Page 38 - 《中国药房》2023年9期

抗，37 ℃孵育 30 min。二抗孵育完成后向各切片加入 3.2 红景天苷对小鼠心肌组织纤维化程度的影响
50 μL SABC 放大剂，37 ℃条件下加热 20 min，以 DAB Masson 染色结合 Sirius Red 染色结果显示，对照组
显色、苏木素复染，脱水、透明、封片后在显微镜下观察， 小鼠心肌细胞形态正常，细胞排列规则，胶原纤维沉积
目的蛋白在胞质中呈棕褐色。每张切片随机选取5个放 程度较低。与对照组比较，模型组小鼠心肌间质中大量
大倍数为100倍的视野拍照，并用Image J软件分析蛋白 胶原沉积，心肌细胞形态不规则、排列紊乱，2 种染色方
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阳性细胞积分 ，软件自带计算结果。表达相关目的蛋
法得出的心肌组织中CVF均显著升高（P＜0.01）。与模
白的细胞染色后会出现棕褐色颗粒，棕褐色程度越深说
型组比较，红景天苷各剂量组小鼠心肌间质中胶原沉积
明该细胞表达某目的蛋白水平越高。
程度减轻，心肌细胞排列较为规则，形态有所恢复，2 种
2.7 统计学分析
染色方法得出的心肌组织中 CVF 均显著降低（P＜0.05
使用 SPSS 24.0 和 GraphPad Prism 8.0 软件进行统
或P＜0.01）。结果见图2。
计学分析，计量资料以x±s表示，多组间比较采用方差分
析，进一步两两比较采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。
3 结果
3.1 红景天苷对小鼠心肌组织病理变化的影响
HE染色结果显示，与对照组比较，模型组小鼠心肌
细胞间出现明显的炎性细胞浸润，心肌细胞体积明显增
A B
大，心肌纤维紊乱，细胞基质明显增加。与模型组比较，
红景天苷中、高剂量组小鼠的炎性细胞浸润、心肌纤维
紊乱、心肌细胞肥大、细胞基质增加程度均得到一定改
善，红景天苷高剂量组效果更加明显。与对照组比较，
模型组小鼠心肌组织中的心肌细胞横径显著增加（P＜
0.01）；与模型组比较，红景天苷各剂量组小鼠的心肌细 C D
60 a
胞横径均显著减小（P＜0.05或P＜0.01）。结果见图1。
b b
40 c
CVF/% 20

0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
E F
A～E：依次为对照组、模型组、红景天苷低剂量组、红景天苷中剂
A B
量组、红景天苷高剂量组显微图，箭头所指区域显示心肌胶原纤维堆
积；F：CVF柱状图；Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：红景天苷低剂量组；Ⅳ：
红景天苷中剂量组；Ⅴ：红景天苷高剂量组；a：与对照组比较，P＜
0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组比较，P＜0.01
图2 各组小鼠心肌组织纤维化 Masson 染色显微图
（×100）及CVF柱状图（x±s，n＝5）
C D
3.3 红景天苷对小鼠心肌组织纤维化和焦亡相关指标
40 a b c mRNA表达的影响
心肌细胞横径/μm 20 c 与对照组比较，模型组小鼠心肌组织中 Col Ⅰ、
30

10
0 α-SMA、TLR4、NLRP3、caspase-1、GSDMD 的 mRNA 表
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 达水平均显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，红景天
E F
A～E：依次为对照组、模型组、红景天苷低剂量组、红景天苷中剂 苷高剂量组小鼠心肌纤维化相关指标 Col Ⅰ、α-SMA
量组、红景天苷高剂量组显微图，箭头所指区域显示心肌细胞肥大、心 的 mRNA 表达水平和焦亡相关指标 TLR4、NLRP3、
肌纤维结构紊乱；F：心肌细胞横径柱状图；Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：红 caspase-1、GSDMD 的 mRNA 表 达 水 平 均 显 著 降 低
景天苷低剂量组；Ⅳ：红景天苷中剂量组；Ⅴ：红景天苷高剂量组；a：与对
照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组比较，P＜0.01 （P＜0.05 或 P＜0.01）；红景天苷中剂量组小鼠 α-SMA、
图1 各组小鼠心肌组织病理形态学观察显微图（HE caspase-1的mRNA表达水平也显著降低（P＜0.05）。结
染色，×100）及心肌细胞横径柱状图（x±s，n＝5） 果见图 3。

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