Page 44 - 《中国药房》2022年24期

3.4 小鼠海马组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平 近年有报道指出，AD 的发生与肠道菌群的改变有
与 APP/PS1 阴性正常组比较，APP/PS1 阳性模型组 关，肠道微生物与中枢神经系统相互作用的假说也成为
[8]
小鼠海马组织中Bcl-2蛋白显著下调，Bax蛋白显著上调 AD 的可能发病机制之一 。肠脑轴（肠道微生物群-脑
（P＜0.05）；与 APP/PS1 阳性模型组比较，地黄饮子中、 轴）是连接消化道和中枢神经系统的重要生化信号，可
高剂量组和西药组小鼠海马组织中 Bcl-2 蛋白显著上 影响从大脑发育到神经系统疾病进展的所有相关事
[8]
调，Bax 蛋白显著下调（P＜0.05），而地黄饮子低剂量组 件 。肠脑轴在AD的发病机制中起关键作用，肠道微生
上述蛋白表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05），详 物群可通过神经、内分泌和免疫途径与中枢神经系统沟
[12]
见表2。免疫组化染色结果显示，Bcl-2和Bax蛋白阳性 通，从而影响大脑的功能和行为 ；同时，肠道菌群失调
表达均呈棕黄色，主要位于胞浆与胞膜，详见图6、图7。 可能导致脑内神经因子的异常表达，从而加重脑内神经
[13]
表2 各组小鼠 Bcl-2 和 Bax 平均光密度值比较（x±s， 细胞的损伤（如导致海马神经细胞凋亡） 。
n＝6） 本研究首先通过 Morris 水迷宫采集小鼠行为学数
组别 Bcl-2 Bax 据，并用以评估小鼠的空间学习、记忆认知水平。结果
APP/PS1阴性正常组 0.133 7±0.053 5 0.221 6±0.030 9 显示，APP/PS1 阳性模型组小鼠的逃避潜伏期显著延
APP/PS1阳性模型组 0.111 7±0.049 1 a 0.283 2±0.053 4 a 长，穿过原平台次数显著减少，表明 APP/PS1 阳性模型
地黄饮子低剂量组 0.128 5±0.040 6 0.271 4±0.097 9 小鼠的学习记忆能力下降；经地黄饮子干预后，小鼠的
地黄饮子中剂量组 0.235 4±0.075 8 b 0.183 5±0.035 7 b
地黄饮子高剂量组 0.260 2±0.057 9 b 0.169 9±0.040 4 b 逃避潜伏期显著缩短，穿过原平台次数显著增加，以中、
西药组 0.224 2±0.053 6 b 0.208 6±0.025 9 b 高剂量组效果为优，提示地黄饮子可改善APP/PS1阳性
a：与APP/PS1阴性正常组比较，P＜0.05；b：与APP/PS1阳性模型组 模型小鼠的学习记忆能力。
比较：P＜0.05
本研究的肠道菌群检测结果显示，地黄饮子更倾向
3.5 小鼠海马组织中BDNF的表达水平 于提升菌群的多样性，尤其是厚壁菌门的菌种；其优势
与 APP/PS1 阴性正常组比较，APP/PS1 阳性模型组 菌种的比例更接近于 APP/PS1 阴性正常组；LEfSe 分析
小鼠海马组织BDNF的表达水平显著降低（P＜0.05）；与 结果显示，地黄饮子中剂量组的优势菌种是梭菌纲
APP/PS1 阳性模型组比较，地黄饮子中、高剂量组和西 o_Clostridia_vadinBB60_group，疣微菌 g_UCG_005，也
药组小鼠BDNF的表达水平均显著升高（P＜0.05），地黄 进一步证实了地黄饮子有助于提高厚壁菌门、芽孢杆菌
饮子低剂量组该蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞ 属、乳杆菌属、毛螺旋菌属等菌种的多样性。有研究指
0.05），详见图8。 出，上述微生物可有助于改善 AD 患者的认知症状 。
[14]
4 讨论 例如，上述微生物可发酵膳食纤维，代谢生成以乙酸盐、
AD的发病机制尚不十分清楚，主要涉及以下理论： 丙酸盐、丁酸盐为主的短链脂肪酸（short-chain fatty
胆碱能理论、tau 蛋白假说、神经血管理论、氧化应激理 acid，SCFA）。丁酸盐具有神经保护作用和血脑屏障恢
[10]
论和 β 淀粉样蛋白瀑布理论等 。目前，临床尚无有效 复功能，可显著改善学习和记忆能力，具有明显的改善
治疗AD的方法，其中西医所用药物（如多奈哌齐和尼莫 认知和缓解抑郁的作用 ；同时，丁酸盐可防治肠毒素
[15]
地平）通常与神经递质和脑血管扩张有关，上述药物的 进入大脑，具有一定的抗炎作用 。该 SCFA 已被证实
[16]
临床疗效有限，且有引发心血管反应（心动过缓、晕厥）、 与疣微菌 g_UCG_005 有关，而疣微菌门微生物可通过
[11]
头痛、头晕、失眠和消化道反应等不良反应的可能 。 参与调节免疫反应和维持体内代谢平衡来影响宿主的

A. APP/PS1阴性正常组 B. APP/PS1阳性模型组 C.地黄饮子低剂量组 D.地黄饮子中剂量组 E.地黄饮子高剂量组 F.西药组
→：Bcl-2蛋白阳性表达细胞
图6 各组小鼠海马区Bcl-2蛋白表达

A. APP/PS1阴性正常组 B. APP/PS1阳性模型组 C.地黄饮子低剂量组 D.地黄饮子中剂量组 E.地黄饮子高剂量组 F.西药组
→：Bax蛋白阳性表达细胞
图7 各组小鼠海马区Bax蛋白表达

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