Page 52 - 《中国药房》2023年6期
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3 讨论                                                3.4 浸出物检测条件的选择
          3.1 显微鉴别条件的优化                                           本课题组前期取细风轮菜药材粉末（编号XFLC-9），
              细风轮菜叶主脉较纤细，易受机械损伤，制片难度                          按照 2020 年版《中国药典》（四部）通则“2201 浸出物测
          大。本课题组前期将其叶下表皮分别以水、水合氯醛装                            定法”项下“水溶性浸出物（冷浸法）”和“醇溶性浸出物
          片，或者先用石油醚透化后再以水合氯醛装片，于光学                            测定法（热浸法）”分别考察了冷浸、热浸法和不同溶剂
          显微镜下观察发现，上述3种方法都不能清晰地呈现药                           （水，稀乙醇，30%、50%、70%、95% 乙醇和无水乙醇）对
                                                                              [16]
                                                              浸出物含量的影响 。结果显示，当采用热浸法并以稀
          材叶下表皮细胞，故本研究并未选择叶主脉横切面及叶
                                                              乙醇为溶剂时，所测浸出物含量最高。
          表面作显微鉴别项。细风轮菜药材茎横切面显微特征
                                                              3.5 高效液相色谱条件和供试品溶液制备方法的选择
          明显，且容易制片，故本研究选择茎横切面来作为该药
                                                                  本课题组前期发现，当以甲醇-水和乙腈-水为流动
          材的显微鉴别项。
                                                              相时，分离效果不佳，迷迭香酸色谱峰峰形拖尾，且基线
          3.2 定性和定量指标性成分的选择
                                                                                              [20]
                                                              不稳定；随后，本课题组参考相关文献 ，对流动相进行
              经中苗医专家论证，细风轮菜具清热、解毒、除湿的
                                                              了优化，当以乙腈-0.2%磷酸溶液（20∶80，V/V）进行等度
          功效，主治口舌生疮（口疮）、咽喉肿痛（豆喉症、乳蛾
                                                              洗脱时，所得迷迭香酸色谱峰峰形对称，分离度大于
          症）、疔疮肿毒（毒疔、毒疮、脓包）、胃肠湿热（湿热毒泻                         1.5。本课题组前期使用紫外检测器对供试品溶液（编号
          肚症）。现代研究表明，三萜皂苷类提取物为细风轮菜                            XFLC-9）和迷迭香酸对照品溶液进行了全波长（190～
                                                 [18]
          主要活性部位，具抑菌、抗炎、抗肿瘤等活性 ，其中醉                           800 nm）扫描，结果显示，二者均在330 nm波长处有最大
          鱼草皂苷Ⅳb 是其代表成分 ；迷迭香酸为酚酸类化合                           吸收，故以此为检测波长。同时，本课题组对供试品溶
                                  [19]
          物，具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫                          液的提取溶剂（乙醇、甲醇、50%甲醇、70%甲醇）和料液
          和保护神经细胞等药理作用             [14―15] 。这两种成分的药理          比（1∶20、1∶50、1∶80、1∶100，g/mL）进行了考察。结果显
          作用能较好地体现细风轮菜清热解毒的功效，因此本研                            示，称取药材粉末 0.25 g，精密加入 70% 甲醇 20 mL，超
          究参考2020年版《中国药典》（一部）断血流“鉴别”项以                        声处理30 min可充分提取其中的迷迭香酸，且所得色谱
          醉鱼草皂苷Ⅳb 为指标性成分，建立了薄层色谱鉴别方                           峰峰形、分离度均较好。经方法学考察证实，所建高效
          法；考虑到定性、定量指标性成分不宜相同，本研究选择                           液相色谱法重复性、精密度、准确度、耐用性均良好，可
          了含量相对较高的另一成分迷迭香酸作为细风轮菜药                             用于细风轮菜中迷迭香酸含量的测定。
          材定量分析的指标性成分。后期，本课题组将对细风轮                            3.6 限度的拟定
          菜药材的化学成分进行深入研究，以期进一步完善其质                                按照 10 批细风轮菜药材水分、总灰分、酸不溶性灰
                                                              分、稀乙醇浸出物、迷迭香酸含量的测定结果，本研究最
          量标准。
                                                              终拟定水分、总灰分、酸不溶性灰分分别不得过 12.0%、
          3.3 薄层色谱条件的选择
                                                              12.0%、1.5%，稀乙醇浸出物不得少于 18.0%；按干燥品
              本研究以醉鱼草皂苷Ⅳb 为对照，建立了细风轮菜
                                                              计算，本品含迷迭香酸（C18H16O8 ）不得少于0.45%。
          药 材 的 薄 层 鉴 别 项 。 本 课 题 组 前 期 参 考 相 关 文
                                                                  综上所述，本研究较全面地考察了细风轮菜药材的
          献 [10―11，15] ，比较了三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水（7∶2.5∶1∶
                                                              各项质量指标，确定了专属性强、稳定可靠且能有效反
          0.5，V/V/V/V）、三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2，V/V/V）、三氯
                                                              映其质量的评价方法，初步建立了该药材的质量标准，
          甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（5∶20∶11∶5，V/V/V/V）的下层
                                                              为其品质鉴定、质量控制提供了评价指标和方法，有利
          溶液和乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1，V/V/V）4 种不同的展
                                                              于其后期资源利用与产品开发。
          开系统，筛选得到最优展开系统为三氯甲烷-乙酸乙                             参考文献
          酯-甲醇-水（5∶20∶11∶5，V/V/V/V）的下层溶液。同时，本                 [ 1 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志：第三
          课题组对供试品溶液的提取方式、提取时间、点样量进                                 十六卷[M]. 北京：科学出版社，1974：453.
          行了考察。结果显示，提取方式和提取时间对薄层斑点                            [ 2 ]  王一仁. 饮片新参[M]. 上海千顷堂书局，1936：42-43.
          的影响不大，故选择超声处理 15 min；当对照品溶液和                        [ 3 ]  王国强 . 全国中草药汇编：卷二[M]. 3 版 . 北京：人民卫
          供试品溶液的点样量均为6 μL时，所得薄层斑点清晰且                               生出版社，2014：3144-3145.
          分离效果较好。为保证鉴别的可靠性，本课题组前期进                            [ 4 ]  浙江省卫生局. 浙江民间常用草药：第三集[M]. 杭州：浙
                                                                   江人民出版社，1972：291-294.
          行了假阳性实验，发现对照品和供试品的混合溶液在对
                                                              [ 5 ]  姚振生，熊耀康. 浙江药用植物资源志要[M]. 上海：上海
          照品斑点位置并未分离。此外，本课题组还考察了薄层
                                                                   科学技术出版社，2016：321-322.
          板的耐用性和温湿度条件，结果显示，“2.3.3”项下薄层                        [ 6 ]  甘慈尧 . 浙南本草新编[M]. 北京：中国中医药出版社，
          条件对细风轮菜药材中醉鱼草皂苷Ⅳb的鉴别具有良好                                 2016：297.
          的适用性，且分离度与重现性均较好。                                                                      （下转第692页）


          · 686 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 6                               中国药房  2023年第34卷第6期
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