Page 50 - 《中国药房》2023年2期

药物的释药百分率仅为11.6%，经前两个阶段的释药，此 细胞毒性，所制备的空白膜及载药膜均符合标准的相关
时膜中药物较少，浓度差较低是导致该阶段药物释放速 要求。
率减缓的首要原因。 4 h 24 h
100

80
累积百分率/% 60 A.阳性对照

40
20
0
0 50 100 150 200
累积释药时间/min
图6 载药膜在人工唾液中的释药曲线
B.阴性对照
2.4 载药膜的体外细胞毒性考察
按照《GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价第 5
部分：体外细胞毒性试验》的要求以体外细胞毒性实验
进行膜剂的生物安全性评价。选用小鼠成纤维细胞 L-
929细胞株，以MTT法检测空白膜和载药膜的体外细胞 C.空白对照
毒性。将 1×10 个/mL 的细胞悬液以每孔 100 μL 接种
5
于96孔板中，设置5个实验组，分别为受试组[样品1（空
白膜浸提液）、样品2（载药膜浸提液）、阳性对照组（0.1%
二乙基二硫代氨基甲酸锌溶液）、阴性对照组（高密度聚
乙烯膜浸提液）]和空白对照组，每组设 6 个复孔。以含 D.样品1
2
10% 胎牛血清的 MEM 培养基为溶剂，按 6 cm∶1 mL 的
浸提比例分别制备空白膜浸提液、载药膜浸提液、高密
度聚乙烯膜浸提液和0.1%二乙基二硫代氨基甲酸锌溶
液，在细胞培养箱内（37.0 ℃，5%CO2，相对湿度大于
90%）培养至细胞密度达 70%。用对应组别的药物分别 E.样品2
图7 细胞在各样品浸提液中培养4 h、24 h时的显微图
处理细胞24 h，培养4 h后观察各组细胞形态；继续培养
（×10）
至 24 h 后，再次观察细胞形态。完成观察后弃培养液，
每孔加 20 μL MTT（5 mg/mL），置于细胞培养箱中培养 3 讨论
4 h后弃上清液，每孔加入100 μL二甲基亚砜，避光振荡 市售治疗口腔溃疡的药物多以地塞米松等激素类
30 min 后，在 570 nm 波长下测定光密度（OD）值并计算 药物为主，而康复新液是美洲大蠊乙醇提取物的现代化
制剂。现代药理学研究证实，美洲大蠊提取物具有促进
细胞增殖率。细胞增殖率（%）＝受试组OD值/空白对照
伤口愈合与组织修复、增强免疫、改善微循环等作用；其
组OD值×100%。以空白对照组的细胞活力为参比，若
富含小分子活性肽，对各类表皮或黏膜损伤可起到抗感
受试组的细胞活力＜空白对照组细胞活力的70%，即认
染及免疫调节作用，具有一定的修复能力，临床上常用
为受试样品具有潜在的细胞毒性。
于治疗各种原因引起的口腔溃疡，且疗效显著 [13―14] 。基
结果由图7可见，L-929细胞在样品1、样品2中共孵
于此，将美洲大蠊提取物制备成可以长期贴敷于溃疡
育4 h后细胞密度可达到50%～60%；共孵育24 h后细胞
面，并能持续给药的口腔膜剂是解决康复新现有剂型在
密度可达到 80%～90%，且各细胞生长状态良好。除阳
口腔滞留时间短、药物流失快的有效方法。蛛丝蛋白链
性对照组细胞在共孵育 4 h 后已呈现皱缩圆形之外，其 具有独特力学性能，不易发生形变，有良好的降解特性，
他受试组细胞在共孵育4 h和24 h后均呈放射状生长且 降解缓慢，生物安全性高，因而蛛丝多孔支架被率先研
轮廓清晰。MTT实验结果显示，样品1、样品2作用后的 究用于组织工程如人工心脏支架，以及用于医美的线雕
细胞增殖率分别为 84.6%、79.4%（均大于 70%）。可见， 用材等 [15―16] 。
空白膜和载药膜的浸提液均对L-929细胞无显著的潜在 （下转第211页）

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