Page 57 - 《中国药房》2023年4期

细管柱（0.25 µm×250 µm×30.0 m），载气为高纯氦气 固定，常规石蜡包埋，切片（厚度约4.5 µm），脱蜡，用HE
（99.999%），柱 流 速 为 1.0 mL/min，汽 化 室 温 度 为 染色，脱水，光学树脂胶封片，显微镜下观察肝组织病理
250 ℃。升温程序如下：50 ℃保持 15 min，以 4 ℃/min 变化。
升 温 到 130 ℃ ，再 以 10 ℃/min 升 温 到 220 ℃ ，再 以 2.4 统计学方法

10 ℃/min升温到280 ℃，保持10 min；分流比为50∶1，进 利用 SPSS 19.0 软件进行分析。数据以 x±s 表示，
样量为1.0 µL。 多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用
2.2.4 质谱条件 质谱条件如下：采用电子轰击离子 LSD-t法。检验水准α＝0.05。
源，电子能量为 70 eV，质量扫描范围为 m/z 50.00～ 3 结果
500.00，柱箱温度为 40.0 ℃，进样温度为 280.0 ℃，进样 3.1 栀子酒炙前后的挥发油成分
模式为分流，流量控制模式为总流量14.0 mL/min、柱流
依据上述气相色谱和质谱条件，得生栀子、酒栀子
量 1.00 mL/min、吹扫流量 3.0 mL/min，压力为 49.5 kPa，
和阴性对照溶液（黄酒）的总离子流图（图1）。在默认的
离子源温度为200 ℃，接口温度为250 ℃，四极杆温度为
积分设置下，生栀子和酒栀子均检测到100多个化合物，
230 ℃，检测模式为全离子扫描监测，溶剂延迟时间为
但有一部分化合物的匹配度非常低。本研究仅选取匹
3.5 min。
配度≥85%，相对质量分数＞1% 的化合物进行鉴定，用
2.2.5 化合物鉴定 总离子流图中的各色谱峰经质谱
峰面积归一化法测定其相对质量分数，结果见表1。
扫描后得到相应的质谱图，经过计算机质谱数据系统检
6.5×10 6
索（质谱数据库：NIST17库），结合各个物质的美国化学 6.0×10 6 6
5.5×10
5.0×10 6
会的下设组织化学文摘社（Chemical Abstracts Service， 4.5×10 6
4.0×10 6
简称CAS）号比对相关信息，确定其归属。 counts 3.5×10 6 6
3.0×10
2.3 栀子酒炙前后保肝作用考察 2.5×10 6
2.0×10 6
2.3.1 药液制备 称取生栀子或酒栀子 150 g，加 10 倍 1.5×10 6 6
1.0×10
[7]
量 55% 乙醇回流 2 次，每次 60 min ，趁热抽滤，合并滤 0.5×10 6
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
液，置于水浴锅中蒸发，后恒温减压干燥处理，制成生栀 t/min
A.生栀子
子或酒栀子的冻干粉。临用时，用蒸馏水将相应冻干粉 6.0×10 6
5.5×10 6
溶解制成所需浓度的药液。 5.0×10 6
4.5×10 6
2.3.2 动物分组、给药与建模 大鼠适应性饲养1周后， 4.0×10 6 6
3.5×10
随机分为正常组，模型组，阳性对照组（联苯双酯混悬液 counts 3.0×10 6
2.5×10 6
35 mg/kg [5―6] ），生栀子低、高剂量组[1、2 g/kg（以生药量 2.0×10 6
1.5×10 6
[5―6]
计） ]，酒 栀 子 低 、高 剂 量 组 [1、2 g/kg（以 生 药 量 1.0×10 6
0.5×10 6
计） ]，每组10只。正常组和模型组大鼠灌胃蒸馏水， 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
[5―6]
t/min
各给药组大鼠灌胃相应药液，给药体积为 0.02 mL/g，连 B.酒栀子
续给药7 d。末次给药2 h后，除正常组外其余各组大鼠 2.6×10 6
2.4×10 6
腹腔注射40%四氯化碳3 mL/kg [5―6] ，建立肝损伤模型。 2.2×10 6
2.0×10 6
1.8×10 6
2.3.3 生化指标检测 大鼠注射给药后，禁食不禁水 1.6×10 6 6
16 h，观察其状态后眼球取血，2 000 r/min 离心 15 min， counts 1.4×10 6
1.2×10
1.0×10 6
取上层血清，于4 ℃密封保存。采用AU480型全自动生 0.8×10 6 6
0.6×10
化分析仪检测各组大鼠血清中 ADA、AST、ALT、ALP、 0.4×10 6 6
0.2×10
LDH、TBA、TBIL、DBIL、TP、PA的水平。取血后脱颈处 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
t/min
死大鼠，摘取肝组织。取部分肝组织制成匀浆，以2 000 C.黄酒
图1 生栀子、酒栀子、黄酒的挥发油的总离子流图
r/min 离心 15 min，取上清液。按试剂盒说明书操作，采
用紫外可见分光光度计检测各组大鼠肝组织匀浆上清 3.2 栀子酒炙前后保肝作用比较
液中SOD和MDA的水平。 3.2.1 大鼠状态 正常组和阳性对照组大鼠无明显异
2.3.4 肝组织病理检查 取剩余的肝组织用 10% 甲醛 常，状态良好。模型组大鼠出现活动减少、成群蜷卧、弓

中国药房 2023年第34卷第4期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 4 · 435 ·