Page 45 - 《中国药房》2023年5期
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入 ECL 显色,采用凝胶成像发光系统显影曝光。采用                         表2 各组RAW264.7细胞中NO、TNF-α、IL-1β和IL-6
          Image J 1.8.0 软件进行图像灰度值分析,以目的蛋白与                        含量的测定结果(x±s,n=3)
          内参(GAPDH)的灰度值比值表示目的蛋白的表达                            组别           NO/(μmol/L)  TNF-α/(pg/mL)  IL-1β/(pg/mL)  IL-6/(pg/mL)
                                                              正常对照组         12.44±0.33  155.47±12.28  27.08±3.20  24.03±3.17
          水平。
                                                              LPS组          39.52±2.03 a  430.27±19.72 a  102.54±3.27 a  81.64±3.20 a
          2.9 统计学分析                                           三七姜醇提物高剂量组    22.10±2.10 b  333.77±12.95 b  53.09±4.33 b  52.69±3.52 b
              采用GraphpadPrism 8.3软件进行分析处理,数据以                 三七姜醇提物中剂量组    23.71±1.28 b  295.77±8.75 b  62.63±3.08 b  59.38±2.46 b
                                                              三七姜醇提物低剂量组    25.36±0.88 b  297.50±13.71 b  68.62±2.22 b  67.75±4.76 b
          x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较
                                                              4%空白血清组       9.68±1.40  112.82±4.73  18.91±2.91  16.40±3.46
          用LSD-t检验。检验水准α=0.05。                                15%空白血清组      10.57±1.72  108.26±9.20  16.12±3.63  17.25±1.88
          3 结果                                                4%空白血清+LPS组   17.23±1.59 c  240.83±13.31 c  58.22±3.55 c  40.18±4.23 c
                                                              15%空白血清+LPS组  17.69±1.37 d  235.57±12.46 d  50.71±4.02 d  31.22±3.85 d
          3.1 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞活力                      4%含药血清组       10.47±2.54  102.04±3.95  14.51±2.27  13.40±2.93
          的影响                                                 15%含药血清组      11.40±2.36  113.21±5.52  13.09±2.82  11.46±2.91
                                                              4%含药血清+LPS组   12.49±1.25 e  110.40±13.29 e  39.80±4.36 e  26.83±3.67 e
              各组 RAW264.7 细胞活力差异无统计学意义(P>
                                                              15%含药血清+LPS组  12.79±1.89 f  123.30±4.43 f  30.33±3.20 f  19.37±3.83 f
          0.05)。由此可见,1 μg/mL 的 LPS,低、中、高剂量的三                    a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与4%
          七姜醇提物,4%、15%的含药血清及空白血清均未对细                         空白血清组比较,P<0.05;d:与15%空白血清组比较,P<0.05;e:与
          胞生长活力造成影响,因此,所选药物浓度可用于后续                           4%空白血清+LPS组比较,P<0.05;f:与15%空白血清+LPS组比较,
                                                             P<0.05
          实验。结果见图1。
                150                                          4% 或 15% 含 药 血 清 +LPS 组 细 胞 中 TLR4、NF- κB
                                                             mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结果见表3。
               细胞存活率/%  100                                  表3 各组 RAW264.7 细胞中 TLR4、NF-κB mRNA 表

                 50
                                                                  达水平的检测结果(x±s,n=3)
                 0                                            组别                   TLR4 mRNA       NF-κB mRNA
                    A      B        C         D       E      F      G       H        I          J         K        L        M
                                                              正常对照组                 1.00±0.06      1.04±0.06
             A:正常对照组;B:LPS组;C:三七姜醇提物高剂量组;D:三七姜                                          a               a
                                                              LPS组                  3.28±0.16      4.04±0.26
         醇提物中剂量组;E:三七姜醇提物低剂量组;F:4%空白血清组;G:                    三七姜醇提物高剂量组            2.09±0.11 b    2.53±0.09 b
         15%空白血清组;H:4%空白血清+LPS组;I:15%空白血清+LPS组;J:             三七姜醇提物中剂量组            1.97±0.13 b    1.97±0.13 b
         4%含药血清组;K:15%含药血清组;L:4%含药血清+LPS组;M:15%               三七姜醇提物低剂量组            2.53±0.09 b    2.09±0.11 b
         含药血清+LPS组                                            4%空白血清组               1.25±0.14      1.78±0.09
          图1 各组RAW264.7细胞活力的检测结果(x±s,n=3)                     15%空白血清组              1.20±0.08      1.72±0.06
                                                              4%空白血清+LPS组           1.84±0.03 c    2.21±0.05 c
          3.2 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞中                       15%空白血清+LPS组          1.86±0.04 d    2.19±0.06 d
          NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响                            4%含药血清组               1.06±0.11      1.47±0.05
                                                              15%含药血清组              1.60±0.12      1.75±0.22
              与正常对照组比较,LPS 组 RAW264.7 细胞中 NO、                 4%含药血清+LPS组           1.12±0.09 e    1.53±0.12 e
          TNF-α、IL-1β 和 IL-6 的含量显著升高(P<0.05)。与                15%含药血清+LPS组          1.18±0.13 f    1.46±0.13 f
          LPS 组比较,三七姜醇提物各剂量组 RAW264.7 细胞中                       a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05;c:与4%
                                                             空白血清组比较,P<0.05;d:与15%空白血清组比较,P<0.05;e:与
          上述指标含量均显著降低(P<0.05)。与 4% 或 15% 空
                                                             4%空白血清+LPS组比较,P<0.05;f:与15%空白血清+LPS组比较,
          白血清组比较,4% 或 15% 空白血清+LPS 组 RAW264.7                P<0.05
          细胞中上述指标含量均显著升高(P<0.05)。与4%或15%
                                                             3.4 三七姜醇提物及含药血清对 RAW264.7 细胞中
          空白血清+LPS 组比较,4% 或 15% 含药血清+LPS 组细
                                                             NOS、COX-2蛋白表达的影响
          胞中上述指标含量均显著降低(P<0.05)。结果见表2。
                                                                 与正常对照组比较,LPS 组细胞中 NOS、COX-2 蛋
          3.3  三 七 姜 醇 提 物 及 含 药 血 清 对 RAW264.7 细 胞
                                                             白表达水平均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,三七
          TLR4、NF-κB mRNA表达的影响
                                                             姜醇提物各剂量组细胞中NOS、COX-2蛋白表达水平均
              与 正 常 对 照 组 比 较 ,LPS 组 RAW264.7 细 胞 中
          TLR4、NF-κB mRNA 表达水平均显著升高(P<0.05)。                 显著降低(P<0.05)。与 4% 或 15% 空白血清组比较,
          与 LPS 组比较,三七姜醇提物各剂量组细胞中 TLR4、                      4% 或 15% 空白血清+LPS 组 RAW264.7 细胞中 NOS、
          NF-κB mRNA 表达水平均显著降低(P<0.05)。与 4%                  COX-2 蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与 4% 或
          或 15% 空白血清组比较,4% 或 15% 空白血清+LPS 组                  15% 空白血清+LPS 组比较,4% 或 15% 含药血清+LPS
          RAW264.7细胞中TLR4、NF-κB mRNA表达水平均显著                  组细胞中 NOS、COX-2 蛋白表达水平均显著降低(P<
          升高(P<0.05)。与 4% 或 15% 空白血清+LPS 组比较,                0.05)。结果见图2、表4。


          中国药房  2023年第34卷第5期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 5    · 551 ·
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