Page 126 - 《中国药房》2022年23期
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症 。现代医学探究厌食症机理主要从消化液、胃黏膜                            液(批号19041201)、伊红染色液(批号19040921)均购自
            [3]
          结构、胃肠道动力、微量元素、肠道菌群、体内激素等方                           无锡傲锐东源生物科技有限公司;NaOH(批号1806021)
          面着手,通常以使用助胃动力药、助消化剂、补锌剂、调                           购 自 西 陇 科 学 股 份 有 限 公 司 ;酚 酞 指 示 剂(批 号
          节肠道微生态制剂为主,效果不尽如人意,且易复发,不                           L2109165)、二甲基黄指示剂(批号 L1918056)均购自阿
          能满足临床需求。中医多采用辨证论治,认为厌食症主                            拉丁试剂(上海)有限公司;特制饲料[合格证号 SCXK
                                                        [4]
          要与脾、胃、肝三脏功能失常有关,疾病多从虚实转化 ,                         (京)2019-0010)]购自斯贝福(北京)生物技术有限公司;
          治疗多采用调和肝脾、运以脾胃、恢复脾胃功能,从根本                           其余试剂均为实验室常用规格,水为双蒸水。
          上治疗小儿厌食症。中医治疗小儿厌食症年代长久,治                            1.3 实验动物
          疗药物安全有效,家长和患儿易于接受。                                      60只SD幼龄大鼠(3周龄),雌雄各半,体质量(50±
              化橘红为芸香科植物化州柚Citrus grandis‘Tomen‐               10) g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,动物
          tosa’或柚 Citrus grandis(L.)Osbeck 的未成熟或近成熟           生产许可证号为 SCXK(京)2021-0011。所有幼龄大鼠
                        [5]
          的干燥外层果皮 。近年来,关于化橘红的研究包括化                            饲养于中国医学科学院药用植物研究所SPF级动物房,
          橘红醇提物的止咳化痰能力优于水提物 ,化橘红中黄                            动物使用许可证号为 SYXK(京)2017-0020。动物实验
                                             [6]
                                   [7]
          酮类成分的抗炎、抗氧化作用 ,柚皮苷的抗氧化应激作                           屏障主要环境指标:室温(23±1) ℃,日温差≤4 ℃,相
            [8]
          用 等,未见报道其消食作用的研究。但化橘红的健胃                            对湿度50%~60%。饲养人员经过培训合格后对动物进
          消食作用在古籍中多次被记载:宋代《圣济经》记载“陈                           行饲养管理,在整个饲养过程和相关处置过程中符合实
          橘之性温辛,用其皮可以消痰去涎也。兼其瓤,适以生                            验动物福利要求并经过动物福利委员会(IACUC)的审
                                                  [9]
          痰腲脾也”,认为不去白的化橘红用于和中补胃 ;《太平                          查批准,批件号为SLXD-20211027013。
          惠民和剂局方》记载“枳壳、橘红辈,自能宽中快膈,不致                          2 方法
               [10]
          伤脾” ;《本草纲目》也有记载“留白则补脾胃,去白则                          2.1 动物造模
                 [11]
          理肺气” ;清朝《本草纲目拾遗》记载“橘红治痰症,消                              采用病因模拟法建立幼龄大鼠厌食症模型 。随
                                                                                                        [13]
          油腻、消食、醒酒、宽中、解蟹毒” 。因此,本研究采用                          机选取10只幼龄大鼠作为对照组给予常规饲料,其余幼
                                      [12]
          厌食症模型幼龄大鼠为研究对象,探讨化橘红提取物对                            龄大鼠给予特制饲料(鱼肉松、奶粉、玉米粉、黄豆粉、白
          其治疗的药效学作用,以期为化橘红新产品研发提供科                            糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉按 1∶1∶1∶2∶1∶1.8∶2 的比例混合均

          学依据。                                                匀,制成饼状,烘干,4 ℃冷藏)。根据文献[14],当造模
          1 材料                                                幼龄大鼠的摄食量平均下降 20%~30%、体质量低于对

          1.1 主要仪器                                            照组的10%~15%时表明造模成功。
              本研究所用主要仪器有MX5型百万分之一电子分                          2.2 动物分组及给药
          析天平(瑞士 Mettler Toledo 公司),Synergy H.M 型酶标               将造模成功的幼龄大鼠随机分成 5 组,每组 10 只,
          仪(美国 BioTek 公司),数字玻片图像扫描及分析系统、                      分别为模型组、健胃消食片组(0.65 g/kg)和化橘红提取
          EG1150 型石蜡包埋机、RM2245 型石蜡切片机(德国                      物低剂量(0.5 g/kg)、中剂量(1.0 g/kg)、高剂量(2.0 g/kg)
          Leica 公司),Heraeus Multifuge X1R 型台式高速冷冻离            组,另外给予常规饲料的 10 只大鼠作为对照组。根据
          心机(美国Thermo Fisher Scientific公司)。                   2020 年版《中国药典》(一部)规定,以及《药理实验方法
          1.2 主要药品与试剂                                         学》中人和动物间体表面积折算公式得到相应的等效剂
              化橘红提取物(批号 20200101A,100 g 提取物/瓶,                量,成人(60 kg)化橘红用量为 3~6 g,换算成大鼠给药
          每 1 g 提取物含化橘红 0.946 g)由广州市香雪制药股份                    剂量为0.3~0.6 g/kg,取中间剂量0.5 g/kg为低剂量,1.0
          有限公司提供;江中健胃消食片(阳性对照药,批号                             g/kg为中剂量,2.0 g/kg为高剂量;健胃消食片每天用量
          21101012)购自江中药业股份有限公司;胃蛋白酶活性                        为 6 g,换算成大鼠给药剂量为 0.65 g/kg。药物溶剂为
          检测试剂盒(批号 BC2325)、胃泌素(gastrin,GAS)试剂                 0.5%羧甲基纤维素钠,给药组灌胃相应药液;对照组和模
          盒(批号SEKR-0104)、胃动素(motilin,MTL)试剂盒(批                型组灌胃0.5%羧甲基纤维素。每天1次,连续灌胃14 d。
          号 SEKR-0105)、抑胃肽(gastric inhibitory peptide,GIP)    2.3 幼龄大鼠体质量及摄食量检测
          试剂盒(批号 SEKR-0102)均购自北京索莱宝科技有限                           造模结束后,计算幼龄大鼠第 7、14 天的摄食量,每
          公司;羧甲基纤维素钠(批号 DCBC0696V)购自日本                        周称取大鼠体质量,记录数据。大鼠平均摄食量=(总
          Sigma-Aldrich 公司;PBS(批号 ZLI-9062)、苏木素染色             的投食量-次日饲料剩余量)/动物总数。


          · 2932 ·    China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 23                            中国药房  2022年第33卷第23期
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