Page 42 - 《中国药房》2023年1期

版）》，设置 S1 为参照图谱，时间窗宽度为 0.5 min，以中
30
位数法生成对照图谱，经多点校正、自动匹配后生成 52
20
10 批红花龙胆药材样品的指纹图谱共有模式（图2）。根据
mAU 0 指纹图谱匹配结果共标定出 17 个共有峰。经与混合对
－10 照品溶液图谱（图 1B）比对，供试品溶液色谱图中 1、3、
－20 5、6、7、9号共有峰与混合对照品溶液色谱图中1、3、5、6、
－30 7、9 号色谱峰的保留时间一致且紫外吸收曲线相同，故
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
t/min 确定上述 6 个共有峰分别为马钱苷酸（1 号峰）、新芒果
A. 70%甲醇
苷（3号峰）、獐牙菜苦苷（5号峰）、当药苷（6号峰）、芒果
7
100
苷（7号峰）与异荭草苷（9号峰）。进一步计算得52批药
80
材样品中 17 个共有峰的相对保留时间及相对峰面积的
60
mAU 40 3 5 RSD分别为0.17%～1.30%、20.18%～95.36%，表明52批
20
1
6 9 红花龙胆药材样品指纹图谱中共有峰的相对保留时间
0
差异较小，但化学成分含量存在差异。相似度评价结果
－20
－40 显示，52 批红花龙胆药材样品的相似度在 0.950～0.996
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
t/min 之间，均大于0.9，说明不同产地红花龙胆药材的整体化
B.混合对照品溶液
学成分类似，不同批次间稳定性较好。
7
1 750
1 500 7
17
1 250
4 14
1 000 1 029.02 15
mAU 750 10 11
500 14 15 5 8 16
250 4 8 10 16 17 766.18 2 3 9 12 13
1 2 3 5 6 9 11 12 13
0 1 6 R
－200 S52
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 mAU 503.35
t/min
C.供试品溶液
1：马钱苷酸；3：新芒果苷；5：獐牙菜苦苷；6：当药苷；7：芒果苷；9： 240.51
异荭草苷
图1 专属性考察试验的UPLC图
－22.33 S1
0 7.25 14.49 21.74 28.99 36.24 43.48
2.3.3 重复性试验 取药材样品（S36）粉末约 0.5 g，精 t/min
密称定6份，分别按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，按 图2 52批红花龙胆药材样品UPLC指纹图谱共有模式
“2.2”项下色谱条件进样测定，以7号峰（芒果苷峰）为参 2.4 芒果苷的含量测定
照峰，计算出各共有峰的相对保留时间及相对峰面积的 取芒果苷对照品加 70% 甲醇制成不同浓度梯度的
RSD 分别为 0.04%～0.13%、0.69%～2.80%（n＝6），均小 对照品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面
于3.0%，表明该方法重复性良好。 积，计算得芒果苷的回归方程为 Y＝183.9X+17.352（r＝
2.3.4 稳定性试验 取药材样品（S36）粉末约 0.5 g，精 0.999 9），进样量线性范围为525～4 200 µg；精密度试验
密称定，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项 结果显示，芒果苷峰面积的 RSD 为 1.82%（n＝6）；重复
下色谱条件分别于室温放置0、2、4、8、16、24、36、48 h时 性试验结果显示，芒果苷的平均含量为 75.6 mg/g，RSD
进样测定，以7号峰（芒果苷峰）为参照峰，计算出各共有 为1.70%（n＝6）；48 h稳定性试验结果显示，芒果苷峰面
峰 的 相 对 保 留 时 间 及 相 对 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 积的 RSD 为 1.60%（n＝8）；加样回收率试验结果表明，
0.04%～0.17%、0.11%～1.80%（n＝8），表明供试品溶液 芒果苷的平均加样回收率为98.48%，RSD为1.75%（n＝
在室温放置48 h内稳定性良好。 6），均符合2020年版《中国药典》相关规定。样品含量测
2.3.5 相似度评价及共有峰的标定 取 52 批红花龙胆 定结果显示，52批红花龙胆药材样品中芒果苷的含量为
药材样品，分别按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，按 18.2～101.0 mg/g，除S4样品（18.2 mg/g）外，其余批次药
“2.2”项下色谱条件进样测定，采集并记录色谱图。将原 材样品中芒果苷的含量均符合 2020 年版《中国药典》
始图谱导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A 规定 。
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· 36 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 1 中国药房 2023年第34卷第1期