Page 54 - 《中国药房》2023年6期
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with  MIC (absolute  values  of  correlation  coefficient>0.95  and  P<0.05).  CONCLUSIONS  The  chemical  composition  of  10
          batches  of  HQD  is  consistent;  HQD-N  is  the  active  phase  state  of  HQD. Ten  components  such  as  paeoniflorin,  liquiritin  apioside
          and baicalin may be the main active components of HQD. The antidermatophytic effect of HQD is closely related to its component
          content and physical phase state.
          KEYWORDS     Huangqin decoction; fingerprint; phase state; antidermatophytic activity; spectrum-effect relationship



              真菌等微生物导致的感染严重危害人类健康。随                           仪、ZEM3600 型 Zeta 电位分析仪(英国 Marlvern Pana‐
          着真菌感染性疾病的日益高发和超级耐药真菌的广泛                             lytical 公司),HC-2517 型高速离心机(安徽中科中佳科
          流行,临床经典抗真菌药物的使用受到一定限制,因此                            学仪器有限公司),S-4800型扫描电子显微镜(日本Hita‐
          寻找高效、低毒、低耐药的抗真菌药物具有重要意义。                            chi公司),SCIENTZ-10N型冷冻干燥机、SB-5200D型超
          中药为天然抗真菌药物的研发提供了丰富的资源                       [1―3] 。  声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)等。
          经典名方黄芩汤(Huangqin decoction,HQD)始载于汉代                1.2 主要药品与试剂
          张仲景的《伤寒论》,由黄芩(君药)、芍药(臣药)、炙甘草                            黄芩苷对照品(批号 HS81115B2)、黄芩素对照品
         (佐药)和大枣(使药)4 味药材组成,具有抗菌、抗炎、解                        (批号 HR5717S1)、汉黄芩苷对照品(批号 HR5125S1)、
          热、镇痛、解痉等作用 。本课题组前期研究发现,HQD                          汉黄芩素对照品(批号 HR20925W3)、千层纸素 A 对照
                             [4]
          能抑制须癣毛癣菌、红色毛癣菌、紫色毛癣菌、犬小孢子                           品(批 号 HS17116S1)、千 层 纸 素 A 苷 对 照 品(批 号
          菌等皮肤癣菌的生长,其最小抑菌浓度(minimum inhibi‐                   HS14413B1)、芍药苷对照品(批号HR16106B1)、芍药内
                                                              酯苷对照品(批号 PS011455)、甘草酸对照品(批号
          tory concentration,MIC)为 1.75~5.90 mg/mL(以生药总
               [5]
          量计) 。可见,HQD具有治疗皮肤癣菌病的潜力,但其                          HG4398S3)、芹糖甘草苷对照品(批号HS20101B1)均购
                                                              自宝鸡辰光生物科技有限公司,纯度均不低于 98%;磷
          抗皮肤癣菌作用的药效物质基础尚不明确。
                                                              酸(批号20210701)、磷酸二氢钾(批号210503)均购自西
              结构中药学理论认为,中药药效的发挥与其有效成
                                                              陇科学股份有限公司;葡萄糖(批号HB01BA0003)购自
          分、存在形式及物相状态密切相关               [6―7] 。中药化学成分
                                                              生工生物工程(上海)股份有限公司;琼脂粉(批号
          由于独特的结构、众多的修饰位点和丰富的资源,使其
                                                              HA25BA0008)购自北京索莱宝科技有限公司;酪蛋白
          在煎煮过程中易发生络合、水解、氧化、还原等反应,形
                                                              水解物(批号 R20T0601)购自上海抚生实业有限公司;
          成了包括真溶液、胶体溶液、混悬液等不同相态的分散
                                                              RPMI 1640培养基(批号2230740)购自赛默飞世尔科技
          体系 。现代研究表明,仅部分相态的中药汤剂才具有
              [8]
                                                             (中国)有限公司;纤维素透析袋(截留分子量 8 000~
          特定生物活性,以白虎汤为例,其纳米相态对家兔血清
                                                              10 000)购自上海源叶生物科技有限公司;甲醇、乙腈为
          炎症因子的下调作用最为明显,且解热作用也优于其他
                                                              色谱纯,甲醇为分析纯,水为超纯水。
          相态,是白虎汤发挥药效的关键              [9―10] 。谱效关系研究将
                                                                  黄芩、白芍、炙甘草、大枣饮片均于2022年3月16日
          指纹图谱与中药药效评价相结合,不仅能使指纹图谱的
                                                              购自江西彭氏国药堂饮片有限公司,经江西省人民医院
          化学成分对应某一药效,还能阐明指纹图谱特征与药效
                                                              药学部胡建新主任药师鉴定,分别为唇形科植物黄芩
                                          [11]
          的关系,以确定相应的药效物质基础 。基于此,本研
                                                              Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根、毛茛科植物芍药
          究拟建立HQD的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱;通过                         Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根、豆科植物甘草 Glycyr‐
          高速离心与透析相结合的方法拆分 HQD 的不同相态,                          rhiza uralensis Fisch. 的干燥根和根茎、鼠李科植物枣
          并对不同相态HQD抗皮肤癣菌作用的谱效关系进行评                            Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实。将不同产地或批
          价,以确定HQD抗皮肤癣菌的主要成分及其活性相态,                           号的4味饮片组合,按后续方法制得10批HQD饮片(编
          旨在为该方抗皮肤癣菌作用的物质基础研究及临床应                             号S1~S10)。10批HQD饮片的来源信息见表1。
          用提供参考。                                              1.3 菌株
          1 材料                                                    须癣毛癣菌(编号分别为 xm109、xm110、xm111、
          1.1 主要仪器                                            xm112、xm113、xm114、xm115)由江西省人民医院临床
              本研究所用主要仪器有 LC-2010A 型 HPLC 仪(日                  医学研究所分离、鉴定、保存并提供。
          本 Shimadzu 公 司),Multiskan  FC 型 酶 标 仪(美 国           2 方法与结果
          Thermo Fisher Scientific 公司),SPX-25085H-Ⅱ型生化        2.1 HQD的制备
          培养箱(上海新苗医疗器械制造有限公司),MS-H280-                            按照文献方法      [12―13] 制备 HQD:按质量比 3∶2∶2∶2 称
          Pro型磁力搅拌器[大龙兴创实验仪器(北京)股份公司],                        取黄芩、白芍、炙甘草、大枣饮片,混匀,加入10倍量水,
          Mastersizer 2000型激光粒度仪、Nano-S型激光粒度分析                煎煮 1 h,趁热滤过;药渣加 8 倍量水,煎煮 1 h,趁热滤


          · 688 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 6                               中国药房  2023年第34卷第6期
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