Page 123 - 《中国药房》2022年23期
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100 6.31 M4(OPLS-DA)
13.80
9.88 80 000
80 60 000
40 000 空白组
20 000
相对强度/% 60 5.93 7.33 8.09 9.41 10.15 1.311 3*to[1] -20 000 0 生佛手组
-40 000
40
-80 000
8.78 8.91 -60 000
2.88 8.56 10.84
20 0.56 6.12 7.88 12.58 -100 000
4.63 6.54 7.11 11.83 -100 000 -40 000 0 40 000 80 000
2.84 3.80 5.79
0.65
1.000 01t[1]
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 A.生佛手组-空白组
t/min M7(OPLS-DA)
A.正离子模式
80 000
100 6.32 60 000
40 000
1.227 35*to[1] 制佛手组
80 7.33 20 000 0 空白组
5.93 13.79 -20 000
-40 000
相对强度/% 60 0.55 -100 000
-60 000
-80 000
40
3.26 6.13 8.92 -150 000 -50 000 0 50 000 100 000
6.54
5.79 7.12 8.22 8.79 9.42 9.89 1.000 31t[1]
20 5.67 7.90 8.08 8.58 9.70 10.16 13.95
2.88 4.75 5.45 11.83 B.制佛手组-空白组
0.65 4.03 4.71 4.87 6.81 7.48
2.84 3.36
M10(OPLS-DA)
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
100 000
t/min
B.负离子模式 50 000
图2 正、负离子模式下质控样本的总离子流图 1.136 89*to[1] 0 生佛手组
制佛手组
M1(PCA-X) -50 000
80 -100 000
60 -150 000
40 质控样本 -80 000 -40 000 0 40 000
20 空白组 1.118 49t[1]
t[2] -20 0 生佛手组 C.生佛手组-制佛手组
制佛手组
-40 图4 各组样本OPLS-DA模型图
-60
-80
-100 4 讨论
-150 -100 -50 0 50 100
t[1] 本研究选用健康大鼠,连续给药 35 d,大鼠经历了
图3 各组样本PCA得分图 药物反应蓄积、症状表现和机体自我调节过程。从摄食
率及预测能力。由图4可知,各组样本之间分离较好,组 量、饮水量、尿液量3个指标的动态观察结果可以看出,
内样本聚集,说明组间代谢物存在明显差异。 给药 7 d,生、制佛手组间 3 个指标都出现了分化;给
药第 14天,两组间摄食量和饮水量分化最大,此后分化
3.3.4 血清差异代谢物筛选 根据OPLS-DA模型筛选
出现波动。生佛手组和枳壳组大鼠饮水量较空白组和
组间差异代谢物,以P<0.05、FC>3或FC<1/3作为筛选
制佛手组低,然而关于枳壳燥性的文献报道表明,生枳
[9]
条件 。分析得到制佛手组-空白组差异代谢物有20个,
壳组大鼠饮水量会显著高于空白组,文献采用的剂量为
包括10个氨基酸、7个脂类、3个其他类;生佛手组-空白组
10 g/kg [5―6] 。本研究枳壳采用剂量为 1.2 g/kg(正常剂
差异代谢物有3个,均为脂类;生佛手组-制佛手组差异代
量),给药剂量不同可能是本研究中饮水量指标结果无
谢物有3个,包括2个氨基酸类、1个羧酸类,结果见表2。
显著性的原因。由此也说明以饮水量作为燥性评价指
由表2可知,生佛手给药干预后在体内主要影响脂类,而
标并不适合所有燥性中药。制佛手组和枳壳组组间的
制佛手给药后对脂类的影响降低,向氨基酸类迁移。
尿液量于给药第21天出现显著性差异,在此前后差异均
3.3.5 代谢通路分析 将差异代谢物进行匹配,得到具
无统计学意义。血清AQP3在机体发挥的作用主要是促
有KEGG信号的差异代谢物,通过KEGG pathway mapper [10]
进水在细胞内外的转运,促进肾小管的重吸收 。有实
功能进行通路富集分析,获得代谢通路富集结果。筛选 验证明,血清 AQP3 缺少小鼠会出现多尿症状 。本研
[11]
出 P<0.05 的通路,认为该代谢通路有显著性差异。结 究对大鼠血清 AQP3 含量的检测结果显示,制佛手组血
果显示,生佛手和制佛手均影响了亚油酸代谢和甘油磷 清 AQP3 含量显著低于生佛手组(P<0.05)。相应尿液
脂代谢。从通路P值来看,生佛手对甘油磷脂代谢的影 量观察结果显示,制佛手组尿液量较生佛手组高。由此
响显著高于制佛手,对亚油酸代谢的影响显著低于制佛 得出,AQP3 含量变化可以有效反映佛手的燥性。佛手
手;制佛手组-空白组和生佛手组-制佛手组的组间差异 的燥可使大鼠机体内血清AQP3含量增加,尿液量减少。
代谢物涉及多条代谢途径,结果见表3。 综合各项动态观察指标和尿液量与血清 AQP3 的关联
中国药房 2022年第33卷第23期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 · 2929 ·