Page 74 - 《中国药房》2022年23期
P. 74
共载阿霉素与小干扰RNA的脂质介孔硅纳米粒的制备表征及抗
多药耐药肿瘤细胞研究
Δ
1， 3
张梦玮 1， 2 ＊ ，杨硕晔 1， 2 # ，杨亚南 ，王振威 ，屈凌波 （1.河南工业大学生物工程学院，郑州 450001；2.郑州
1， 2
1， 2
市生物医药功能分子重点实验室，郑州 450001；3.郑州大学化学与分子工程学院，郑州 450001）
中图分类号 R944.9；R979.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）23-2880-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.23.12
摘 要 目的 制备共载阿霉素（DOX）与小干扰RNA（siRNA）的脂质介孔硅纳米粒（CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA），并对其进
行表征及抗多药耐药肿瘤细胞研究。方法 先以介孔硅纳米粒（MSNs）为基础制备 MSNs-SS-NH2@DOX，并以阳离子脂质体
（CLs）对其包覆制得 CLMSNs-SS-NH2@DOX，进一步负载 siRNA 即得 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA。测定该制剂粒径及 Zeta
电位，观察其微观形态并进行差示扫描量热分析、X射线衍射分析、红外光谱分析、物理吸附分析；测定该制剂在不同pH条件下
（pH5.0、pH7.4）及不同谷胱甘肽浓度下（0、2、5、10 mmol/L）DOX的体外释放度；考察该制剂对耐DOX型乳腺癌细胞MCF-7/ADR
摄取、迁移、凋亡、周期及P-糖蛋白（P-gp）表达的影响。结果 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA结构清晰，表面脂膜层明显，粒径为
（197.63±3.75）nm，Zeta 电位为（20.64±0.98）mV，理化性质良好。体外释放结果显示，CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 具有良好
的pH/还原双重响应释药特性。细胞实验结果显示，经CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA干预后，MCF-7/ADR细胞的药物摄取显著
增强，迁移率和P-gp表达水平均显著降低，总凋亡比例和G0/G1期所占比例均显著升高（P＜0.05）。结论 本研究成功制备同时负
载 DOX 和 siRNA 的 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA；该制剂理化性质良好，具有 pH/还原双重响应释药特性，且可通过下调 P-gp
表达逆转 MCF-7/ADR细胞多药耐药。
关键词 介孔硅；小干扰RNA；阿霉素；抗肿瘤；多药耐药
Preparation and characterization of doxorubicin and siRNA co-loaded CLMSNs and study on anti-
multidrug-resistant tumor cells
ZHANG Mengwei ，YANG Shuoye ，YANG Yanan ，WANG Zhenwei ，QU Lingbo （1. College of
1， 2
1， 2
1， 2
1， 3
1， 2
Biological Engineering，Henan University of Technology，Zhengzhou 450001，China；2. Zhengzhou Key Lab of
Biomedical Functional Molecules，Zhengzhou 450001，China；3. College of Chemistry and Molecular Engineering，
Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China）
ABSTRACT OBJECTIVE To prepare lipid-coated mesoporous silica nanoparticles （CLMSNs） co-loaded with doxorubicin
（DOX） and siRNA （CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA），and to characterize it and study anti-multidrug-resistant tumor cells.
METHODS MSNs-SS-NH2@DOX was prepared on the basis of mesoporous silica （MSNs），covered with cationic liposomes （CLs）
to synthesize CLMSNs-SS-NH2@DOX，and then obtain CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA by co-loading with siRNA. The particle
size and Zeta potential of the preparation were determined，and its micromorphology was observed； differential scanning
calorimetry，X-ray diffraction，infrared spectroscopy and physical adsorption analysis were conducted. The in vitro release of DOX
from the preparation was determined under different pH conditions （pH5.0，pH7.4） and different glutathione concentrations （0，2，5，
10 mmol/L）. The effects of this preparation on the uptake，migration，apoptosis，cycle and P-glycoprotein （P-gp） expression of MCF-7/
ADR in DOX-resistant breast cancer cells were investigated. RESULTS CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA had a clear core-shell
structure，obvious lipid membrane layer，particle size of （197.63±3.75） nm，Zeta potential of （20.64±0.98） mV，and with good
physical and chemical properties. In vitro release results showed that CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA possessed good pH/reduction
double-response. The results of cell experiment showed that after intervened with CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA，the fluorescence
intensity of MCF-7/ADR cells was significantly enhanced，the migration rate and P-gp expression level were significantly reduced，
while total proportion of apoptosis and that of G0/G1 phase were significantly increased （P＜0.05）. CONCLUSIONS In this study，
DOX and siRNA co-loaded CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA is
prepared successfully， which has good physical and chemical
Δ 基金项目 河 南 省 高 等 学 校 青 年 骨 干 教 师 培 养 计 划（No.
properties， pH/reduction double-response properties. It can
2020GGJS090）；河南工业大学青年骨干教师培育计划（No.21420075）
reverse the multidrug resistance of MCF-7/ADR cells by down-
＊第一作者 硕士研究生。研究方向：新型抗肿瘤复合纳米药物
递送系统 。E-mail：zmw15649858235@163.com regulation of P-gp expression.
# 通信作者 副教授，硕士生导师。研究方向：功能性纳米材料与 KEYWORDS mesoporous silica； siRNA； doxorubicin； anti-
药物递送系统。E-mail：yangshuoyecpu@163.com tumor； multidrug resistance
· 2880 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 中国药房 2022年第33卷第23期
