Page 46 - 《中国药房》2023年5期

导型环氧化酶，其在正常机体细胞中表达量很低，但在
NOS 65 kDa
经LPS刺激的巨噬细胞中表达水平会迅速上升，从而介
COX-2 130 kDa
导炎症介质前列腺素的产生 。本研究结果显示，三七
[15]
GAPDH 42 kDa
姜含药血清和醇提物均可抑制RAW264.7细胞中炎症因
A B C D E F G H I J K L M
A：正常对照组；B：LPS组；C：三七姜醇提物高剂量组；D：三七姜 子的释放，下调COX-2、NOS蛋白的表达，这说明三七姜
醇提物中剂量组；E：三七姜醇提物低剂量组；F：4%空白血清组；G： 含药血清和醇提物均能通过降低凋亡蛋白和炎症因子
15%空白血清组；H：4%空白血清+LPS组；I：15%空白血清+LPS组；J： 表达来改善 LPS 诱导的细胞炎症，并减轻其炎症损伤，
4%含药血清组；K：15%含药血清组；L：4%含药血清+LPS组；M：15%
含药血清+LPS组 且含药血清的百分比越大，抗炎作用越明显。但整体而
图2 各组 RAW264.7 细胞中 COX-2、NOS 蛋白表达的 言，三七姜醇提物的抗炎效用不及含药血清，这可能是
电泳图 因为含药血清经过体内的代谢、转化，产生了其他具有
抗炎作用的物质。
表4 各组 RAW264.7 细胞中 NOS、COX-2 蛋白表达水
NF-κB 是炎症反应过程中重要的基因转录调控因
平的检测结果（x±s，n＝3）
[16]
子 ，其家族成员主要包括 p65 和 p50。一般情况下，
分组 NOS COX-2
正常对照组 0.476 4±0.024 7 0.345 5±0.016 7 NF-κB（p50/p65）以二聚体形式存在；在炎症刺激条件
LPS组 1.579 8±0.036 9 a 1.614 3±0.042 1 a 下，NF-κB信号通路被激活，NF-κB-p65由细胞质移位至
三七姜醇提物高剂量组 0.792 9±0.028 2 b 1.040 3±0.055 3 b 细胞核，进而促进 TNF-α、IL-6、IL-1β、NOS 等炎症因子
三七姜醇提物中剂量组 0.923 5±0.045 4 b 1.202 2±0.025 2 b
三七姜醇提物低剂量组 1.214 9±0.035 9 b 1.291 1±0.042 6 b 的释放 [17―18] 。NF-κB信号通路活化的标志是p65亚基的
4%空白血清组 0.369 0±0.012 3 0.420 4±0.046 9 磷酸化与核转位 。因此，抑制NF-κB的磷酸化水平和
[19]
15%空白血清组 0.458 8±0.027 2 0.179 6±0.027 2 核转位是抑制炎症反应的关键。TLR4广泛存在于巨噬
4%空白血清+LPS组 0.952 6±0.034 1 c 0.912 9±0.034 7 c
15%空白血清+LPS组 1.071 5±0.039 7 d 0.796 9±0.039 6 d 细胞、平滑肌细胞等细胞表面，其可以通过 NF-κB 信号
[20]
4%含药血清组 0.659 1±0.031 8 0.427 1±0.015 3 转导，促使炎症因子释放，进而介导炎症反应 。本研
15%含药血清组 0.812 0±0.026 3 0.540 7±0.026 9 究结果显示，经三七姜醇提物和含药血清干预后，
4%含药血清+LPS组 0.340 6±0.015 3 e 0.670 3±0.044 1 e
15%含药血清+LPS组 0.329 5±0.035 7 f 0.591 9±0.038 8 f RAW264.7 细胞中 TLR4、NF-κB mRNA 表达水平均降
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与4% 低。这说明三七姜醇提物和含药血清对RAW264.7细胞
空白血清组比较，P＜0.05；d：与15%空白血清组比较，P＜0.05；e：与 的抗炎作用可能与抑制 TLR4/NF-κB 信号通路活性
4%空白血清+LPS组比较，P＜0.05；f：与15%空白血清+LPS组比较，
相关。
P＜0.05
综上所述，三七姜醇提物及含药血清均可明显减轻
4 讨论 LPS 诱导的细胞炎症反应，其抗炎机制可能与抑制
炎症反应是宿主在内外因素刺激之下产生的一种 TLR4/NF-κB 信号通路活性，下调 COX-2、NOS 蛋白表
[8]
防御性反应，受多种信号通路调控 。革兰氏阴性杆菌 达，减少炎症因子释放有关。
的组成成分LPS为重要的炎症反应触发剂，可诱导多种 参考文献
[9]
细胞因子引发炎症反应 。巨噬细胞通过其细胞膜表面 [ 1 ] 广西壮族自治区食品药品监督管理局，广西壮族自治区
表达的TLR4受体识别LPS，进而激活下游信号通路（如 食品药品检验所. 《广西壮族自治区壮药质量标准第二
NF-κB、丝裂原活化蛋白激酶） 。随后，活化的炎症相 卷（2011 年版）》注释[M]. 南宁：广西科学技术出版社，
[10]
关信号可诱导一系列促炎症因子的转录、翻译，包括 2013：12-13.
[11]
NOS、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6 等 ，从而参与炎症性 [ 2 ] 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草 [M].
疾病的发生与发展。 上海：上海科学技术出版社，1999：623.
RAW264.7细胞作为机体内非常重要的免疫细胞和 [ 3 ] 胡稀，谢珍珍，梁洁. 壮药姜叶三七醇提取物抗炎作用的
炎症效应细胞，在诱导炎症反应的过程中起着关键作 研究[J]. 大众科技，2017，19（1）：37-38.
[ 4 ] 梁洁，陈辉华，杨川川，等. 壮药三七姜乙酸乙酯提取物
用，其能够在 LPS 的刺激下释放各种炎症因子，如 NO、
抗炎、镇痛作用的谱-效关系研究[J]. 中国药房，2021，32
[12]
TNF-α、IL-1β、IL-6等 ，这些炎症因子的含量增加是判
（14）：1721-1727.
断炎症是否发生的重要指标。NO广泛存在于各种生物
[ 5 ] 张文静，徐新禹 . 基于 TLR4/NF-κB 信号通路探讨绿原
体内，机体内适量的 NO 可在炎症初期快速地清除病原
酸对糖尿病肾病大鼠肾组织炎症和凋亡的影响[J]. 现代
体以缓解炎症反应，但当NO浓度过高时，可导致局部机 中西医结合杂志，2022，31（19）：2629-2635.
[13]
体组织损伤，从而加重炎症反应 。NOS和COX-2是两 [ 6 ] HE Y Y，RUGANZU J B，ZHENG Q Z，et al. Silencing of
种诱生型酶，NOS 主要在细胞损伤后表达水平上升，从 LRP1 exacerbates inflammatory response via TLR4/NF-
而合成大量NO，进而导致细胞损伤 ；COX-2是一种诱 κB/MAPKs signaling pathways in APP/PS1 transgenic
[14]

· 552 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 5 中国药房 2023年第34卷第5期