司），CR22GII型离心机（日本Hitachi公
              2018 年 7 月，N-亚硝基二甲胺（N-nitrosodimethy-          司）等。
          lamine，NDMA）在某企业生产的缬沙坦原料药中被检                       1.2 主要药品与试剂
            [5]
          出 。氯沙坦与缬沙坦同属沙坦类药物，均含有四氮唑                               氯 沙 坦 钾 原 料 药 ①（批 号 10100-210211，纯 度
          结构，在制备工艺上具有相同之处，故氯沙坦也有存在                           99.6%）购自浙江天宇药业股份有限公司；氯沙坦钾原料
                                                [6]
          NDMA 等 N-亚硝胺类基因毒性杂质的风险 。基因毒                        药②（批号 C5398-21-031，纯度 99.7%）、氯沙坦钾片（批
          性杂质能够与遗传物质发生反应，细胞 DNA 会受到直                         号0000029755，规格50 mg）均购自浙江华海药业股份有
                                                             限公司；氯沙坦钾胶囊（批号32111037，规格50 mg）购自
          接或间接的损伤，导致基因突变并有可能诱发癌症 。
                                                       [7]
                                                             北京福元医药股份有限公司；氯沙坦钾氢氯噻嗪片（批
          基因毒性杂质即使在微量的情况下，对服药者（尤其是
                                                             号 U038019，规格 50 mg）购自美国 Merck 公司；NDMA
                                     [8]
          长期服药者）都具有严重的危害 。这一事件引起了公
                                                             对照品（批号 LRAC9913，纯度 100%）购自美国 Supelco
          众和药品监管机构对N-亚硝基类基因杂质的广泛关注，
                                                             公司；NDEA 对照品（批号 51068-202103，纯度 100%）购
          各国药品监管部门纷纷发布了检测方法                 [9―11] 。
                                                             自中国食品药品检定研究院；NEiPA 对照品（批号 27M-
              N-亚硝胺类基因毒性杂质的作用机制是破坏 DNA
                                                             WSX-19-4，纯度 100%）、NDiPA 对照品（批号 13O-DRE-
          的复制和损伤机体蛋白质的结构。其一旦被人体摄
                                                             10-5，纯度 100%）、NDPA 对照品（批号 16N-JRT-11-7，纯
          入，即通过细胞色素 P450 酶迅速发生代谢活化，生成
                                                             度 100%）、NDBA 对照品（批号 16N-HWG-03-7，纯度
          具有活性的小分子醛和烷基，与 DNA 和蛋白质结合，
                                                             100%）均 购 自 美 国 Panphy 公 司 ；二 氯 甲 烷（批 号
          而后经过一系列生化反应，生成烷基鸟嘌呤，进而引
                                                             22085094，色谱纯）购自美国Fisher公司；氢氧化钠（批号
                         [12]
          起细胞遗传突变 。世界卫生组织癌症研究机构发
                                                             20210220，分析纯）购自国药集团化学试剂有限公司；水
          布的致癌清单中，包含了 NDMA、N-亚硝基二乙胺（N-
                                                             为屈臣氏蒸馏水。
          nitrosodiethylamine，NDEA）、N-亚硝基-N-乙基异丙胺
                                                             2 方法与结果
         （N-ethyl-N-nitroso-2-propanamine，NEiPA）、N-亚硝基二
                                                             2.1 检测条件
          异丙胺（N-nitrosodiisopropylamine，NDiPA）、N-亚硝基二
                                                             2.1.1 色谱条件
          苯胺（N-nitrosodipropylamine，NDPA）、N-亚硝基二丁胺
                                                                 色 谱 柱 为 SHIMADZU  SH-L-17Sil  MS 毛 细 管 柱
         （N-nitrosodibutylamine，NDBA）等毒性物质，对上述 N-
                                                            （30 m×0.25 mm，0.25 μm）；柱温为程序升温：以初始温
          亚硝胺类基因毒性杂质进行检测控制对保证原料药及
                                                             度 40  ℃ 维 持 0.5  min 后 ，以 20  ℃/min 的 速 率 升 至
          其制剂质量具有重要意义。                                       200 ℃，再以 60 ℃/min 的速率升至 250 ℃、维持 3 min；
              目前 N-亚硝胺类基因毒性杂质的常规检测方法有                        进样口温度为250 ℃；进样量为1 μL；载气为氦气，流速
                                     [13]
          气相色谱-质谱联用（GC-MS）法 、液相色谱-质谱联用                       为1 mL/min。
          法 ，但尚无对氯沙坦钾原料药及其相关制剂中N-亚硝                          2.1.2 质谱条件
            [14]
          胺类基因毒性杂质检测方法的报道。本研究采用气相                                离子源为电子轰击源（electron ionization，EI），离子

          色谱-串联质谱（GC-MS/MS）法同时测定氯沙坦钾原料                       源温度为 250 ℃；溶剂延迟时间为 3.1 min；采集模式为
          药及其制剂中上述6种N-亚硝胺类基因毒性杂质含量，                          多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）模式。
          为氯沙坦钾原料药及其制剂的质量控制提供依据。                             MRM参数见表1。


          中国药房  2023年第34卷第15期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 15    · 1831 ·
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