Page 37 - 《中国药房》2023年15期
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2.5 NCI-H226 细胞中 NF-κB 信号通路相关蛋白表达                  两两比较采用Tukey检验。检验水准α=0.05。
          水平的检测                                              3 结 果
              取对数生长期细胞调整密度至 2×10 个/mL,再接                     3.1 连翘醇提物对NCI-H226细胞增殖能力的影响
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          种至96孔板中,按“2.2”项下方法分组、给药、培养后,加
                                                                 与对照组比较,连翘醇提物各浓度组和阳性对照组
          入裂解液提取总蛋白,采用BCA法测定蛋白含量,然后
                                                             细胞增殖率均显著降低(P<0.05)。与连翘醇提物中浓
          进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,转膜,封闭
                                                             度组比较,抑制剂组细胞增殖率显著降低(P<0.05),而
          2 h;加入 IκBα、NF-κB p65、p-IκBα、p-NF-κB p65、β-
                                                             激活剂组显著升高(P<0.05)。结果见图1(连翘醇提物
          actin一抗(稀释度分别为1∶500、1∶2 000、1∶500、1∶500、
                                                             低、高浓度组图略)、表1。
          1∶25 000),4 ℃孵育过夜,洗涤后加入二抗孵育 2 h;洗
                                                             3.2 连翘醇提物对 NCI-H226细胞迁移能力的影响
          涤后加入显影液,使用凝胶成像系统拍照记录,实验重
          复3次。以目的蛋白与内参蛋白的灰度值比值表示其表                               与对照组比较,连翘醇提物各浓度组与阳性对照组
          达水平。                                               细胞迁移率均显著降低(P<0.05)。与连翘醇提物中浓
          2.6 统计学方法                                          度组比较,抑制剂组细胞迁移率显著降低(P<0.05),而
              采用GraphPad Prism 8软件进行数据分析。计量资                 激活剂组显著升高(P<0.05)。结果见图2(连翘醇提物
          料以 x ˉ± s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间                     低、高浓度组图略)、表1。




           Hoechst








           EdU








           Merge




                   对照组             连翘醇提物中浓度组              激活剂组               抑制剂组               阳性对照组
                          图1 连翘醇提物对NCI-H226细胞增殖影响的荧光显微图(比例尺=100 μm)





           0 h









           24 h




                   对照组             连翘醇提物中浓度组              激活剂组               抑制剂组               阳性对照组
                                    图2 连翘醇提物对NCI-H226细胞迁移影响的显微图


          中国药房  2023年第34卷第15期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 15    · 1823 ·
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