Page 36 - 《中国药房》2023年4期
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significantly  decreased （P＜0.05）.  Compared  with  model  group，  above  indexes  of  administration  groups  were  all  reversed  to
          different  extents.  The  results  of  metabonomics  study  showed  that  after  intervened  with  the  extract  of  E.  sphaerocephalus，  18
          metabolites  such  as  arachidonic  acid，  phenylalanine，  tyrosine，  tryptophan，  isoleucine  and  uric  acid  in  the  serum  of  rats  changed
          significantly，  involving  15  metabolic  pathways  such  as  arachidonic  acid，  phenylalanine  and  tyrosine，  of  which  arachidonic  acid
          metabolism，  phenylalanine  metabolism  and  tyrosine  metabolism  were  the  main  influencing  pathways.  CONCLUSIONS  E.
          sphaerocephalus  extract  can  effectively  improve  D-galactose-induced  oxidative  stress  and  the  deterioration  of  bone  microstructure，
          which interferes with metabolic pathways such as arachidonic acid metabolism and amino acid metabolism.
          KEYWORDS     Echinops sphaerocephalus； D-galactose； metabolomics； osteoporosis； metabolic regulation



              骨质疏松症是一种骨代谢性疾病，多发于老年人与                          购 自 武 汉 华 联 科 生 物 技 术 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为
          绝经后妇女，临床表现为骨微结构退化和骨密度降低，                            ab119611、ab65445、GR201812-1、GR201833-3、ab118194；
          进而增加骨脆性，诱发骨骼变形、骨折、骨骼疼痛以及多                           生理盐水（批号 210803）、D-半乳糖（批号 CG29133740）
                           [1]
          脏器损伤等并发症 。而随着人口老龄化加剧，骨质疏                            均购自呼和浩特市泽浩生物科技有限责任公司；骨疏康
          松症的发病率已居慢性病第三位 。据相关调查显示，                            颗粒（阳性对照药，批号151002332，每袋装10 g）购自辽
                                       [2]
          我国60岁以上人群骨质疏松症患病率达到36.0%，预计                         宁沃华康辰药业有限公司；液质联用级乙腈、甲酸均购
                                                    [3]
          至 2050年，我国骨质疏松症患者将达到2.02 亿人 。而                      自美国 Thermo Fisher Scientific 公司。蓝刺头药材于
          现有的骨质疏松症治疗药物存在副作用大、价格昂贵、                            2020年8月采集自内蒙古武川县，经内蒙古医科大学药
                             [4]
          患者依从性差等问题 。因此，积极开展对老年性骨质                            学院生药学教研室渠弼副教授鉴定为真品。
          疏松症的预防与治疗，研发安全、有效、经济的抗骨质疏                           1.3 实验动物
          松新药意义重大。                                                雄性Wistar大鼠36只，体质量（200±20）g，12周龄，
              蒙药蓝刺头 Echinops sphaerocephalus Linn. 为菊科        购自内蒙古医科大学实验动物研究中心，生产许可证号
                                                [5]
          多年生草本植物，具有接骨愈伤、壮骨之功效 。本课题                           为SCXK（蒙）2015-0001。大鼠饲养于标准受控环境（相
          组前期已对蓝刺头中化学成分及其对去势大鼠骨代谢、                            对湿度50%～60%，温度18～22 ℃，12 h昼夜交替，自由
          细胞因子的调控作用进行了初步研究，证实了蓝刺头提                            进食饮水）。动物实验经内蒙古医科大学医学伦理委员
          取物具有类雌激素样作用，能够有效防治绝经后期骨质                            会批准（批准号为YKD2018056）。所有大鼠饲养1周后
          疏松症   [6―7] 。但目前有关蓝刺头对D-半乳糖诱导的骨质                    进行实验。
          疏松症是否有效，且如何起效尚不明确。本研究通过经                            2 方法
          典药理学指标研究蓝刺头对 D-半乳糖诱导的骨质疏松                           2.1 药液的制备
          症模型大鼠的疗效；同时借助代谢组学技术优势，探究大                               取500 g 蓝刺头药材，加入6 000 mL蒸馏水，加热回
          鼠的代谢变化，并通过差异代谢物与代谢通路分析探讨                            流提取 2 次，每次 30 min。将 2 次滤液合并，浓缩、冻干
                                                                                                      [8]
          其代谢机制，以期为蓝刺头防治骨质疏松症提供参考。                            后得蓝刺头提取物冻干粉，经紫外分光光度法 测得其
          1 材料                                                总酚酸含量为63.03 mg/g，于－20 ℃保存备用。使用时
          1.1 主要仪器                                            加入适量蒸馏水溶解得质量浓度为21 mg/mL的蓝刺头
                                            TM
              本研究所用主要仪器有Q-Exactive 组合型四极杆                     冻干粉药液（以蓝刺头提取物计）；同时使用适量蒸馏水
          Orbitrap 质谱仪、Ultimate 3000 型高效液相色谱系统                溶解骨疏康颗粒，得质量浓度为10.5 mg/mL的药液。
                 TM
         （美国 Thermo Fisher Scientific 公司），Milli-Q iq7000 型    2.2 动物分组、造模与给药
          超纯水系统（德国Merk公司），5424R型离心机（德国Ep‐                         采用数字随机分组法将36只大鼠分为6组，分别为
          pendorf 公司），EYELAN-1100 型旋转蒸发器（上海爱朗                 空白组、模型组、骨疏康组和蓝刺头高、中、低剂量组，每
          仪器有限公司），Forma 900 Series 型超低温冰箱（美国                  组 6 只。空白组按 5 mL/kg 腹腔注射生理盐水，其余各
          Thermo Scientific 公司），Inveon MM 型小动物正电子发            组按120 mg/kg腹腔注射D-半乳糖，持续注射8周，建立
                                                                            [9]
          射断层显像/X 线计算机体层成像仪（positron emission                 骨质疏松症模型 。建模后，蓝刺头高、中、低剂量组分
          tomography/computedtomography，PET/CT；德国Siemens      别按878、439、219.5 mg/kg（分别为临床等效剂量的4、2、
          公司），Spectra Max i3x 型酶标仪[美谷分子仪器（上海）                 1 倍）灌胃蓝刺头冻干粉药液；骨疏康组按 105.1 mg/kg
          有限公司]。                                             （剂量为临床等效剂量）灌胃骨疏康药液；空白组与模型
          1.2 主要药品与试剂                                         组灌胃等体积生理盐水。每日1次，连续给药8周。
              丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶                2.3 取材
         （superoxide dismutase，SOD）、碱性磷酸酶（alkaline phos‐          各组大鼠末次给药后，连续 12 h 禁食不禁水，然后
          phatase，ALP）、羟脯氨酸（hydroxyproline，HYP）、总抗氧           麻醉，腹主动脉取血，置于5 mL采血管中，3 500 r/min离
          化能力（total antioxidant capacity，TAOC）检测试剂盒均          心 10 min 后分离血清，置于－80 ℃保存备用。将大鼠


          · 414 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 4                               中国药房  2023年第34卷第4期
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