Page 69 - 《中国药房》2023年1期
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1 材料 0.832、0.696、0.292、0.258 mg/mL 的混合对照品母液，再
1.1 主要仪器 将该母液用 60% 甲醇稀释 20 倍制得混合对照品溶液
本研究所用的主要仪器有 U3000 型 HPLC 仪[赛默 （11 种对照品溶液质量浓度依次为 50.7、22.9、11.6、9.8、
飞世尔科技（上海）有限公司]、1200 型 HPLC 仪（美国 60.9、26.5、30.7、41.6、34.8、14.6、12.9 μg/mL）。
Agilent公司）、BP210S型电子天平（德国Sartorius公司， 2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取雪梨止咳糖浆 10
d＝0.1 mg）、KQ3200DE型超声波清洗器（昆山市超声仪 mL，加60%甲醇10 mL，超声（功率150 W，频率40 kHz）
器有限公司）。 处理5 min，放冷，以60%甲醇定容至25 mL，摇匀，过滤，
1.2 主要药品与试剂 即得。按雪梨止咳糖浆制备工艺 分别制备缺苦杏仁、
[2]
雪 梨 止 咳 糖 浆（批 号 200901、201205、201206、 缺桔梗、缺枇杷叶、缺前胡的阴性样品，再制备相应的阴
201221、201223、201224、210208、211019、211207、220113、 性样品溶液。
220209、220301，编号S1～S12，规格为100 mL/瓶）购于葵 2.3 系统适用性试验
花药业集团湖北武当有限公司。白花前胡甲素对照品 取“2.2”项下混合对照品溶液和供试品溶液各适量，
（批号 111711-201904，纯度 99.4%）、白花前胡乙素对照 按“2.1”项下色谱条件进样检测，记录色谱图（图1）。结
品（批号111904-202105，纯度99.7%）和苦杏仁苷对照品 果显示，供试品溶液中11种成分的色谱峰与相邻色谱峰
（批号110820-202109，纯度93.1%）均购于中国食品药品 的分离度良好，色谱峰峰形尖锐；理论板数按白花前胡
检定研究院；委陵菜酸对照品（批号PRF22021441，纯度 甲素峰计不低于6 500。
98.5%）、马 斯 里 酸 对 照 品（批 号 PRF9082922，纯 度 2.4 多指标成分的定量检测
99.8%）和 科 罗 索 酸 对 照 品（批 号 PRF8090101，纯 度 2.4.1 线性关系考察和灵敏度试验 精密吸取“2.2.1”
98.2%）均购于成都普瑞法科技开发有限公司；去芹糖桔 项下混合对照品母液 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL，分别
梗皂苷 E 对照品（批号 PS010234，纯度 98.9%）和桔梗皂 用 60% 甲醇稀释至 20 mL，摇匀，制得系列混合对照品
苷D3对照品（批号PS010235，纯度98.9%）均购于成都普 溶液。按“2.1”项下色谱条件进样检测，记录色谱图及峰
思生物科技股份有限公司；桔梗皂苷 E 对照品（批号 面积。以各对照品的质量浓度为横坐标（X）、峰面积为
18030721，纯度 98.5%）、蔷薇酸对照品（批号 18052123， 纵坐标（Y）进行线性回归，以信噪比10∶1对应的质量浓
纯度 98.8%）和白花前胡素 E 对照品（批号 18031222，纯 度为定量限，以信噪比3∶1对应的质量浓度为检测限，结
度 99.9%）均购于上海同田生物技术股份有限公司。实 果见表1。
验用乙腈和磷酸采用色谱纯级别，其余试剂均为分 2.4.2 精密度试验 取同一混合对照品溶液，按“2.1”项
析纯。 下色谱条件重复进样测定 6 次，记录色谱图及峰面积。
2 方法与结果 结果显示，苦杏仁苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔
2.1 色谱条件 梗皂苷D3、蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、白花
色 谱 柱 为 Ultimate AQ-C18（250 mm×4.6 mm，5 前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素 E 峰面积的 RSD
μm）；柱温为 30 ℃；流动相为 0.1% 磷酸溶液（A）-乙腈 依 次 为 1.23%、1.31%、1.40%、1.50%、1.52%、1.18%、
（B），梯度洗脱（0～11 min，8.0%B；11～16 min，8.0%B→ 1.34%、1.47%、1.03%、1.29%、1.37%（n＝6），表明仪器精
12.0%B；16～26 min，12.0%B→26.0%B；26～40 min， 密度良好。
26.0%B→30.0%B；40～59 min，30.0%B→75.0%B；59～ 2.4.3 稳定性试验 取同一份雪梨止咳糖浆（编号 S1）
70 min，75.0%B→8.0%B）；流速为1.0 mL/min；检测波长 制成的供试品溶液，于制备后 0、2、4、7、12、18、24 h 按
分别为210 nm（0～40 min检测苦杏仁苷、去芹糖桔梗皂 “2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图及峰面积。结
苷 E、桔梗皂苷 E、桔梗皂苷 D3、蔷薇酸、委陵菜酸、马斯 果显示，苦杏仁苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗
里酸和科罗索酸） [7―15] 、321 nm（40～70 min 检测白花前 皂苷D3、蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、白花前
胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素 E） [16―17] ；进样量为 胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素 E 峰面积的 RSD 依
10 µL。 次为1.33%、1.40%、1.52%、1.57%、1.22%、1.37%、1.48%、
2.2 溶液的制备 1.01%、1.37%、1.28%、1.39%（n＝7），表明供试品溶液在
2.2.1 混合对照品溶液的制备 取苦杏仁苷、去芹糖桔 制备后24 h内稳定性良好。
梗皂苷 E、桔梗皂苷 E、桔梗皂苷 D3、蔷薇酸、委陵菜酸、 2.4.4 重复性试验 取同一批雪梨止咳糖浆（编号 S1）
马斯里酸、科罗索酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白 适量，按“2.2.2”项下方法平行制备6份供试品溶液，记录色
花前胡素E对照品各适量，用60%甲醇稀释制成质量浓 谱图及峰面积，以外标法计算11个待测成分的含量。结
度依次为 1.014、0.458、0.232、0.196、1.218、0.530、0.614、 果显示，苦杏仁苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗
中国药房 2023年第34卷第1期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 1 · 63 ·
