Page 42 - 《中国药房》2023年2期
P. 42

μg，进行 10%SDS-PAGE 凝胶电泳分离并以湿转法转
          到 PVDF 膜上；用 5% 脱脂奶粉封闭 2 h，加入 ACE2、
          Ang-（1-7）、Mas、GAPDH 一抗（稀释度分别为 1∶1 000、
          1∶500、1∶800、1∶5 000），4 ℃孵育过夜；用TBST溶液漂
          洗，加入HRP标记的IgG二抗（稀释度为1∶1 000），37 ℃
          孵育 1 h；以 ECL 化学发光法显影，使用 Image J 软件进
          行分析，以目的蛋白与内参蛋白 GAPDH 的灰度值表示                                 A.假手术组                   B.模型组
          目的蛋白的表达水平。每组取3个样本进行检测。
          2.10 统计学方法
              采用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。实验数
          据以 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一
          步两组间的比较采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。
          3 结果
          3.1 大鼠心肌组织中的胶原纤维分布
                                                                      C. A779组             D. A779+等效剂量组
              各组大鼠心肌组织中的胶原纤维分布如图 1 所示。
          与假手术组比较，模型组和 A779 组大鼠心肌细胞排列
          紊乱，胶原纤维沉积明显增多，心肌纤维化明显；与模型
          组比较，等效剂量组、高剂量组和氯沙坦组大鼠心肌细
          胞排列规整，蓝色胶原纤维分布明显减少，心肌纤维化
          减轻；与 A779 组比较，A779+等效剂量组和 A779+高剂
          量组大鼠心肌细胞排列有所改善，蓝色胶原纤维分布不
                                                                    E. A779+高剂量组              F.等效剂量组
          同程度减少，心肌纤维化减轻。
          3.2 大鼠心肌组织中的Hyp含量
              各组大鼠心肌组织中Hyp含量如表1所示。与假手
          术组比较，模型组和 A779 组大鼠心肌组织中的 Hyp 含
          量显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，等效剂量组、高
          剂量组和氯沙坦组的 Hyp 含量显著降低（P＜0.05）；与
          A779 组比较，A779+等效剂量组和 A779+高剂量组的
          Hyp含量均显著降低（P＜0.05）。                                         G.高剂量组                  H.氯沙坦组
                                                              图1 各组大鼠心肌组织中胶原纤维分布显微图（×400）
          3.3 大鼠心肌组织中的COLⅠ、COLⅢ蛋白表达水平
              各组大鼠心肌组织中COLⅠ、COLⅢ表达如图2、图                               表1 各组大鼠心肌组织中Hyp含量
          3、表2所示。与假手术组比较，模型组和A779组大鼠心                         组别         n    Hyp/（μg/mg）  组别    n    Hyp/（μg/mg）
          肌组织中 COLⅠ、COLⅢ阳性着色程度均显著增强，平                         假手术组       8     3.63±0.85  A779+高剂量组  8  4.36±1.07 b
                                                              模型组        8     6.40±0.61 a  等效剂量组  7   3.89±0.97 c
          均光密度值显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，等效剂
                                                              A779组      7     5.69±0.88 a  高剂量组  8    4.06±0.69 c
          量组、高剂量组和氯沙坦组大鼠心肌组织中 COLⅠ、                           A779+等效剂量组  7    4.03±1.02 b  氯沙坦组  8    4.12±0.87 c
          COLⅢ阳性着色程度均显著减弱，平均光密度值显著降                              a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与A779组比较，P＜0.05；c：与模
          低（P＜0.05）；与 A779 组 比 较 ，A779+ 等 效 剂 量 组 、           型组比较，P＜0.05
          A779+高剂量组的COLⅠ、COLⅢ阳性着色程度均显著                        0.05）；与 A779 组 比 较 ，A779+ 等 效 剂 量 组 MMP-2、
          减轻，平均光密度值显著降低（P＜0.05）。                              MMP-9 水平显著降低（P＜0.05），A779+高剂量组的
          3.4 大鼠血清中纤维化相关指标水平                                  MMP-2、MMP-9、sST-2水平显著降低（P＜0.05）。
              各组大鼠血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、sST-2等                3.5 大鼠心肌组织中ACE2-Ang（1-7）-Mas轴相关蛋白
          纤维化相关指标水平如表3所示。与假手术组比较，模                            的表达情况
          型组和 A779 组的 MMP-2、MMP-9、sST-2 水平显著升                     各组大鼠心肌组织ACE2、Ang（1-7）、Mas蛋白表达
          高，TIMP-1 水平显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，等                    量如图 4 所示。与假手术组比较，模型组和 A779 组的
          效剂量组的TIMP-1水平显著升高、sST-2水平显著降低                       ACE2、Ang-（1-7）、Mas蛋白表达均显著降低（P＜0.05）；
         （P＜0.05），高剂量组和氯沙坦组的 MMP-2、MMP-9、                     与模型组比较，等效剂量组的Ang-（1-7）蛋白表达显著升
          sST-2 水平显著降低以及 TIMP-1 水平显著升高（P＜                     高（P＜0.05），高剂量组和氯沙坦组的ACE2、Ang-（1-7）、


          · 164 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 2                               中国药房  2023年第34卷第2期
   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47