Page 126 - 《中国药房》2022年23期
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症 。现代医学探究厌食症机理主要从消化液、胃黏膜 液(批号19041201)、伊红染色液(批号19040921)均购自
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结构、胃肠道动力、微量元素、肠道菌群、体内激素等方 无锡傲锐东源生物科技有限公司;NaOH(批号1806021)
面着手,通常以使用助胃动力药、助消化剂、补锌剂、调 购 自 西 陇 科 学 股 份 有 限 公 司 ;酚 酞 指 示 剂(批 号
节肠道微生态制剂为主,效果不尽如人意,且易复发,不 L2109165)、二甲基黄指示剂(批号 L1918056)均购自阿
能满足临床需求。中医多采用辨证论治,认为厌食症主 拉丁试剂(上海)有限公司;特制饲料[合格证号 SCXK
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要与脾、胃、肝三脏功能失常有关,疾病多从虚实转化 , (京)2019-0010)]购自斯贝福(北京)生物技术有限公司;
治疗多采用调和肝脾、运以脾胃、恢复脾胃功能,从根本 其余试剂均为实验室常用规格,水为双蒸水。
上治疗小儿厌食症。中医治疗小儿厌食症年代长久,治 1.3 实验动物
疗药物安全有效,家长和患儿易于接受。 60只SD幼龄大鼠(3周龄),雌雄各半,体质量(50±
化橘红为芸香科植物化州柚Citrus grandis‘Tomen‐ 10) g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,动物
tosa’或柚 Citrus grandis(L.)Osbeck 的未成熟或近成熟 生产许可证号为 SCXK(京)2021-0011。所有幼龄大鼠
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的干燥外层果皮 。近年来,关于化橘红的研究包括化 饲养于中国医学科学院药用植物研究所SPF级动物房,
橘红醇提物的止咳化痰能力优于水提物 ,化橘红中黄 动物使用许可证号为 SYXK(京)2017-0020。动物实验
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酮类成分的抗炎、抗氧化作用 ,柚皮苷的抗氧化应激作 屏障主要环境指标:室温(23±1) ℃,日温差≤4 ℃,相
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用 等,未见报道其消食作用的研究。但化橘红的健胃 对湿度50%~60%。饲养人员经过培训合格后对动物进
消食作用在古籍中多次被记载:宋代《圣济经》记载“陈 行饲养管理,在整个饲养过程和相关处置过程中符合实
橘之性温辛,用其皮可以消痰去涎也。兼其瓤,适以生 验动物福利要求并经过动物福利委员会(IACUC)的审
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痰腲脾也”,认为不去白的化橘红用于和中补胃 ;《太平 查批准,批件号为SLXD-20211027013。
惠民和剂局方》记载“枳壳、橘红辈,自能宽中快膈,不致 2 方法
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伤脾” ;《本草纲目》也有记载“留白则补脾胃,去白则 2.1 动物造模
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理肺气” ;清朝《本草纲目拾遗》记载“橘红治痰症,消 采用病因模拟法建立幼龄大鼠厌食症模型 。随
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油腻、消食、醒酒、宽中、解蟹毒” 。因此,本研究采用 机选取10只幼龄大鼠作为对照组给予常规饲料,其余幼
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厌食症模型幼龄大鼠为研究对象,探讨化橘红提取物对 龄大鼠给予特制饲料(鱼肉松、奶粉、玉米粉、黄豆粉、白
其治疗的药效学作用,以期为化橘红新产品研发提供科 糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉按 1∶1∶1∶2∶1∶1.8∶2 的比例混合均
学依据。 匀,制成饼状,烘干,4 ℃冷藏)。根据文献[14],当造模
1 材料 幼龄大鼠的摄食量平均下降 20%~30%、体质量低于对
1.1 主要仪器 照组的10%~15%时表明造模成功。
本研究所用主要仪器有MX5型百万分之一电子分 2.2 动物分组及给药
析天平(瑞士 Mettler Toledo 公司),Synergy H.M 型酶标 将造模成功的幼龄大鼠随机分成 5 组,每组 10 只,
仪(美国 BioTek 公司),数字玻片图像扫描及分析系统、 分别为模型组、健胃消食片组(0.65 g/kg)和化橘红提取
EG1150 型石蜡包埋机、RM2245 型石蜡切片机(德国 物低剂量(0.5 g/kg)、中剂量(1.0 g/kg)、高剂量(2.0 g/kg)
Leica 公司),Heraeus Multifuge X1R 型台式高速冷冻离 组,另外给予常规饲料的 10 只大鼠作为对照组。根据
心机(美国Thermo Fisher Scientific公司)。 2020 年版《中国药典》(一部)规定,以及《药理实验方法
1.2 主要药品与试剂 学》中人和动物间体表面积折算公式得到相应的等效剂
化橘红提取物(批号 20200101A,100 g 提取物/瓶, 量,成人(60 kg)化橘红用量为 3~6 g,换算成大鼠给药
每 1 g 提取物含化橘红 0.946 g)由广州市香雪制药股份 剂量为0.3~0.6 g/kg,取中间剂量0.5 g/kg为低剂量,1.0
有限公司提供;江中健胃消食片(阳性对照药,批号 g/kg为中剂量,2.0 g/kg为高剂量;健胃消食片每天用量
21101012)购自江中药业股份有限公司;胃蛋白酶活性 为 6 g,换算成大鼠给药剂量为 0.65 g/kg。药物溶剂为
检测试剂盒(批号 BC2325)、胃泌素(gastrin,GAS)试剂 0.5%羧甲基纤维素钠,给药组灌胃相应药液;对照组和模
盒(批号SEKR-0104)、胃动素(motilin,MTL)试剂盒(批 型组灌胃0.5%羧甲基纤维素。每天1次,连续灌胃14 d。
号 SEKR-0105)、抑胃肽(gastric inhibitory peptide,GIP) 2.3 幼龄大鼠体质量及摄食量检测
试剂盒(批号 SEKR-0102)均购自北京索莱宝科技有限 造模结束后,计算幼龄大鼠第 7、14 天的摄食量,每
公司;羧甲基纤维素钠(批号 DCBC0696V)购自日本 周称取大鼠体质量,记录数据。大鼠平均摄食量=(总
Sigma-Aldrich 公司;PBS(批号 ZLI-9062)、苏木素染色 的投食量-次日饲料剩余量)/动物总数。
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