Page 44 - 《中国药房》2023年1期

果显示5（獐牙菜苦苷）、4、7（芒果苷）、16、14、15号峰的 3.2 供试品溶液提取条件的考察
VIP贡献值分别为1.751 51、1.460 31、1.305 48、1.254 06、 本课题组分别对供试品溶液提取方法（超声、回
1.227 37、1.161 37，表明这6个共有成分可能是影响该药 流）、提取溶剂（水，30%、50%、70%、90% 的甲醇或乙
材质量差异的主要标志性成分。 醇）、料液比[1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70
Ⅰ类 （g/mL）]和提取时间（15、25、35、45、55 min）进行了考
4 Ⅱ类 察，结果显示，在料液比为1∶30（g/mL）、70%甲醇超声提
3
2 1 取 15 min 的条件下，供试品溶液指纹图谱的峰容量大，
1.230 46＊t[2] －1 0 且主要色谱峰的灵敏度和分离度均较好，故选择该提取
条件制备供试品溶液。
－2
－3 3.3 结果分析
－4 本研究建立了 52 批红花龙胆药材样品的 UPLC 指
－5
－6 －4 －2 0 2 4 6 8 10 纹图谱，标定出17个共有峰，并指认了其中6个共有峰，
1.006 76＊t[1] 初步揭示了红花龙胆药材中化学成分的整体特征。17
图5 52批红花龙胆药材样品的OPLS-DA得分图
个共有峰相对峰面积的 RSD 在 20.18%～95.36% 之间，
各批次样品分别以7号峰（芒果苷峰）为参照峰计算 说明不同批次药材样品中共有成分的含量差异较大。
6个质量差异标志性成分的相对峰面积，结果52批药材 芒果苷含量测定结果显示，52批药材样品中仅S4（产自
样品中 6 个标志性成分的相对峰面积之和为 1.140～ 贵州省贵阳市观山湖区）的芒果苷含量（18.2 mg/g）不符
1.371，其堆积柱形图如图 6 所示，其中 S20、S41、S47 批 合 2020 年版《中国药典》规定（芒果苷含量不得少于
次的红花龙胆药材质量上乘，S1、S14、S21、S26、S34、S39 2.0%），表明本研究所采集的红花龙胆药材尤其是贵州
批次的药材质量相对较差，其余批次药材质量中等。 境内的野生红花龙胆药材几乎均符合药用标准，这可为
3 讨论 相关企业采购红花龙胆野生药材以及红花龙胆野生变

3.1 色谱条件的优化 家种研究的引种驯化和良种选育提供理论依据。通过
预实验中，本课题组考察了不同检测波长（242、 相似度评价、聚类分析、PCA和OPLS-DA对52批红花龙
245、252、270 nm）、流动相系统（甲醇-0.1%甲酸、乙腈-0.1% 胆药材样品的指纹图谱进行综合分析，可得不同产地的
甲 酸）、色 谱 柱（ZORBAX Eclipse Plus C18、ACQUITY 药材样品具有一定的相似性，同一产地的药材样品亦具
BEH C18 Column 130Å、Syncronls C18 ）、柱温（25、28、30、 有一定的差异性；进一步筛选出6个影响红花龙胆药材
40 ℃）、流速（0.25、0.28、0.30、0.35 mL/min）对色谱图的 质量差异的标志性成分，分别为獐牙菜苦苷、芒果苷及
影响，综合各条件下指纹图谱的色谱峰信息、基线、峰 4、14、15、16号色谱峰所代表的化学成分，其中獐牙菜苦
形、峰数和分离效果等，最终确定文中色谱条件。 苷属于环烯醚萜苷类化合物，芒果苷属于黄酮类化合

1.4

1.2
16号峰
15号峰
1.0 14号峰
7号峰
5号峰
4号峰
0.8
相对峰面积
0.6

0.4

0.2

0
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 S21 S22 S23 S24 S25 S26 S27 S28 S29 S30 S31 S32 S33 S34 S35 S36 S37 S38 S39 S40 S41 S42 S43 S44 S45 S46 S47 S48 S49 S50 S51 S52
图6 52批红花龙胆药材样品相对峰面积的堆积柱形图

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