Page 40 - 《中国药房》2022年23期

表2 各组大鼠血清中氧化应激指标水平的检测结果 积；而再灌注期间脂肪酸氧化代谢增多，但脂肪酸的低
（x±s，n＝6） 效供能可导致细胞氧耗增多，同时糖有氧酵解被抑制而
组别 MDA/（nmol/mL） SOD/（U/mL） GSH-Px/（U/mL） 导致糖代谢的酸性中间产物进一步增加，造成细胞内酸
假手术组 7.36±1.50 387.11±20.85 394.52±35.23 中毒 。本研究结果显示，清热活血汤含药血清中涉及
[17]
模型组 52.66±5.32 a 211.66±23.14 a 104.88±33.43 a 氨基酸合成通路的异亮氨酸、左旋精氨酸、瓜氨酸等代
清热活血汤低剂量组 33.65±3.99 b 246.87±17.91 187.14±27.30 b
清热活血汤中剂量组 15.14±3.15 bc 271.33±21.79 b 271.43±27.70 bc 谢物，以及涉及柠檬酸循环、糖酵解/糖异生途径、磷酸戊
清热活血汤高剂量组 10.09±2.33 bc 338.11±20.52 bcd 335.71±22.23 bcd 糖途径的柠檬酸、D-核糖、D-葡萄糖醛酸、β-D-葡萄糖等
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与清热 代谢物均显著上调；其中，异亮氨酸、精氨酸又为生糖氨
活血汤低剂量组比较，P＜0.05；d：与清热活血汤中剂量组比较，P＜ 基酸，D-核糖是机体重要的五碳糖，可加快心肌细胞
0.05
ATP合成。另外，清热活血汤含药血清中3-磷酸-d-甘油
4 讨论 磷酸酯、二十二碳六烯酸、亚油酸、磷脂酰胆碱等脂质代
心肌梗死面积是AMI患者预后的决定性因素，再灌 谢物均显著下调，而脂肪酸β-氧化必需的辅助因子——
注治疗可诱发心肌缺血期间并不存在的损伤或使已有 左旋肉碱释放增加。这提示，清热活血汤可调节机体能
损伤加重，其所造成的心肌损伤甚至可达50%心肌梗死 量代谢途径，减少脂质代谢，促进非必需氨基酸合成、糖
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面积 。因此，抑制MIRI，减少心肌梗死面积，从而减少 异生及糖酵解，进而改善MIRI。
介入术后心力衰竭及心室重构的发生，是心肌保护治疗 4.2.2 调节炎症损伤、氧化应激及自噬通路 再灌注期
策略的重要方向。清热活血汤方中黄芩清热燥湿、泻火 间细胞能量供应仍不足，Na -K -ATP 酶活性下降，导致
+
+
解毒，毛冬青清热解毒、活血通脉，君臣配伍为主药；丹 大量Ca 内流引发钙超载 [18―19] 。钙超载可激活氧自由基
2+
参、赤芍、川芎、红花力佐活血化瘀之功，降香理气助使 底物，从而加速活性氧（reactive oxygen species，ROS）形
活血止痛；几者并用共奏清热解毒、活血化瘀之效。基 成，ROS可对磷脂膜、蛋白和DNA功能结构造成直接破
于此，本课题组探讨了清热活血汤改善模型大鼠 MIRI 坏 [20―21] ，并激活核因子 κB 信号通路活性，促进炎症因子
的药效成分及相关作用机制。 及炎症细胞的释放，进而加重心肌损伤；同时可引发细
4.1 清热活血汤对 MIRI 模型大鼠的影响及药效成分 胞内质网应激及线粒体损伤，诱导细胞凋亡 。本研究
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分析 结果显示，清热活血汤含药血清中涉及磷酸戊糖途径的
本研究结果显示，模型组大鼠心肌组织损伤严重， D-核糖、β-D-葡萄糖代谢物及谷胱甘肽水平显著上调。
而清热活血汤各剂量组大鼠心肌组织损伤减轻，细胞凋 磷酸戊糖途径的激活有助于维持谷胱甘肽水平，而谷胱
亡率显著降低。应用UPLC-MS确认了清热活血汤含药 甘肽是体内 ROS 的强效清除剂，有助于拮抗 MIRI 所致
血清中 20 种主要药效成分，包括黄芩苷、琥珀酸、黄芩 的心肌组织氧化应激损伤 。这提示，清热活血汤可通
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素、隐丹参酮、异阿魏酸、原儿茶醛、丹酚酸 G、3，4-二羟 过抗氧化作用改善MIRI。
基肉桂酸、异红花素等。相关研究发现，黄芩苷可通过 花生四烯酸次级产物血栓烷素A2和白细胞三烯具
抑制 Janus 激酶/转录激活因子信号通路促进 MIRI 模型 有促血小板聚集及促炎症作用，其羟化酶代谢产物 20-
大鼠心肌巨噬细胞 M2 型极化，并通过抗炎、抗氧化、抑 羟基二十碳四烯酸具有收缩血管及诱导ROS生成、血管
制内质网应激等作用改善MIRI模型大鼠的心肌损伤及 内皮紊乱及心肌细胞凋亡等作用 ；溶血磷脂酰胆碱具
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血管内皮功能 [10―12] 。原儿茶醛可通过调节核因子 κB 信 有促进血管平滑肌收缩、血小板聚集及诱导心肌动作电
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号通路抑制炎症反应，从而改善 MIRI 模型大鼠的心肌 位紊乱和心肌细胞钙循环障碍的作用 。本研究结果
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损伤 。隐丹参酮可通过上调心肌细胞中内皮型一氧 显示，清热活血汤含药血清可下调涉及TRP通道炎症介
化氮合酶的磷酸化水平，发挥保护心肌组织的作用 。 质、铁死亡及血管平滑肌收缩代谢途径的溶血磷脂酰胆
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3，4-二羟基肉桂酸可通过诱导MIRI模型大鼠心肌组织 碱、花生四烯酸、棕榈酰肉碱水平，上调谷胱甘肽水平。
胞外信号调节激酶磷酸化，降低 B 细胞淋巴瘤 2 相关 X 上述代谢途径均与MIRI预后密切相关 [26―27] 。这提示，清
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蛋白表达，抑制大鼠心肌细胞凋亡 。这提示，上述成 热活血汤有助于改善 MIRI 所致的心肌组织炎症浸润、
分可能是清热活血汤改善MIRI模型大鼠心肌损伤的药 微循环障碍及氧化应激相关性损伤。此外，清热活血汤
效成分基础。 含药血清可上调涉及 mTOR 信号通路的左旋精氨酸。
4.2 清热活血汤改善MIRI的差异代谢物及代谢通路分析 mTOR 是调控细胞自噬的关键靶点 ，这提示清热活血
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4.2.1 改善心肌能量代谢 MIRI 造成的缺血缺氧心肌 汤改善MIRI的作用可能与自噬机制有关。
于再灌注期间进一步损伤、凋亡或坏死，其病理生理机 MDA 是脂类过氧化的最终代谢产物，是反映组织
制涉及能量代谢障碍、氧化应激损伤、钙超载、内质网应 氧化损伤的客观指标，而SOD、GSH-Px作为抗氧化酶可
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激、细胞坏死与凋亡等多种机制 。其中，心肌能量代 有效清除超氧阴离子及脂类过氧化物自由基以维持细
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谢障碍是始发因素，缺血期间心肌细胞脂肪酸有氧代谢 胞稳态 。基于此，通过对该类指标的检测可对上述氧
受到抑制，无氧糖酵解供能增加，导致乳酸等代谢物堆 化应激相关代谢物及代谢途径进行表型验证。本研究

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