Page 45 - 《中国药房》2023年5期
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入 ECL 显色,采用凝胶成像发光系统显影曝光。采用 表2 各组RAW264.7细胞中NO、TNF-α、IL-1β和IL-6
Image J 1.8.0 软件进行图像灰度值分析,以目的蛋白与 含量的测定结果(x±s,n=3)
内参(GAPDH)的灰度值比值表示目的蛋白的表达 组别 NO/(μmol/L) TNF-α/(pg/mL) IL-1β/(pg/mL) IL-6/(pg/mL)
正常对照组 12.44±0.33 155.47±12.28 27.08±3.20 24.03±3.17
水平。
LPS组 39.52±2.03 a 430.27±19.72 a 102.54±3.27 a 81.64±3.20 a
2.9 统计学分析 三七姜醇提物高剂量组 22.10±2.10 b 333.77±12.95 b 53.09±4.33 b 52.69±3.52 b
采用GraphpadPrism 8.3软件进行分析处理,数据以 三七姜醇提物中剂量组 23.71±1.28 b 295.77±8.75 b 62.63±3.08 b 59.38±2.46 b
三七姜醇提物低剂量组 25.36±0.88 b 297.50±13.71 b 68.62±2.22 b 67.75±4.76 b
x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较
4%空白血清组 9.68±1.40 112.82±4.73 18.91±2.91 16.40±3.46
用LSD-t检验。检验水准α=0.05。 15%空白血清组 10.57±1.72 108.26±9.20 16.12±3.63 17.25±1.88
3 结果 4%空白血清+LPS组 17.23±1.59 c 240.83±13.31 c 58.22±3.55 c 40.18±4.23 c
15%空白血清+LPS组 17.69±1.37 d 235.57±12.46 d 50.71±4.02 d 31.22±3.85 d
3.1 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞活力 4%含药血清组 10.47±2.54 102.04±3.95 14.51±2.27 13.40±2.93
的影响 15%含药血清组 11.40±2.36 113.21±5.52 13.09±2.82 11.46±2.91
4%含药血清+LPS组 12.49±1.25 e 110.40±13.29 e 39.80±4.36 e 26.83±3.67 e
各组 RAW264.7 细胞活力差异无统计学意义(P>
15%含药血清+LPS组 12.79±1.89 f 123.30±4.43 f 30.33±3.20 f 19.37±3.83 f
0.05)。由此可见,1 μg/mL 的 LPS,低、中、高剂量的三 a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与4%
七姜醇提物,4%、15%的含药血清及空白血清均未对细 空白血清组比较,P<0.05;d:与15%空白血清组比较,P<0.05;e:与
胞生长活力造成影响,因此,所选药物浓度可用于后续 4%空白血清+LPS组比较,P<0.05;f:与15%空白血清+LPS组比较,
P<0.05
实验。结果见图1。
150 4% 或 15% 含 药 血 清 +LPS 组 细 胞 中 TLR4、NF- κB
mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结果见表3。
细胞存活率/% 100 表3 各组 RAW264.7 细胞中 TLR4、NF-κB mRNA 表
50
达水平的检测结果(x±s,n=3)
0 组别 TLR4 mRNA NF-κB mRNA
A B C D E F G H I J K L M
正常对照组 1.00±0.06 1.04±0.06
A:正常对照组;B:LPS组;C:三七姜醇提物高剂量组;D:三七姜 a a
LPS组 3.28±0.16 4.04±0.26
醇提物中剂量组;E:三七姜醇提物低剂量组;F:4%空白血清组;G: 三七姜醇提物高剂量组 2.09±0.11 b 2.53±0.09 b
15%空白血清组;H:4%空白血清+LPS组;I:15%空白血清+LPS组;J: 三七姜醇提物中剂量组 1.97±0.13 b 1.97±0.13 b
4%含药血清组;K:15%含药血清组;L:4%含药血清+LPS组;M:15% 三七姜醇提物低剂量组 2.53±0.09 b 2.09±0.11 b
含药血清+LPS组 4%空白血清组 1.25±0.14 1.78±0.09
图1 各组RAW264.7细胞活力的检测结果(x±s,n=3) 15%空白血清组 1.20±0.08 1.72±0.06
4%空白血清+LPS组 1.84±0.03 c 2.21±0.05 c
3.2 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞中 15%空白血清+LPS组 1.86±0.04 d 2.19±0.06 d
NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响 4%含药血清组 1.06±0.11 1.47±0.05
15%含药血清组 1.60±0.12 1.75±0.22
与正常对照组比较,LPS 组 RAW264.7 细胞中 NO、 4%含药血清+LPS组 1.12±0.09 e 1.53±0.12 e
TNF-α、IL-1β 和 IL-6 的含量显著升高(P<0.05)。与 15%含药血清+LPS组 1.18±0.13 f 1.46±0.13 f
LPS 组比较,三七姜醇提物各剂量组 RAW264.7 细胞中 a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与4%
空白血清组比较,P<0.05;d:与15%空白血清组比较,P<0.05;e:与
上述指标含量均显著降低(P<0.05)。与 4% 或 15% 空
4%空白血清+LPS组比较,P<0.05;f:与15%空白血清+LPS组比较,
白血清组比较,4% 或 15% 空白血清+LPS 组 RAW264.7 P<0.05
细胞中上述指标含量均显著升高(P<0.05)。与4%或15%
3.4 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞中
空白血清+LPS 组比较,4% 或 15% 含药血清+LPS 组细
NOS、COX-2蛋白表达的影响
胞中上述指标含量均显著降低(P<0.05)。结果见表2。
与正常对照组比较,LPS 组细胞中 NOS、COX-2 蛋
3.3 三 七 姜 醇 提 物 及 含 药 血 清 对 RAW264.7 细 胞
白表达水平均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,三七
TLR4、NF-κB mRNA表达的影响
姜醇提物各剂量组细胞中NOS、COX-2蛋白表达水平均
与 正 常 对 照 组 比 较 ,LPS 组 RAW264.7 细 胞 中
TLR4、NF-κB mRNA 表达水平均显著升高(P<0.05)。 显著降低(P<0.05)。与 4% 或 15% 空白血清组比较,
与 LPS 组比较,三七姜醇提物各剂量组细胞中 TLR4、 4% 或 15% 空白血清+LPS 组 RAW264.7 细胞中 NOS、
NF-κB mRNA 表达水平均显著降低(P<0.05)。与 4% COX-2 蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与 4% 或
或 15% 空白血清组比较,4% 或 15% 空白血清+LPS 组 15% 空白血清+LPS 组比较,4% 或 15% 含药血清+LPS
RAW264.7细胞中TLR4、NF-κB mRNA表达水平均显著 组细胞中 NOS、COX-2 蛋白表达水平均显著降低(P<
升高(P<0.05)。与 4% 或 15% 空白血清+LPS 组比较, 0.05)。结果见图2、表4。
中国药房 2023年第34卷第5期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 5 · 551 ·