Page 64 - 《中国药房》2023年1期
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升元气，黄芪助葛根以生津液，两者配伍相互辅佐，可补                           黄芪-葛根药对提取液。
          气健脾、生津止渴，常用于治疗气阴两虚型糖尿病                    [9―11] 。  2.1.3 供试品溶液的配制 精密吸取“2.1.2”项下黄芪-
              前期文献报道中关于黄芪、葛根单味药的提取工艺                          葛根药对提取液 1 mL，置 1.5 mL 离心管中，以 14 000
          研究较多    [12―13] ，但关于其药对提取工艺的研究较少。为                  r/min离心10 min，取上清液作为供试品溶液。
          最大程度地保留黄芪-葛根药对中多种有效物质，从而                            2.2 色谱条件
          发挥药对的最佳作用，本研究拟通过高效液相色谱                                  以 Shimadzu Shimpack GIST C18 （4.6 mm×250 mm，
         （HPLC）法同时测定黄芪-葛根药对提取液中葛根素、大                          5 μm）为色谱柱；流动相为 0.1% 磷酸溶液（A）-甲醇
          豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒                          （B），梯度洗脱（0～60 min，20%B→35%B；60～90 min，
          柄花黄素的含量；在单因素实验的基础上，以上述各成                            35%B→55%B；90～102  min，55%B→70%B；102～110
          分的含量和出膏率作为评价指标，采用多指标综合评分                            min，70%B→20%B；110～120 min，20%B）；流速为 1.0
          法结合正交实验优选黄芪-葛根药对的提取工艺，以期                            mL/min；检测波长为 278 nm；柱温为 30 ℃；进样量为
          为黄芪-葛根药对治疗糖尿病的物质基础研究提供参考                            10 µL。
          依据。                                                 2.3 方法学考察
          1 材料                                                2.3.1 系统适用性试验 取“2.1”项下混合对照品溶液、
          1.1 主要仪器                                            供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录色谱
              本研究的主要仪器有LC-20A型HPLC仪、AUW120D                   图（图1）。结果显示，在该色谱条件下，葛根素、大豆苷、
          型十万分之一电子天平（日本 Shimadzu 公司），KQ-                      毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄
          600DE 型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公                          素的分离度均大于1.5，理论板数均不低于5 000。
          司），5810R 型低温高速离心机（德国 Eppendorf 公司），
                                                                    250
          JY2002 型多功能电子天平（上海衡平仪器仪表厂），                               225                          5
                                                                    200
          DHG-9030 型鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公                               175
                                                                    150
          司），Reference Milli-Q超纯水仪（美国Millipore公司）。                 mAU  125
                                                                    100        1     3         4
          1.2 主要药品与试剂                                                75                              6
                                                                     50           2
              毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品（批号 DST200619-                             25
                                                                      0
          013）、葛根素对照品（批号 DST191001-002）均购于成都                           0       10                                20      30        40      50      60      70      80      90     100    110
          德思特生物有限公司（纯度均大于98%）；毛蕊异黄酮对                                                  t/min
                                                                                  A.混合对照品溶液
          照品（批号 MUST-18120901）、芒柄花黄素对照品（批号                                     1
                                                                    250
          MUST-19033005）、大 豆 苷 对 照 品（ 批 号 MUST-                     225
                                                                    200
          19092708）、大豆苷元对照品（批号 MUST-19101107）均                      175           2
                                                                    150
          购于成都曼思特生物有限公司（纯度均大于 98%）；黄                               mAU  125
          芪、葛根饮片均购于安徽美誉中药饮片有限公司，由漯                                  100
                                                                     75
                                                                     50
          河市中心医院药学部于晓涛副主任中药师鉴定分别为                                    25              3         4  5  6
                                                                      0
          膜荚黄芪 Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge. 的干燥                 0       10                                20      30        40        50      60      70      80      90     100    110
          根炮制品和豆科植物野葛 Pueraria lobata（Willd.）Ohwi                                     t/min
                                                                                   B.供试品溶液
          的干燥根炮制品，且均符合2020年版《中国药典》（一部）                          1：葛根素；2：大豆苷；3：毛蕊异黄酮葡萄糖苷；4：大豆苷元；5：毛
          标准；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。                                蕊异黄酮；6：芒柄花黄素
          2 方法与结果                                             图1 混合对照品溶液和黄芪-葛根药对供试品溶液的
          2.1 溶液的配制                                                HPLC图
          2.1.1 混合对照品溶液的配制 精密称取适量葛根素、                         2.3.2 线性关系考察 精密移取“2.1.1”项下混合对照
          大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、                           品溶液1 mL，用甲醇逐级稀释，制成不同质量浓度的混
          芒柄花黄素对照品，置同一5 mL容量瓶中，加甲醇溶解                          合对照品溶液，再按“2.2”项下色谱条件依次进样分析，
          并稀释至刻度，混合均匀，配制成上述成分质量浓度依                            记录峰面积。以各对照品的质量浓度（µg/mL）为横坐标
          次为 0.4、0.2、0.1、0.2、0.1、0.1 mg/mL 的混合对照品溶           （X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，结果见表1。
          液，备用。                                               2.3.3 精密度试验 取“2.1.1”项下混合对照品溶液，按
          2.1.2 黄芪-葛根药对提取液的配制 称取黄芪10 g、葛                     “2.2”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结
          根5 g，加120 mL水回流提取1 h并定容至150 mL，即得                   果显示，葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷


          · 58 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 1                                中国药房  2023年第34卷第1期
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