Page 65 - 《中国药房》2023年1期

表1 葛根素等6个待测成分的线性关系考察结果 结果显示，7个评价指标可分成5个层次，即葛根素＞大
待测成分 回归方程 R 2 线性范围/（µg/mL） 豆苷元＝毛蕊异黄酮葡萄糖苷＞毛蕊异黄酮＝芒柄花
葛根素 Y＝15 887X－79 954 0.998 8 20～400 黄素＞大豆苷＞出膏率，形成两两比较的优先判断矩
大豆苷 Y＝17 657X－53 030 0.998 4 10～200
毛蕊异黄酮葡萄糖苷 Y＝19 009X－31 804 0.998 3 5～100 阵，其评分见表2。
大豆苷元 Y＝27 606X－82 737 0.998 9 10～200 表2 葛根素等7个评价指标两两比较的优先判断矩阵
毛蕊异黄酮 Y＝26 140X－40 642 0.998 2 5～100 评分（分）
芒柄花黄素 Y＝26 903X－42 742 0.997 9 5～100
评价指标 葛根素 大豆苷元 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 毛蕊异黄酮 芒柄花黄素 大豆苷 出膏率
元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素峰面积的 RSD 分别为
葛根素 1 2 2 3 3 4 5
1.07%、0.59%、0.62%、0.66%、0.6%、1.17%（n＝6），表明 大豆苷元 1/2 1 1 2 2 3 4
仪器精密度良好。 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 1/2 1 1 2 2 3 3
毛蕊异黄酮 1/3 1/2 1/2 1 1 2 3
2.3.4 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液，分别于 芒柄花黄素 1/3 1/2 1/2 1 1 2 2
制备后 0、2、4、8、12、24 h 按“2.2”项下色谱条件进样测 大豆苷 1/4 1/3 1/3 1/2 1/2 1 2
出膏率 1/5 1/4 1/4 1/3 1/3 1/2 1
定，记录峰面积。结果显示，葛根素、大豆苷、毛蕊异黄
酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素峰面积 根据上述优先判断矩阵评分结果，葛根素、大豆苷、
的 RSD 分 别 为 0.69%、0.32%、1.24%、0.88%、1.54%、 毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄
素的含量及出膏率7个评价指标经过层次分析法得到的
0.66%（n＝6），表明供试品溶液在制备后 24 h 内稳定性
良好。 权重系数分别为0.304 7、0.065 2、0.185 8、0.185 8、0.107 8、
2.3.5 重复性试验 按“2.1.2”“2.1.3”项下方法平行制 0.107 8、0.042 7，通过一致性检验，计算出随机一致性比
备 6 份供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件依次进样测 率（consistent ratio，CR）为 0.01＜0.1，表明上述 7 个指标
定，记录峰面积，代入回归方程计算各成分含量。结果 的优先判断矩阵满足一致性要求，以上所得各指标的权
显示，葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、 重系数有效。将上述各权重系数代入下式计算综合评
毛蕊异黄酮、芒柄花黄素含量的 RSD 分别为 0.46%、 分（y）：y＝（葛根素含量/葛根素含量最大值×0.304 7+
0.21%、0.67%、2.78%、0.95%、0.22%（n＝6），表明该方法 大豆苷含量/大豆苷含量最大值×0.065 2+毛蕊异黄酮
重复性良好。 葡萄糖苷含量/毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量最大值×
2.3.6 加样回收率试验 取已知成分含量的黄芪-葛根 0.185 8+大豆苷元含量/大豆苷元含量最大值×0.185 8+
药对提取液 6 份，每份 1 mL，分别精密加入一定量的混 毛蕊异黄酮含量/毛蕊异黄酮含量最大值×0.107 8+芒
合对照品溶液，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再 柄花黄素含量/芒柄花黄素含量最大值×0.107 8+出膏
按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，计算加样 率/出膏率最大值×0.042 7）×100，综合评分越高表示提
回收率。结果显示，葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖 取条件越好。
苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的加样回收率分 2.6 黄芪-葛根药对提取工艺的单因素考察
别 为 102.68%、99.51%、100.73%、99.14%、100.09%、 本研究选取料液比、提取次数和提取时间作为考察
99.07%，RSD 分 别 为 0.67%、2.22%、0.47%、2.15%、 因素，通过多指标综合评分法对黄芪-葛根药对提取工
1.66%、1.73%（n＝6），表明该方法准确度良好。 艺的单因素进行考察。
2.4 出膏率测定 2.6.1 料液比考察 称取黄芪10 g、葛根5 g，共4份，加
精密量取黄芪-葛根药对提取液 30 mL 置于干燥至 水[料液比分别设为1∶6、1∶8、1∶10、1∶12（g/mL）]回流提
恒质量（M1 ）的蒸发皿中，95 ℃水浴蒸干后置于105 ℃烘 取 2 次，每次 1 h，合并 2 次提取液，定容至 400 mL。按
箱中干燥 4 h，取出后置于干燥器中冷却，称定质量 “2.1.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件
（M2 ），M2与 M1质量之差即为干膏粉质量，再计算出膏 进样测定并代入回归方程计算各指标成分的含量；再按
[14]
率：出膏率＝干膏粉质量/饮片质量×100% 。 “2.4”项下方法测定出膏率，然后按“2.5”项下公式计算
2.5 数据处理 各组的综合评分。由图2A可知，随着料液比的增加，综
利用多指标综合评分法，将提取液中葛根素（a）、大 合评分呈上升趋势，但当料液比为1∶10、1∶12（g/mL）时，
豆苷（b）、毛蕊异黄酮葡萄糖苷（c）、大豆苷元（d）、毛蕊 综合评分相差不大，故选择料液比1∶6、1∶8、1∶10（g/mL）
异黄酮（e）、芒柄花黄素（f）的含量及出膏率（g）作为评价 进行后续工艺优化。
指标予以量化。采用层次分析法进行分析 [15―16] ，根据黄 2.6.2 提取次数考察 称取黄芪10 g、葛根5 g，共4份，
芪-葛根药对的配伍理念，评价各指标成分及出膏率在 分别加入6倍量水回流提取，每次1 h，分别提取1、2、3、4
药对配伍中的相对重要性并对各指标进行优选排序。 次，合并各次提取液，并定容至 400 mL。按“2.1.3”项下

中国药房 2023年第34卷第1期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 1 · 59 ·