Page 34 - 《中国药房》2023年8期

to evaluate the effects of the extract prepared by the optimal process on the anxiety-like and depression-like behavior of mice；
enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect the effects of the extract on the levels of neurotransmitter in cerebral tissue
of mice. RESULTS The optimal extraction process of Baihe dihuang decoction was： the water amount of 25 times， extract time of
1.5 hours， and alcohol precipitation concentration of 70%. In 3 times of validation test， the average yield and content of
polysaccharide were 33.10% and 0.62 mg/mg， the relative deviations of which from the predicted values （36.14% and 0.65 mg/mg）
were 8.40% and 4.62% respectively （RSD＜2%， n＝3）. The polysaccharide extract of Baihe dihuang decoction could effectively
increase the percentages of open-arms entry， the percentages of open-arms time， the total distance of voluntary activities and the
activity distance in central area， and significantly shortened the immobility time of forced swimming test and tail suspension test
（P＜0.05 or P＜0.01）. The polysaccharide extract could significantly increase the levels of 5-hydroxytryptamine， norepinephrine
（except for the Baihe dihuang polysaccharide low-dose group） and gamma-aminobutyric acid in cerebral tissue of mice， while
significantly decrease the levels of glutamic acid （except for the Baihe dihuang polysaccharide low-dose group） （P＜0.05 or P＜
0.01）. CONCLUSIONS The optimized extraction process of polysaccharide from Baihe dihuang decoction is stable and feasible，
and the obtained polysaccharide extract has obvious anti-anxiety and anti-depression effect in vivo.
KEYWORDS Baihe dihuang decoction； polysaccharide； extraction process； Plackett-Burman design； Box-Behnken response
surface methodology； anti-depression； anti-anxiety； mice

百合地黄汤始载于东汉张仲景的《金匮要略》，由百 Lilium lancifolium Thunb. 的干燥肉质鳞叶、玄参科植物
[1]
合、生地黄组成，用于百合病之心肺阴虚内热证 。研究 地 黄 Rehmannia glutinosa Libosch. 的 干 燥 块 根 ，符 合
指出，百合病病证与现代神经系统疾病及心理障碍疾病 2020年版《中国药典》（一部）的相关规定。
的临床表现有相似之处，均表现为情绪低落、兴趣下降、 D-无水葡萄糖对照品（批号 110833-201908，纯度
[2]
紧张不安、急躁易怒、精神恍惚等 。百合地黄汤是国家 99.8%）购自中国食品药品检定研究院；盐酸文拉法辛缓
中医药管理局《古代经典名方目录》收载的首批方剂，具 释胶囊[批号CN3193D，规格150 mg（以文法拉辛计）]购
有较高的开发价值，可用于临床治疗抑郁症、焦虑症、失 自 Pfizer Ireland Pharmaceuticals 公 司 ；γ 氨 基 丁 酸
眠等，可有效改善患者的焦虑抑郁症状且副作用小 [2―4] 。 （gamma-aminobutyric acid，GABA）、谷 氨 酸（glutamic
研究表明，百合多糖或地黄多糖均具有增强免疫、抗氧 acid，Glu）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、去甲
化、抗衰老、抗骨质疏松、改善学习记忆等作用 [5―8] 。近 肾 上 腺 素（norepinephrine，NE）酶 联 免 疫 吸 附 测 定
年来，中药复方多糖类物质的生物功能多样性已逐渐受 （ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为 2205M03、2205M09、
到学者关注，其调节免疫、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、调节 2205M11、2205M16）均购自江苏菲亚生物科技有限公
血脂血糖、抗辐射、保护神经系统等作用逐步得到验证， 司；乙醇、苯酚、浓硫酸均为分析纯，水为蒸馏水。
同时具有安全性高、不良反应较少等优点 [9―10] 。多糖作 1.3 实验动物
为百合地黄汤的主要成分，含量较高且较易获得，因此 SPF 级 ICR 小鼠 40 只，雌雄各半，体质量 18～20 g，
百合地黄汤多糖类成分具有较大的开发应用前景。基 购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，动物使用许可
于此，本研究对百合地黄汤中多糖类成分的提取工艺进 证号为 SYXK（湘）2019-0009。本实验方案经湖南中医
行优化，并对百合地黄汤多糖类成分抗焦虑抑郁的效果 药 大 学 动 物 伦 理 委 员 会 审 核 ，批 准 编 号 为 LLBH-
进行评价，旨在为该方的作用机制研究及进一步开发利 202104270001。
用提供参考。 2 方法与结果
1 材料 2.1 百合地黄汤粗多糖粉末制备
1.1 主要仪器 称取百合、生地黄饮片各50.0 g，加入10倍量水，提
本研究所用主要仪器包括 UV-1800 型紫外-可见分 取1 h×2次，滤过；滤液浓缩至100 mL，加入无水乙醇使
光光度计（日本 Shimadzu 公司）、PM-200 型大鼠高架十 浓缩液醇浓度达 80%，于 4 ℃下静置 24 h 后滤过；收集
字迷宫（成都泰盟软件有限公司）、SMART 3.0型动物行 沉淀，于 50 ℃下真空干燥，粉碎，即得粗多糖粉末。按
为学视频记录与分析系统（西班牙 Panlab 公司）、RT- 下式计算多糖得率（%）：多糖得率＝M/m×100%（式中，
6100型酶标仪（深圳雷杜生命科学股份有限公司）等。 M为粗多糖粉末质量，m为饮片质量）。
1.2 主要药品与试剂 2.2 多糖含量测定
百合饮片（产自湖南龙山，批号 20200801）、生地黄 采用苯酚-硫酸法进行测定。
饮片（产自河南焦作，批号20200901）均购自湖南省南国 2.2.1 对照品溶液及供试品溶液的制备 分别称取 D-
药都中药饮片有限公司，经湖南中医药大学第一附属医 无水葡萄糖对照品13 mg、百合地黄汤粗多糖粉末8 mg，
院制剂中心张裕民教授鉴定分别为百合科植物卷丹 置于 100 mL 容量瓶中，用水溶解并定容，摇匀，得质量

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