Page 40 - 《中国药房》2023年2期
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inhibitor  of  metalloproteinase-1 （TIMP-1）  and  soluble  suppression  of  tumorigenicity-2 （sST-2）  were  detected  by  ELISA.  The
          protein  expressions  of  angiotensin  converting  enzyme  2-angiotensin-（1-7）-Mas  [ACE2-Ang-（1-7）-Mas]  axis  were  detected  by
          Western blot. RESULTS Compared with sham operation group， myocardial cells in model group and A779 group were disordered，
          collagen  fiber  deposition  was  significantly  increased  and  myocardial  fibrosis  was  obvious；  the  Hyp  content  and  MMP-2，  MMP-9，
          sST-2  levels  were  increased，  and  COL  Ⅰ  and  COL  Ⅲ  positive  expressions  were  significantly  enhanced；  TIMP-1  level，  protein
          expressions of ACE2， Ang-（1-7） and Mas were significantly decreased （P＜0.05）. Compared with model group， above indexes of
          Tingli dazao xiefei decoction equivalent-dose and high-dose groups were improved to different extents. Compared with A779 group，
          A779+Tingli  dazao  xiefei  decoction  equivalent-dose  and  A779+high-dose  groups  could  improve  myocardial  arrangement  and
          collagen  distribution，  reduce  the  Hyp  content  and  MMP-2，  MMP-9  levels，  reduce  positive  expressions  of  COL  Ⅰ  and  COL  Ⅲ
         （P＜0.05），  but  couldn’t  improve  Ang-（1-7）  and  Mas  protein  expression.  CONCLUSIONS  Tingli  dazao  xiefei  decoction  can
          improve  ventricular  remodeling  in  myocardial  failure  model  rats  after  myocardial  infarction  by  improving  the  expression  of ACE2-
          Ang-（1-7）-Mas axis proteins.
          KEYWORDS     Tingli dazao xiefei decoction； heart failure； ventricular remodeling； ACE2-Ang-（1-7）-Mas axis


              心力衰竭（简称“心衰”）是心血管疾病的严重和终                         1 材料
                                      [1]
          末阶段，致残率和致死率均较高 。心肌梗死（简称“心                           1.1 主要仪器
          梗”）是当前心衰最常见、最重要的病因之一，心梗后心                               本研究所用主要仪器包括 Micro Maxx 型彩色多普
          衰的发生与心肌细胞丢失、心室重构、神经内分泌系统                            勒超声诊断仪（美国 SonoSite 公司），164-5050 型电泳仪
          激活及其他病理变化密切相关，其中心室重构是心衰发                            电源、Mini-Protean 型垂直电泳槽、Mini Trans-Blot 型电
                            [2]
          生的基本病理过程 。肾素-血管紧张素系统（renin-                         泳转印仪（美国 Bio-Rad 公司），Multiskan GO 型全波长
          angiotensin system，RAS）的激活、细胞外基质的成分改                酶标仪、Biofuge Stratos 型台式高速冷冻离心机（美国

          变和心肌纤维化的进展均会影响心室重构，加重心                              Thermo Fisher Scientific公司），KZ-Ⅱ型高速组织研磨仪
          衰 [3―4] 。血管紧张素转换酶2-血管紧张素-（1-7）-Mas[an‐             （武汉赛维尔生物科技有限公司），JB-P5 型组织包埋机
          giotensin  converting  enzyme  2-angiotensin-（1-7）-Mas，  （武汉俊杰电子有限公司），KD-P型组织摊片机（浙江省
                                                              金华市科迪仪器设备有限公司），RM2016型病理切片机
          ACE2-Ang-（1-7）-Mas]轴是一种 RAS 的非典型轴，被激
                                                             （德国Leica公司），DP71-BX41型显微观察摄像系统（日
          活后可拮抗RAS系统对心脏产生的不良影响，改善心室
                                                              本Olympus公司）等。
              [5]
          重构 。ACE2 是血管紧张素转换酶（angiotensin con‐
                                                              1.2 主要药品与试剂
          verting enzyme，ACE）的同系物，在心血管、肾脏、肠道和
                                                                  炒葶苈子饮片（产地安徽，批号 1801123）购自安徽
          呼吸系统中发挥重要的生理和病理作用，可将血管紧张
                                                              普仁中药饮片有限公司，大枣饮片（产地新疆，批号
          素Ⅱ（angiotensin，AngⅡ）转化为 Ang-（1-7），后者可与
                                                              180901）购自河南辉煌草本药业有限公司，经河南中医
          Mas 受体（Mas receptor，MasR）结合，从而形成 ACE2-
                                                              药大学第一附属医院药学部陈天朝主任药师鉴定均为
          Ang-（1-7）-Mas轴。该轴可改善RAS中血管紧张素转换
                                                              真品。
          酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1 型受体（angiotensin
                                                                  氯沙坦钾片（阳性对照，批号 J009104，规格 0.05 g）
          converting  enzyme-angiotensin  Ⅱ -angiotensin  Ⅱ  type  1
                                                              购自英国 Merck Sharp & Dohme Limited 公司；A779 对
          receptor，ACE-AngⅡ-AT1R）轴激活后对心脏的损害，具
                                                              照品（Mas 受体拮抗剂，批号 NJP90025-181225，纯度
          有舒张血管、抑制心肌肥大、调节心脏重塑等作用 。
                                                    [6]
                                                              98.23%）购自南京肽业生物科技有限公司。兔COLⅠ多
              葶苈大枣泻肺汤由炒葶苈子和大枣组成，是治疗心
                                                              克隆抗体（货号AF7001）购自美国Affinity公司；兔COL
          衰的经典复方，可通过多途径、多靶点改善心衰、缓解心                           Ⅲ多克隆抗体、兔甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）多克
          室重构   [7―8] 。然而，葶苈大枣泻肺汤改善心室重构的作                     隆抗体、HRP 标记的山羊抗兔 IgG 二抗（货号分别为
          用机制尚未明确。为此，本研究拟使用葶苈大枣泻肺汤                            22734-1-AP、10494-1-AP、SA00001-2）均购自武汉三鹰
          干预心梗后心衰模型大鼠，从Ⅰ型胶原蛋白（Ⅰ-type                          生物技术有限公司；苏木精染液、DAB 显色剂、Masson
          collagen，COLⅠ）、Ⅲ型胶原蛋白（Ⅲ-type collagen，COL           染色试剂盒（货号分别为 G1004、G1211、G1006）均购自
          Ⅲ）、羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）、纤维化相关指标                 武汉赛维尔生物科技有限公司；基质金属蛋白酶 2（ma‐
          和ACE2-Ang-（1-7）-Mas轴相关蛋白等变化方面探讨其                    trix metalloproteinase-2，MMP-2）、MMP-9、金属蛋白酶
          作用机制，以期为该方用于治疗心衰提供确切证据。                             组织抑制因子 1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，


          · 162 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 2                               中国药房  2023年第34卷第2期
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