Page 59 - 《中国药房》2023年1期
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桦褐孔菌为锈革孔菌科真菌桦褐孔菌 Inonotus                              表1 22批桦褐孔菌药材的样品信息
          obliquus （ Fr.） Pilat 的干燥菌核，菌核全年均可采收，为              批号  产地       收集时间      批号 产地          收集时间
          硬木质，不易腐烂       [1―3] 。桦褐孔菌主要分布于北半球北                 S1  东北       2021年1月27日  S12  吉林辽源市   2021年9月1日
                                                              S2  黑龙江伊春市   2021年3月25日  S13  东北      2021年9月1日
          纬 40°～50°地区，如俄罗斯的西伯利亚和远东地区，日
                                                              S3  黑龙江伊春市   2021年3月25日  S14  俄罗斯     2021年9月1日
          本的北海道及芬兰、波兰等地；在我国，主要分布于黑龙                           S4  吉林白山市抚松县  2021年3月31日  S15  东北     2021年9月1日
                                        [4]
          江省小兴安岭和吉林省长白山等地 。现代研究表明，                            S5  吉林白山市抚松县  2021年3月31日  S16  俄罗斯    2021年9月6日
                                                              S6  吉林长白山    2021年4月20日  S17  吉林长白山   2021年9月6日
          桦褐孔菌化学成分主要包含多糖类、多酚类、三萜类、甾
                                                              S7  吉林桦甸市    2021年6月7日  S18  朝鲜       2021年9月6日
          醇类和叶酸衍生物类等，具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、                           S8  东北       2021年8月26日  S19  吉林延边朝鲜族自治州  2021年10月14日
          抗氧化、抗病毒等多种药理作用             [5―6] 。                  S9  俄罗斯      2021年8月26日  S20  吉林延边朝鲜族自治州  2021年10月14日
              桦褐孔菌是一种新来源的真菌类药材，在历代医药                          S10  吉林      2021年9月1日  S21  黑龙江牡丹江市  2021年10月27日
                                                              S11  黑龙江     2021年9月1日  S22  黑龙江牡丹江市  2021年10月27日
          典籍中均无记载，但在地方标准《山东省中药材标准》
                                                             成质量浓度为 0.5 mg/mL 的对照品溶液。按照 2020 年
         （2012 版）和《湖北省中药材质量标准》（2018 版）中收
          载 [1―2] 。目前，国内外对桦褐孔菌的研究主要集中在化                      版《中国药典》（四部）通则0502薄层色谱法，吸取上述供
                                                             试品溶液10 µL、对照品溶液5 µL，分别点于同一硅胶G
          学成分和药理作用方面，缺乏对桦褐孔菌药材质量控制
                                                             薄层板上，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇（体积比为
          的全面研究。《山东省中药材标准》（2012 版）仅从性状、
                                                             10∶4∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷 5% 磷钼酸乙
          显微鉴别、浸出物等方面对桦褐孔菌药材质量进行控
                                                             醇溶液，在105 ℃条件下加热至斑点显色清晰。结果显
          制，未规定指标性成分；《湖北省中药材质量标准》（2018
                                                             示，供试品溶液色谱在与对照品溶液色谱相应位置上显
          版）含量测定项下仅以栓菌酸为质量控制的指标，较为
                                                             相同颜色的斑点。结果见图1。
          单一，难以全面有效地反映桦褐孔菌药材的质量。故本
          研究建立桦褐孔菌药材中三萜类成分栓菌酸、桦褐孔菌
          醇的薄层色谱鉴别方法和桦褐孔菌药材的高效液相色
          谱（HPLC）指纹图谱，并应用化学模式识别分析（聚类分
          析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析）评价该
          药材的质量，以期为其质量控制提供参考。
          1 材料
          1.1 主要仪器
              本研究所用主要仪器有 Alliance e2695 型高效液相
          色谱仪、2998 型二极管阵列检测器（美国 Waters 公司），
          ES225SM-DR型电子天平（瑞士Precisa公司），UPT-11-10T               1～6：S1～S6样品；7：栓菌酸对照品；8～19：S7～S18样品；20：栓
          型超纯水机（深圳优普特技术有限公司），KQ-500VDE                       菌酸对照品；21～24：S19～S22样品
          型双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。                               图1 桦褐孔菌药材中栓菌酸的薄层色谱图
          1.2 主要药品与试剂                                        2.1.2 桦褐孔菌醇的薄层色谱鉴别 按照“2.1.1”项下
              栓菌酸对照品由本实验室自制，纯度为93.9%；桦褐                      方法制备供试品溶液。取桦褐孔菌醇对照品，加甲醇制
          孔菌醇、羊毛甾醇对照品均购自上海源叶生物科技有限                           成质量浓度为 0.5 mg/mL 的对照品溶液，作为对照品溶
          公 司（批 号 分 别 为 B50360、B27054，纯 度 均 不 低 于            液。按照2020年版《中国药典》（四部）通则0502薄层色
          95%）；麦角甾醇对照品购自中国食品药品检定研究院                          谱法，吸取上述供试品溶液 10 µL、对照品溶液 5 µL，分
         （批号111845-202105，纯度≥96.6%）。本研究所用桦褐                  别点于同一硅胶 G 薄层板上，以二氯甲烷-甲苯-乙酸乙
          孔菌药材（S1～S18为商品药材，购自湖北辰美中药有限                        酯-甲醇（体积比为10∶4∶0.3∶0.3）为展开剂，展开，取出，
          公司、保和堂制药有限公司、广州康和药业有限公司；                           晾干，喷5%磷钼酸乙醇溶液，在105 ℃条件下加热至斑
          S19～S22为笔者亲自采摘后晾干得到）经湖北省中医院                        点显色清晰。结果显示，供试品溶液色谱在与对照品溶
          药事部陈树和主任药师鉴定为锈革孔菌科真菌桦褐孔                            液色谱相应位置上显相同颜色的斑点。结果见图2。
          菌I. obliquus （Fr.） Pilat的干燥菌核，样品信息见表1。             2.2 桦褐孔菌药材的HPLC指纹图谱研究
          2 方法与结果                                            2.2.1 色谱条件 色谱柱为Agilent 5 TC-C18 （250 mm×
          2.1 桦褐孔菌药材的薄层色谱鉴别                                  4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-水（B），梯度洗脱
          2.1.1 栓菌酸的薄层色谱鉴别 取桦褐孔菌药材粉末                        （0～12 min，90%A→95%A；12～15 min，95%A；15～16
         （过四号筛）1 g，加异丙醇20mL，超声（频率45 kHz，功率                   min，95%A→100%A；16～39 min，100%A；39～40 min，
          400 W）处理 20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 3 mL                 100%A→90%A）；流速为 1.0 mL/min；柱温为 30 ℃；检
          使溶解，作为供试品溶液。取栓菌酸对照品，加甲醇制                           测波长为203 nm；进样量为20 µL。


          中国药房  2023年第34卷第1期                                                  China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 1    · 53 ·
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