Page 85 - 《中国药房》2023年11期

原酸共8种成分同时进行检测，更加全面评价金芪降糖 电压为 4.5 kV；辅助气 1 为 55 psi，辅助气 2 为 55 psi；气
片的质量。
上述 8 种成分中，小檗碱与表小檗碱、3，5-二-O-咖
啡酰奎宁酸与 4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸均为同分异构
体，具有相同的质谱离子信息，当采用普通液相色谱质
谱联用法时，仅能根据保留时间进行定性分析，无法反
映出相关成分的含量。离子淌度质谱法是一种将离子
淌度分离与质谱分析相结合的新型分析技术，其在质谱
分析前提供了基于气相离子形状、大小、电荷数等因素
的多维度分离，即使同分异构体的保留时间完全一致，
也能因淌度参数（分离电压、补偿电压）的不同而实现定
性定量测定 [6—7] 。基于此，本研究采用离子淌度质谱法
同时测定金芪降糖片中上述8种成分的含量，以期为该
制剂的质量控制提供参考。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器有 5500+ QTRAP 型离子淌度
液相色谱质谱联用仪（美国 AB SCIEX 公司）、LC-40 型
超快速液相色谱仪（日本Shimadzu公司）、MS 105 DU型
十万分之一电子分析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有
限公司]、Arium comfortⅡ型超纯水仪（德国 Sartorius 公
司）、RK 255型超声波清洗器（德国Bandelin公司）。
1.2 主要药品与试剂
本 研 究 所 用 对 照 品 盐 酸 小 檗 碱（批 号 110713-
201814，纯度86.7%）、盐酸黄连碱（批号112026-201601，
纯度 95.1%）、盐酸巴马汀（批号 110732-201913，纯度
85.7%）、毛蕊异黄酮葡萄糖苷（批号 111920-201606，纯
度 97.6%）、绿原酸（批号 110753-202119，纯度 96.3%）、
3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸（批号 111782-201807，纯度
94.3%）、4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸（批号11894-202104，纯
度 95.1%）均购自中国食品药品检定研究院；表小檗碱
（批号B20108，纯度98%）购自上海源叶生物科技有限公
司；甲醇、乙腈、甲酸为色谱纯，购自美国 Thermo Fisher
Scientific 公司；3 批金芪降糖片均购自天津中新药业集
团股份有限公司，批准文号为国药准字Z10920027，批号
分别为870179、870147、870045。
2 方法与结果
2.1 离子淌度质谱法条件
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Waters ACQUITY UPLC
HSS T3（2.1 mm×50 mm，1.8 μm）；流动相为 0.1% 甲酸
溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0～1.0 min，5%B；1.0～
3.0 min，5%B→95%B；3.0～5.0 min，95%B；5.0～5.1 min，
95%B→5%B；5.1～7.0 min，5%B）；流速为 0.3 mL/min；
柱温为40 ℃；进样量为5 μL。
2.1.2 质谱条件 采用电喷雾离子源（ESI），在正、负离
子模式下进行扫描检测，辅助加热温度为 450 ℃；喷雾
中国药房 2023年第34卷第11期
帘气为20 psi；锥孔电压、碰撞能量等参数见表1。
表1 各成分离子淌度质谱法的相关参数
保留时 锥孔电 碰撞能 电离 淌度分离 淌度补偿
成分 母离子m/z 子离子m/z
间/min 压/V 量/eV 模式 电压/V 电压/V
+
表小檗碱 2.82 337.2[M+H] *321.1[M+H-CH 4] + 85 30 + 3 400 －3.20
293.4[M+H-C 3H 8] + 85 40
小檗碱 2.91 337.2[M+H] *321.1[M+H-CH 4] + 85 30 + 3 400 －1.50
+
293.4[M+H-C 3H 8] + 85 40
黄连碱 2.83 321.1[M+H] *293.2[M+H-C 2H 4] + 35 39 + 3 300 －4.50
+
278.3[M+H-C 3H 7] + 50 46
+
巴马汀 2.88 353.3[M+H] *337.1[M+H-CH 4] + 33 37 + 3 300 －0.78
309.3[M+H-C 3H 8] + 33 40
毛蕊异黄酮 2.69 447.4[M+H] *285.1[M+H-C 9H 6O 3] + 87 24 + 3 300 －9.02
+
葡萄糖苷 253.2[M+H-C 7H 14O 6] + 80 57
3，5-二-O-咖 2.76 515.2[M-H] － *353.1[M-H-C 9H 6O 3] － －80 －25 － 3 300 －0.46
啡酰奎宁酸 191.1[M-H-C 18H 12O 6] － －80 －40
4，5-二-O-咖 2.76 515.2[M-H] － *353.1[M-H-C 9H 6O 3] － －80 －25 － 3 300 －3.45
啡酰奎宁酸 191.1[M-H-C 18H 12O 6] － －80 －40
绿原酸 2.54 353.2[M-H] － *191.1[M-H-C 9H 6O 3] － －80 －25 － 3 400 －13.79
162.2[M-H-C 7H 12O 6] － －80 －5
*：定量离子
2.1.3 离子淌度条件 修饰剂为异丙醇，淌度池温度为
125 ℃，修饰剂气流速度为 3.0 μL/min，增强分辨率为
1.0 L/min，淌度分离电压、补偿电压等参数见表1。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取表小檗碱、盐酸小
檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、
3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸、绿原
酸对照品各适量，分别置于 10 mL 容量瓶中，以甲醇定
容，摇匀，制成上述成分质量浓度分别为 0.106、0.134、
0.134、0.149、0.128、0.142、0.128、0.155 mg/mL 的单一对
照品溶液。分别精密量取上述单一对照品溶液各适量，
置同一10 mL容量瓶中，加入50%甲醇溶液定容，摇匀，
即得上述成分质量浓度分别为 10.6、13.4、13.4、14.9、
12.8、14.2、12.8、15.5 μg/mL的混合对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取金芪降糖片，除去包衣，
充分研磨，取粉末约10.0 mg，精密称定，置于50 mL容量
瓶中，用 50% 甲醇溶液定容，超声溶解（频率 33 kHz，功
率 250 W）60 min；放置冷却，摇匀，以 0.22 μm 微孔滤膜
滤过，取续滤液，即得。
2.3 系统适用性试验
取“2.2”项下各单一对照品溶液和供试品溶液适量，
按“2.1”项下条件进样测定，记录色谱图。结果显示，两
种溶液中8种成分的色谱峰均响应强，峰形对称尖锐，分
离良好。结果见图1。
2.4 线性关系考察
精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，以50%
甲醇溶液逐级稀释成系列浓度的混合对照品溶液，其中
表小檗碱质量浓度分别为33.08、132.3、264.6、529.2、1 058、
2 117 ng/mL，小 檗 碱 质 量 浓 度 分 别 为 168.0、336.0、
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