Page 26 - 《中国药房》2023年12期

表1 归脾丸对小鼠血清中 IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α 含
癌症通路
TNF信号通路 SampleGroup 量的影响（x±s，n＝18，pg/mL）
癌症中的蛋白聚糖 Homo sapiens
脂质和动脉粥样硬化 Count 组别 IL-2 IL-4 IL-6 TNF-α
C型凝集素受体信号通路
15 CON组 56.21±1.54 20.17±0.47 9.06±0.37 67.53±1.89
冠状病毒病-COVID-19
20 MOD组 43.34±1.09 a 11.92±0.69 a 12.25±0.45 a 101.75±3.15 a
志贺氏菌病 25 b b b b
卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染 30 POS组 52.23±0.80 18.03±0.32 9.64±0.90 75.08±3.59
恰加斯病 GD组 46.04±0.62 c 14.08±0.44 c 11.48±0.22 c 91.08±3.09 c
negLog10_Pvalue
AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用 GG组 49.64±0.61 b 15.98±0.33 b 10.11±0.26 b 81.26±3.32 b
鼠疫感染 16
乙型肝炎 a：与CON组比较，P＜0.01；b：与MOD组比较，P＜0.01；c：与MOD
14
内分泌的阻力 组比较，P＜0.05
12
PI3K-Akt信号通路 2.2.4 小鼠血清中免疫球蛋白含量检测 取“2.2.3”项
松弛素信号通路
0.06 0.08 0.10 下方法处理后的血清样品，采用 ELISA 法检测血清中
GeneRatio
图1 KEGG富集分析结果图 IgG、IgM、IgA 的含量。具体实验方法参考各试剂盒说
明书，结果如表2所示。与CON组比较，MOD组小鼠血
2.2 动物药效学实验
清中 IgG、IgM 和 IgA 含量均显著降低（P＜0.01）；与
2.2.1 统计学处理 实验数据使用SPSS 19.0软件进行
MOD 组比较，POS 组、GD 组、GG 组小鼠血清中 IgG、
数据分析，以x±s表示。多组间比较采用单因素方差分
IgM和IgA含量均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。
析；两组间比较，方差齐时采用 LSD-t 检验，方差不齐时
表2 归脾丸对小鼠血清中 IgG、IgM、IgA 含量的影响
采用Dunnett’s T3检验。检验水准α＝0.05。
（x±s，n＝18，pg/mL）
2.2.2 动物分组、给药及取材 将 105 只健康雄性 ICR
组别 IgG IgM IgA
小鼠随机分为 5 组，分别为空白对照（CON）组、模型对 CON组 1.64±0.02 355.67±48.38 47.49±9.04
照（MOD）组、阳性对照（POS）组、低浓度归脾丸（GD）组 MOD组 0.85±0.19 a 187.33±60.17 a 17.49±1.17 a
和高浓度归脾丸（GG）组，每组 21 只。各组小鼠适应性 POS组 1.49±0.29 b 313.33±31.12 b 44.42±0.93 b
GD组 1.01±0.17 c 248.05±16.18 c 34.38±4.03 c
喂养 1 周后，除 CON 组皮下注射生理盐水外，其余各组 GG组 1.36±0.22 b 277.33±56.85 b 41.40±1.09 b
小鼠皮下注射 400 mg/kg D-gal 以复制衰老模型 。与 a：与CON组比较，P＜0.01；b：与MOD组比较，P＜0.01；c：与MOD
[12]
CON 组小鼠相比，MOD 组小鼠在造模后期逐渐出现不 组比较，P＜0.05
活泼，体形消瘦，皮肤松弛，食欲不振，毛发稀疏、竖起时 2.2.5 小鼠脾脏指数检测 末次给药前称量小鼠体质
失去光泽等一系列衰老体征，表明本实验衰老模型造模 量，眼球采血后处死小鼠，取其脾脏，去除周围结缔组织
成功。给药浓度经前期急性毒性实验及预实验筛选得 后用生理盐水洗涤、滤纸吸干，称质量。根据以下公式
到，其中 CON 组与 MOD 组灌胃蒸馏水，POS 组按 300 计算脾脏指数：脾脏指数＝脾脏质量（mg）/体质量（g）×
mg/kg 灌胃匹多莫德口服溶液，GD 组按 300 mg/kg 灌胃 100%。结果显示，与 CON 组小鼠脾脏指数[（3.07±
归脾丸水溶液，GG 组按 600 mg/kg 灌胃归脾丸水溶液， 0.15）%]比较，MOD 组小鼠脾脏指数[（2.05±0.16）%]显
每日 1 次，每次 10 mL/kg，共计 8 周。末次给药 30 min 著降低（P＜0.01）；与 MOD 组比较，POS 组小鼠脾脏指
后，用乙醚麻醉小鼠，每组18只小鼠摘除眼球采血用于
数 [（2.63±0.04）% ]、GD 组 小 鼠 脾 脏 指 数 [（2.25±
检测血清中细胞因子含量和免疫球蛋白含量、脾脏指
0.02）%]和 GG 组小鼠脾脏指数[（2.46±0.07）%]均显著
数、脾脏组织氧化相关因子活性/含量及相关蛋白表达。
升高（P＜0.05或P＜0.01）。
每组剩余3只小鼠处死后取脾脏组织用于脾脏组织病理
2.2.6 小鼠脾脏组织病理学观察 在各组剩余的3只小
学观察。
鼠中，取其脾脏组织进行石蜡包埋；将包埋好的组织蜡
2.2.3 小鼠血清中细胞因子含量检测 通过眼球取血
块切成 5～10 μm 厚的切片，展片后进行 HE 染色，在光
法收集小鼠血液，以 3 500 r/min 离心 10 min，取上清液
学显微镜下进行观察，结果如图 2 所示。在 CON 组中，
进行检测，通过ELISA法检测小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-
小鼠脾细胞排列良好，白髓和红髓界限清晰，脾小结明
6、TNF-α的含量。具体方法参照各试剂盒说明书，结果
如表1所示。与CON组比较，MOD组小鼠血清中IL-2、 显；MOD组小鼠脾细胞排列紊乱，白髓和红髓之间界限
IL-4 含量均显著降低（P＜0.01），而 IL-6、TNF-α 含量均 不清晰，且红髓内有严重的淋巴细胞弥漫性增生和浸润
显著升高（P＜0.01）；与 MOD 组比较，POS 组、GD 组、 现象，脾小结模糊，脾脏中脾小体的生发中心全部消失；
GG 组小鼠血清中 IL-2、IL-4 含量均显著升高（P＜0.05 POS组、GD组和GG组的脾脏淋巴细胞弥漫性增生和浸
或 P＜0.01），IL-6、TNF-α 含量均显著降低（P＜0.05 或 润现象较 MOD 组明显缓解，且 GG 组较 GD 组效果
P＜0.01）。 更优。

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