Page 44 - 中国药房2023年10期

0.04 0.5
a
0.4
0.03
a 空白对照组
增殖抑制率 0.02 增殖抑制率 0.2 a
0.3
0.01
0.1
0 0 柚皮素40 μmol/L组
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
A. LO2细胞 B. LX2细胞
DAPI collagen Ⅰ 叠加
Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素2 μmol/L组；Ⅲ：柚皮素5 μmol/L组；
A. collagen Ⅰ
Ⅳ：柚皮素10 μmol/L组；Ⅴ：柚皮素20 μmol/L组；Ⅵ：柚皮素40 μmol/L
组；a：与空白对照组比较，P＜0.05
图1 柚皮素对 LO2 和 LX2 细胞增殖抑制率的影响 空白对照组
（x±s，n＝6）
3.2 柚皮素对 LX2 细胞中肝纤维化标志物蛋白及
mRNA表达的影响

Western blot 实验结果显示，与空白对照组比较，柚 柚皮素40 μmol/L组
皮素各浓度组 collagen Ⅰ（柚皮素 10 μmol/L 组除外）、
α-SMA 蛋白的表达水平均显著降低（P＜0.05），且上述 DAPI α-SMA 叠加
B. α-SMA
作用有浓度依赖趋势；免疫荧光实验也证实了上述结
图3 柚皮素对 LX2 细胞中 collagen Ⅰ、α-SMA 蛋白表
果。结果见图2、图3。
达的影响（免疫荧光实验，×20）
collagen Ⅰ 181 kDa a
1.5 a 1.5 a a
α1-pro collagen Ⅰ mRNA α-SMA mRNA
α-SMA 42 kDa 1.0 1.0 a

β-actin 42 kDa 0.5 0.5
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
A.蛋白表达电泳图
0 0
1.5 a 1.5 a Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ
a a Ⅳ Ⅳ
a A. α1-pro collagen Ⅰ mRNA B. α-SMA mRNA
Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素10 μmol/L组；Ⅲ：柚皮素20 μmol/L组；
1.0
collagen Ⅰ α-SMA 1.0 Ⅳ：柚皮素40 μmol/L组；a：与空白对照组比较，P＜0.05
0.5
0.5
图4 柚皮素对 LX2 细胞中 α1-pro collagen Ⅰ、α-SMA
mRNA表达的影响（q-PCR实验，x±s，n＝3）
0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
B.蛋白表达柱形图（x±s，n＝3）
0.25
Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素10 μmol/L组；Ⅲ：柚皮素20 μmol/L组；
Ⅳ：柚皮素40 μmol/L组； a：与空白对照组比较，P＜0.05 0.20
图2 柚皮素对 LX2 细胞中 collagen Ⅰ、α-SMA 蛋白表 Ⅰ Ⅱ 凋亡细胞比例 0.15
达的影响（Western blot实验） 0.10
0.05
q-PCR实验结果显示，柚皮素各浓度组α1-pro colla‐ 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
gen Ⅰ（柚皮素 10 μmol/L 组除外）、α-SMA mRNA 的表
Ⅲ Ⅳ B.凋亡细胞比例折线图
达水平均显著降低（P＜0.05），且上述作用有浓度依赖 A.细胞凋亡显微图（×20） （x±s，n＝3）
趋势。结果见图4。 Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素10 μmol/L组；Ⅲ：柚皮素20 μmol/L组；
Ⅳ：柚皮素40 μmol/L组
3.3 柚皮素对 LX2 细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的
图5 柚皮素对LX2细胞凋亡的影响（台盼蓝染色实验）
影响
台盼蓝染色实验结果显示，不同浓度的柚皮素均可 Western blot 实验结果显示，与空白对照组比较，柚
诱导LX2细胞凋亡并提高其凋亡比例，且上述作用有浓 皮素各浓度组细胞中 Bcl-2 蛋白的表达水平均显著降
度依赖趋势。结果见图5。 低，Bax（柚皮素 10 μmol/L 组除外）、cleaved caspase-3

· 1190 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 10 中国药房 2023年第34卷第10期