Page 36 - 《中国药房》2023年8期
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应用 Design-Expert 13.0 软件对实验数据进行拟合 100.00 100.00
并 建 立 多 项 式 方 程 ，得 综 合 评 分（Y）＝－93.289 3+ 90.00 90.00
85.00
85.00
103.692 2A－0.161 7B+2.389 7C－0.875 8AB－0.208 9AC－ 综合评分/分 95.00 综合评分/分 95.00
80.00
80.00
2
2
0.026 1BC－19.901 1A +0.105 5B －0.010 2C 。对其进 75.00 75.00
2
70.00
70.00
行方差分析，结果见表6。由表6可见，二次多元回归模 25
23 2.0 80 2.0
型的P＜0.05，可用于设计范围内综合评分的预测；由各 B/倍 21 19 17 1.3 1.5 1.8 75 70 65 1.3 1.5 1.8
15 1.0 A/h C/% 60 1.0 A/h
因素的P值可知，对综合评分有显著影响的因素包括A、
A. A与B B. A与C
2
B、A（P＜0.05），且模型失拟度不显著（P＞0.05），提示模
100.00
型拟合程度较高，可用于分析和预测百合地黄汤多糖的
90.00
提取工艺。 综合评分/分 95.00
85.00
表6 多元回归模型及方差分析结果 80.00
75.00
70.00
方差来源 平方和 自由度 均值 F P
模型 626.056 9 9 69.561 9 6.606 3 0.010 5 80 25
75 23
A 280.904 4 1 280.904 4 26.677 8 0.001 3 70 65 19 21
C/% 60 15 17 B/倍
B 168.414 8 1 168.414 8 15.994 5 0.005 2
C 12.721 3 1 12.721 3 1.208 1 0.308 1 C. B与C
AB 19.177 1 1 19.177 0 1.821 3 0.219 2 图1 各因素交互作用对综合评分影响的响应面图
AC 4.362 7 1 4.362 7 0.414 3 0.540 3
BC 6.815 5 1 6.815 5 0.647 3 0.447 5 量组，每组10只（雌雄各半）。文法拉辛组小鼠灌胃文拉
A² 104.224 6 1 104.224 6 9.898 3 0.016 2 法辛13.5 mg/（kg·d）（以水为溶剂，剂量相当于临床等效
B² 29.297 4 1 29.297 4 2.782 4 0.139 2
C² 4.381 7 1 4.381 7 0.416 1 0.539 4 剂量的2倍），百合地黄汤多糖高、低剂量组小鼠分别灌
残差 73.706 7 7 10.529 5 胃按“2.3”项下最优提取工艺所制多糖提取物 5.28、
失拟值 60.714 6 3 20.238 2 6.230 9 0.054 7 2.64 g/（kg·d）（以水为溶剂，剂量以生药量计，分别相当
纯误差 12.992 1 4 3.248 0
总差 699.763 7 16 于百合地黄汤临床等效剂量的3、1.5倍），对照组小鼠灌
为进一步评价各因素交互作用对综合评分的影响， 胃水 10 mL/kg，每天 1 次，连续 7 d，并于末次给药 1 h 后
本研究运用Design-Expert 13.0软件绘制响应面图，结果 检测各组小鼠的相关指标。
见图 1。由图 1 可知，提取时间和加水量对综合评分的 2.4.2 行为学指标检测 （1）高架十字迷宫实验：分别
影响较为明显，而醇沉浓度的影响则不大；随着提取时 记录各组小鼠 5 min 内进入高架十字迷宫开放臂、封闭
间的延长，综合评分呈现先升高后降低的趋势；随着加 臂的次数及在开放臂的停留时间，计算进入开放臂的次
水量的增加，综合评分明显升高，这可能是由于多糖属 数比例（open-arms entry percentages，OE）及开放臂停留
于水溶性成分，足量的水可更加充分地溶解药物中多糖 时间比例（open-arms time percentages，OT）。（2）旷场实
类成分，进而提高提取率 。通过 Design-Expert 13.0 软 验：将各组小鼠放入旷场箱中自由活动30 s后，记录其5
[7]
件对多项式方程求解，得百合地黄汤多糖最优提取工艺
min内自主活动总距离及中心区域活动距离。（3）强迫游
为加24.8倍量水，提取1.7 h，醇沉浓度72%。
泳实验：将各组小鼠放入专用强迫游泳筒（水深约 25
考虑实验操作和生产实际，本研究将提取工艺进一
cm）中，记录其5 min内不动（以两前爪不动、身体呈漂浮
步优化为加25倍量水，提取1.5 h，醇沉浓度70%。在此
状态视为不动）时间。（4）悬尾实验：将各组小鼠尾部用
条件下，百合地黄汤多糖得率及多糖含量的预测值分别
胶布固定于同一高度，记录其5 min内不动（以身体垂直
为36.14%、0.65 mg/mg。3次验证实验结果显示，百合地
倒立、四爪紧缩视为不动）时间。采用SPSS 20.0软件对
黄汤多糖得率的平均值为33.10%（RSD＝1.62%，n＝3），
数据进行统计分析。数据均以x±s表示，多组间比较采
与预测值的相对偏差为 8.40%；多糖含量的平均值为
用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间两两比较采
0.62 mg/mg（RSD＝0.83%，n＝3），与预测值的相对偏差
用 LSD-t 检验。检验水准 α＝0.05。结果见图 2、表 7。
为 4.62%，提示该工艺稳定、可行。同时，本研究比较了
提取2次和提取3次的效果，第3次提取的多糖得率约为 结果表明，与对照组比较，各药物组小鼠的OE、OT值均
2.4%，提示经 2 次提取后，方中多糖成分基本被提取 显著升高（P＜0.01），旷场实验自主活动总距离及中心
完全。 区域活动距离均显著增加（P＜0.05或P＜0.01），提示百
2.4 百合地黄汤多糖体内抗焦虑抑郁作用评价 合地黄汤能改善小鼠焦虑样行为。与对照组比较，各药
2.4.1 分组与给药 将40只小鼠随机分为4组，即对照 物组小鼠强迫游泳、悬尾实验不动时间均显著缩短（P＜
组、文法拉辛组（阳性对照）和百合地黄汤多糖高、低剂 0.01），表明百合地黄汤能改善小鼠抑郁样行为。
· 926 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 8 中国药房 2023年第34卷第8期
