Page 37 - 《中国药房》2023年15期
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2.5 NCI-H226 细胞中 NF-κB 信号通路相关蛋白表达 两两比较采用Tukey检验。检验水准α=0.05。
水平的检测 3 结 果
取对数生长期细胞调整密度至 2×10 个/mL,再接 3.1 连翘醇提物对NCI-H226细胞增殖能力的影响
5
种至96孔板中,按“2.2”项下方法分组、给药、培养后,加
与对照组比较,连翘醇提物各浓度组和阳性对照组
入裂解液提取总蛋白,采用BCA法测定蛋白含量,然后
细胞增殖率均显著降低(P<0.05)。与连翘醇提物中浓
进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,转膜,封闭
度组比较,抑制剂组细胞增殖率显著降低(P<0.05),而
2 h;加入 IκBα、NF-κB p65、p-IκBα、p-NF-κB p65、β-
激活剂组显著升高(P<0.05)。结果见图1(连翘醇提物
actin一抗(稀释度分别为1∶500、1∶2 000、1∶500、1∶500、
低、高浓度组图略)、表1。
1∶25 000),4 ℃孵育过夜,洗涤后加入二抗孵育 2 h;洗
3.2 连翘醇提物对 NCI-H226细胞迁移能力的影响
涤后加入显影液,使用凝胶成像系统拍照记录,实验重
复3次。以目的蛋白与内参蛋白的灰度值比值表示其表 与对照组比较,连翘醇提物各浓度组与阳性对照组
达水平。 细胞迁移率均显著降低(P<0.05)。与连翘醇提物中浓
2.6 统计学方法 度组比较,抑制剂组细胞迁移率显著降低(P<0.05),而
采用GraphPad Prism 8软件进行数据分析。计量资 激活剂组显著升高(P<0.05)。结果见图2(连翘醇提物
料以 x ˉ± s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间 低、高浓度组图略)、表1。
Hoechst
EdU
Merge
对照组 连翘醇提物中浓度组 激活剂组 抑制剂组 阳性对照组
图1 连翘醇提物对NCI-H226细胞增殖影响的荧光显微图(比例尺=100 μm)
0 h
24 h
对照组 连翘醇提物中浓度组 激活剂组 抑制剂组 阳性对照组
图2 连翘醇提物对NCI-H226细胞迁移影响的显微图
中国药房 2023年第34卷第15期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 15 · 1823 ·