Page 43 - 《中国药房》2023年8期
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空白组                                   表 5 各组大鼠肠道菌群相对丰度及 F/B 测定结果
                       模型组
                 3 000                                            (x±s,n=8)
                       肝宝组
                 2 500                                        组别      厚壁菌门相对丰度      拟杆菌门相对丰度         F/B
                                                              空白组     0.752 82±0.117 28  0.234 17±0.116 07  4.438 50±2.202 48
                 2 000
                                                              模型组     0.961 01±0.031 27 a  0.018 63±0.009 76 a  165.988 35±45.194 21 a
                 OTUs  1 500                                  肝宝组     0.773 18±0.124 54 b  0.205 09±0.121 77 b  5.187 15±2.149 48 b
                 1 000                                          a:与空白组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01
                  500                                        学意义:与空白组比较,模型组普雷沃氏菌属Prevotella、
                    0                                        苏 黎 世 杆 菌 属 Turicibacter、魏 斯 氏 菌 属 Weissella、
                                                             SMB53、脱硫弧菌属 Desulfovibrio 均显著升高(P<0.05
                      0     5 000    10 000  15 000  20 000  25 000  30 000  35 000
                                  测序深度                       或 P<0.01),乳 杆 菌 属 Lactobacillus、布 劳 特 氏 菌 属
                                 A.稀释曲线
                                                             Blautia、拟杆菌属 Bacteroides、阿克曼菌属 Akkermansia
                                            空白组
                                            模型组              均显著降低(P<0.05或P<0.01)。经肝宝胶囊干预后,
                                            肝宝组
                                                             以上 9 种菌属的相对丰度均显著逆转(P<0.05 或 P<
                  0.10
                                                             0.01)。结果见表6。
                                                             表6 各组大鼠肠道菌群的差异菌属相对丰度测定结果
                 相对丰度  0.05                                       (x±s,n=8)

                                                              序号  差异菌属        空白组         模型组         肝宝组
                                                              1   Lactobacillus  0.411 14±0.169 81  0.197 18±0.081 90 a  0.407 84±0.218 89 b
                                                              2   Blautia  0.023 69±0.014 16  0.003 38±0.002 39 a  0.051 30±0.019 68 c
                    0
                                                              3   Prevotella  0.006 41±0.003 16  0.055 77±0.026 99 a  0.002 37±0.001 37 c
                      0                    1 000                 2 000                 3 000
                                 OTUs                         4   Bacteroides  0.035 77±0.020 14  0.000 30±0.000 19 d  0.030 90±0.019 76 c
                           B. Rank-Abundance曲线                5   Turicibacter  0.002 84±0.001 93  0.018 22±0.010 90 d  0.001 68±0.000 90 c
         图3 各组大鼠肠道菌群稀释曲线图和Rank-Abundance                      6   Weissella  0.000 03±0.000 04  0.035 23±0.023 32 d  0.000 02±0.000 03 c
               曲线图                                            7   SMB53    0.003 02±0.002 67  0.042 93±0.026 53 d  0.002 89±0.002 21 c
                                                              8   Desulfovibrio  0.000 54±0.000 21  0.004 38±0.003 75 d  0.000 52±0.000 29 c
           表4 各组大鼠肠道菌群α多样性结果(x±s,n=8)                         9   Akkermansia  0.001 92±0.000 67  0.000 15±0.000 09 d  0.001 28±0.000 61 c
          组别     Chao1指数  Observed_species指数  Shannon指数  Simpson指数  a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与模型组
          空白组  2 468.178±552.060  2 252.413±468.379  8.044±0.571  0.952±0.016  比较,P<0.01;d:与空白组比较,P<0.01
          模型组  1 407.559±174.716 a  1 273.750±158.340 a  6.834±0.647 a  0.974±0.009 b  3.5.7 肠道菌群差异物种筛选 通过线性判别分析效
          肝宝组  2 357.800±532.621 c  2 116.500±456.886 c  7.608±0.753 c  0.951±0.018 d
             a:与空白组比较,P<0.01;b:与空白组比较,P<0.05;c:与模型组          应 量(linear  discriminant  analysis  effect  size,LEfSe)分
         比较,P<0.01;d:与模型组比较,P<0.05                           析,找出在各组间产生显著影响的标志物种,同时根据
            1.0               空白组   1.0               空白组    预实验结果选择线性判别分析得分≥2.9 且 P<0.05 的
                              模型组                     模型组
                              肝宝组                     肝宝组    菌群作为差异物种。从门水平和属水平分析可知,各组
           ( 14% )  0.5            NMDS2  0.5                大鼠间均有差异物种,拟杆菌门、软壁菌门 Tenericutes、
           PCoA2  0                  0                       乳杆菌属、瘤胃球菌属 Ruminococcus、屠场杆状菌属

                                                             Macellibacteroides、拟 杆 菌 属 、Odoribacter、节 杆 菌 属
           -0.5                    -0.5
                                                             Arthrobacter、阿克曼菌属、厌氧棒杆菌属 Anaerostipes、
                 -0.3             0           0.3         0.6  -0.3             0           0.3         0.6
                    PCoA1(31.26%)              NMDS1         副拟杆菌属 Parabacteroides在空白组大鼠中富集,厚壁
                      A. PCoA                 B. NMDS
              图4 各组大鼠肠道菌群PCoA和NMDS结果                         菌门、变形菌门、普雷沃氏菌属、梭菌属 Clostridium、
                                                             SMB53、魏斯氏菌属、苏黎世杆菌属、葡萄球菌属Staphy‐
          相对丰度显著降低(P<0.01),厚壁菌门与拟杆菌门相
                                                             lococcus、p_75_a5 在模型组大鼠中占比较大;给予肝宝
          对丰度比值(F/B)显著升高(P<0.01);经肝宝胶囊干预
                                                             胶囊干预后,放线菌门、柔嫩梭菌属Faecalibacterium、布
          后,显著逆转了上述现象(P<0.01),且基本恢复至空白
                                                             劳特氏菌属、毛螺菌科的瘤胃球菌属 Ruminococcus、罕
          组水平。结果见表5。
          3.5.6 肠道菌群在属水平上的结构分析 在属水平上,                        见小球菌属 Subdoligranulum、双歧杆菌属 Bifidobacte‐
          共鉴定出141种菌属,选择相对丰度较高的22种菌属进                         rium、萨特氏菌属Sutterella、Dorea在肝宝组大鼠中发挥
          行差异分析。3组间有9种菌属的相对丰度差异有统计                           主要作用。结果见图5。


          中国药房  2023年第34卷第8期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 8    · 933 ·
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