Page 45 - 中国药房2023年10期

（柚皮素10 μmol/L组除外）蛋白的表达水平均显著升高
（P＜0.05），且上述作用有浓度依赖趋势。结果见图6。

Bcl-2 26 kDa

Bax 21 kDa
A.空白对照组显微图（×40） B.柚皮素组显微图（×40）
0.5
凋亡细胞比例 0.3
caspase-3 32 kDa 0.4
0.2
cleaved caspase-3 17 kDa 0.1
0
空白对 柚皮 柚皮素+
β-actin 42 kDa 照组 素组 FMK组
D.各组凋亡细胞比例的折线图
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ C.柚皮素+FMK组显微图（×40） （x±s，n＝3）
A.蛋白表达电泳图 图8 柚皮素诱导细胞凋亡的验证实验结果（台盼蓝染
a
1.5 a 1.8 a
a 2.0 a a 色实验）
a
1.0 1.5 1.4
Bcl-2 Bax 1.0 cleaved caspase-3 1.6
0.5 1.2
0.5 1.0 空白对照组
0 0 0.8
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
B. Bcl-2蛋白表达 C. Bax蛋白表达 D. cleaved caspase-3
柱形图 柱形图 蛋白表达柱形图
Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素10 μmol/L组；Ⅲ：柚皮素20 μmol/L组； 柚皮素组
Ⅳ：柚皮素40 μmol/L组；a：与空白对照组比较，P＜0.05
图6 柚皮素对 LX2 细胞中凋亡相关蛋白表达的影响
（Western blot实验，x±s，n＝3）
3.4 验证实验结果 柚皮素+FMK组

MTT实验结果（图7）显示，柚皮素组细胞的增殖抑
制率较空白对照组显著降低（P＜0.05）；柚皮素+FMK组 green red 叠加
图9 柚皮素诱导细胞凋亡的验证实验结果（JC-1 实
细胞的增殖抑制率较柚皮素组显著升高（P＜0.05），而
验，×40）
柚皮素+NEC-1组、柚皮素+F1组细胞的增殖抑制率与柚
皮素组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。台盼蓝染 4 讨论
色实验结果（图8）显示，40 μmol/L的柚皮素可诱导细胞 肝纤维化是机体对肝实质损伤的一种修复反应，反
映了肝脏修复与瘢痕组织进行性肝实质置换之间的平
凋亡，提高凋亡细胞比例；而FMK可逆转柚皮素的这种
衡，在此过程中，HSC 是负责纤维细胞外基质沉积的主
作用。JC-1 实验结果（图 9）进一步说明，柚皮素能造成
[11]
要细胞，能驱动肝脏瘢痕的形成 。HSC 的活化、迁移
细胞线粒体膜电位的降低，从而诱导细胞凋亡，而FMK
和增殖由涉及生长因子、脂毒性、炎症和应激的复杂信
可逆转柚皮素的这种作用。
号网络控制；相反，清除活化的 HSC 是解决细胞纤维化
1.5 a b
的先决条件。因此，调节HSC活性的途径可能是防治肝
[3]
纤维化的潜在靶点 。近年来，天然化合物逐渐走入研
1.0
增殖抑制率 0.5 究人员的视野，柚皮素就是其中之一。作为一种天然黄
酮类成分，其具有广泛的抗炎、抗氧化等多种生物学活
[12]
性，且也有文献证实了该成分具有良好的保肝活性 ，
0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 但其是否能够改善肝纤维化及其作用分子机制尚不清
Ⅰ：空白对照组；Ⅱ：柚皮素组；Ⅲ：柚皮素+NEC-1组；Ⅳ：柚皮素+ 楚。基于此，本研究拟通过体外实验来初步探究柚皮素
F1组；Ⅴ：柚皮素+FMK组；a：与空白对照组比较，P＜0.05；b：与柚皮素
组比较，P＜0.05 抗肝纤维化的潜在作用及机制。
图7 柚皮素诱导细胞凋亡的验证实验结果（MTT实验， α-SMA是HSC活化的标志物；collagen Ⅰ是HSC活
x±s，n＝6） 化后所释放的细胞外基质的主要成分，也是纤维的重要

中国药房 2023年第34卷第10期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 10 · 1191 ·