Page 79 - 《中国药房》2023年3期
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150                      150                      3 讨论
                                                                 在前期研究中,笔者先是采用超声辅助提取法对甲
           细胞活力/%  100  a  a       细胞活力/%  100   b           醇、乙醇进行考察,结果显示,乙醇对石胡荽总三萜提取
            50
                  a  a              50    a   a              率较高。随后,笔者以乙醇为溶剂,对回流提取法、超声
             0                       0
               Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ  Ⅵ        Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ  Ⅵ      辅助提取法和冷浸渍法的提取效果进行考察,结果发
                   A.石油醚部位                B.乙酸乙酯部位
                                                             现,3种提取方法中回流提取法提取率较后两者高,故本
           150                      150
                                                             研究采用乙醇回流提取法作为提取方法。经单因素实
           细胞活力/%  100  a  a  a    细胞活力/%  100  a  b         验和响应面法分析发现,乙醇体积分数和料液比是影响

                                                             石胡荽总三萜提取率的主要因素。通过响应面法确定
            50
                                    50
             0                       0                       乙醇体积分数70%、提取时间2.0 h、料液比1∶40(g/mL)、
               Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ  Ⅵ        Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ  Ⅴ  Ⅵ
                                                             提取次数3次为最佳工艺,该工艺操作简单、提取率高、
                   C.正丁醇部位                  D.水部位
             a:与空白组比较,P<0.01,b:与空白组比较,P<0.05;Ⅰ:空白组;          可行性强,具有较强的实际应用价值。
         Ⅱ:50 μg/mL 药物组;Ⅲ:25 μg/mL 药物组;Ⅳ:12.5 μg/mL 药物组;         NO 是十分重要的炎症介质,脂多糖在刺激 RAW
         Ⅴ:9.375 μg/mL药物组;Ⅵ:6.25 μg/mL药物组
                                                             264.7 细胞产生急性炎症反应的过程中会释放大量的
         图3 不同提取部位对RAW264.7细胞活力的影响(x±s,
                                                                [28]
                                                             NO 。文献报道,石胡荽粗提物             [29―31] 和部分三萜类化合
               n=3)
                                                             物具有抗炎作用 。本研究采用地塞米松作为阳性对
                                                                            [32]
          考文献[27]。NO生成抑制率(%)=(模型组吸光度-药
                                                             照药物,比较了石胡荽醇提物不同萃取部位(石油醚部
          物组吸光度)/(模型组吸光度-空白组吸光度)×100%。
                                                             位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位)的体外抗炎活
          实验重复 3 次。数据以 x±s 表示,并通过 Graphpad                   性。结果显示,抗炎活性强弱排序依次为乙酸乙酯部
          Prism 5.0软件计算各药物组的半数抑制浓度(IC50 )。结
                                                             位>石油醚部位>正丁醇部位>水部位。其中,石油醚
          果显示,在实验质量浓度范围内,各部位的抗炎活性强                           部位、乙酸乙酯部位均能较好地抑制脂多糖诱导小鼠
          弱排序依次为乙酸乙酯部位>石油醚部位>正丁醇部                            RAW264.7细胞生成炎症介质NO,且其IC50均低于阳性
          位>水部位,其对 NO 生成的 IC50分别为 2.22、2.44、>                对照药物地塞米松。
          100、>100 μg/mL。石油醚部位、乙酸乙酯部位可不同                         综上所述,优化后的石胡荽醇提物制备工艺稳定可
          程度地抑制 NO 生成,且其 IC50均低于阳性对照药物地                      行,其石油醚部位、乙酸乙酯部位具有一定的抗炎活性。
          塞米松(7.65 μg/mL)。正丁醇部位和水部位各个浓度                      但本文结论仍需设计更为严密的药理实验加以验证。

          对 NO 的生成无抑制作用,计算其 IC50>100 μg/mL,判                 参考文献
          断这2个部位均无抗炎活性。结果见表4。                                [ 1 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志:第七
         表4 各萃取部位对 RAW264.7 细胞 NO 生成的影响及                          十六卷:第一分册[M]. 北京:科学出版社,1983:132.
               IC50测定结果(n=3)
                                                             [ 2 ]  何顺志,徐文芬. 贵州中草药资源研究[M]. 贵阳:贵州科
          组别         质量浓度/(μg/mL)  NO生成抑制率(x±s)/%  IC 50/(μg/mL)  技出版社,2007:670.
          石油醚部位         6.250       83.443±2.896    2.44
                        3.125       60.947±1.153             [ 3 ]  LINH N T T,HA N T T,TRA N T,et al. Medicinal plant
                        1.563       35.593±1.759                  Centipeda minima:a resource of bioactive compounds[J].
                        0.781       20.913±1.286                  Mini Rev Med Chem,2021,21(3):273-287.
                        0.391       17.730±1.284
          乙酸乙酯部位        9.375       85.577±1.454    2.22     [ 4 ]  李兆坤,王凤寰,陈彬,等. 大型真菌萜类化合物活性研
                        4.687       66.430±1.559                  究进展[J]. 天然产物研究与开发,2017,29(2):357-369.
                        2.347       46.480±2.700
                        1.172       28.687±2.759             [ 5 ]  ZHANG J L,AI L S,LV T T,et al. Asiatic acid,a triter‐
                        0.586        3.263±1.086                  pene,inhibits cell proliferation through regulating the ex‐
          正丁醇部位          -             -           >100           pression  of  focal  adhesion  kinase  in  multiple  myeloma
          水部位            -             -           >100
          地塞米松          40          81.830±0.934    7.65          cells[J]. Oncol Lett,2013,6(6):1762-1766.
                        20          61.223±1.367             [ 6 ]  王嘉欣 . 鹅不食草正丁醇部位化学成分研究[D]. 天津:
                        10          51.835±2.647                  天津中医药大学,2020.
                        5           43.221±1.065
                        2.5         34.617±1.389             [ 7 ]  刘玉艳. 鹅不食草乙酸乙酯部位抗肿瘤活性成分的研究
           -:表示这2个部位均无抗炎活性                                        [D]. 武汉:湖北中医药大学,2010.


          中国药房  2023年第34卷第3期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 3    · 325 ·
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