Page 49 - 《中国药房》2023年1期

涤3次，加入辣根过氧化物酶标记的IgG二抗（稀释度为 晰，形状较少改变，死细胞数量较少。结果见图1。
1︰2 000）室温孵育1 h，PBS洗涤3次，暗室中曝光显影、

定影，用Image J软件检测各组蛋白条带灰度值，以目的
蛋白条带与内参蛋白条带的灰度值比值表示目的蛋白 ×100
的表达水平。
2.11 统计学处理
采用 GraphPad 9.0 软件进行数据分析，计量资料满 ×200
足正态分布以x±s表示，多组间比较采用单因素方差分

析 ，进 一 步 两 两 比 较 使 用 LSD-t 检 验 。 检 验 水 准 A.空白组 B.模型组 C.八味沉香散中剂量组
α＝0.05。 图1 各组H9c2细胞形态的显微图
3 结果 3.4 含药血清对氧糖剥夺损伤模型细胞内ROS的影响
3.1 含药血清对氧糖剥夺损伤模型细胞存活率的影响 与空白组[（33.80±2.82）%]比较，模型组细胞内
与 空 白 组（100%）比 较 ，模 型 组 细 胞 存 活 率 ROS含量[（68.63±8.66）%]显著升高；与模型组比较，八
[ （80.85±4.73）%]显著降低（P＜0.01）；与模型组比较，
味沉香散中剂量组细胞内 ROS 含量[（35.40±11.44）%]
八 味 沉 香 散 低 、中 、高 剂 量 组 细 胞 存 活 率 [ 依 次 为
显著降低（P＜0.01）。结果见图2、图3。
（93.08±2.34）%、（106.02±6.22）%、（89.20±8.01）%]均
300
显著升高（P＜0.01，n＝6）。 100
3.2 含药血清对氧糖剥夺损伤模型细胞生化指标的 200
影响 Count 50 Count
100
与空白组比较，模型组细胞上清液中 LDH、CK、
0 0
MDA 水平均显著升高，CAT、GSH-Px、SOD、ComplexⅠ 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
FITC-A FITC-A
水平均显著降低（P＜0.01）；与模型组比较，八味沉香散 A.空白组 B.模型组
低、中、高剂量组细胞上清液中 LDH、CK、MDA 水平均
显著降低（P＜0.01），CAT（低剂量组除外）、GSH-Px（低、
50
高剂量组除外）、SOD、ComplexⅠ（低剂量组除外）水平 Count
均显著升高（P＜0.01）。结果见表1。

表1 各组细胞上清液中生化指标比较（x±s，n＝6） 0 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
FITC-A
LDH/ CK/ MDA/ GSH-Px/ ComplexⅠ/ CAT/ SOD/
组别 C.八味沉香散中剂量组
（U/L） （ng/mL） （nmol/mL） （pg/mL） （pg/mL） （pg/mL） （pg/mL） 图2 各组细胞内ROS流式图
空白组 199.17±10.55 1.19±0.02 10.46±0.40 292.64±14.14 76.23±6.76 243.43±4.58 1 709.57±44.67
a
a
a
a
a
模型组 275.91±5.61 1.66±0.12 a 16.54±0.86 237.28±4.93 61.67±2.96 195.03±3.38 1 065.73±63.53 a
b
b
八味沉香散 213.18±6.42 1.30±0.01 b 14.11±0.62 219.50±18.04 64.92±4.10 195.56±1.31 1 590.07±56.14 b
低剂量组
b
b
八味沉香散 93.26±5.96 1.21±0.02 b 13.51±0.40 297.92±15.38 70.17±5.70 242.12±5.00 1 639.43±41.41 b
b
b
b
中剂量组
八味沉香散 204.66±3.88 1.21±0.03 b 11.81±1.39 254.78±32.19 76.43±6.00 222.59±5.42 1 631.83±67.93 b
b
b
b
b
高剂量组 A.空白组 B.模型组 C.八味沉香散中剂量组
图3 各组细胞内ROS荧光显微图（×40）
a：与空白组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01
3.5 含药血清对氧糖剥夺损伤模型细胞线粒体膜电位
3.3 含药血清对氧糖剥夺损伤模型细胞形态的影响
的影响
显微镜观察结果显示，空白组细胞的细胞壁结构完
整、边缘清晰，死细胞数量较少；模型组细胞的细胞质内 与空白组[（85.02±0.72）%]比较，模型组细胞线粒
颗粒物增多，大多数心肌细胞形状变得短粗，细胞壁破 体膜电位[（74.70±1.43）%]显著降低；与模型组比较，八
损明显、结构不完整，死细胞数量显著增加，损伤加重。 味沉香散中剂量组细胞线粒体膜电位[（87.36±0.59）%]
八味沉香散中剂量组细胞的细胞壁结构完整、边缘清 显著升高（P＜0.01）。结果见图4、图5。
中国药房 2023年第34卷第1期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 1 · 43 ·