Page 123 - 《中国药房》2022年23期
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100               6.31                                                M4(OPLS-DA)
                                                  13.80
                                        9.88                        80 000
            80                                                      60 000
                                                                    40 000                          空白组
                                                                    20 000
           相对强度/%  60        5.93  7.33  8.09  9.41  10.15        1.311 3*to[1]  -20 000 0          生佛手组
                                                                   -40 000
            40
                                                                   -80 000
                                    8.78 8.91                      -60 000
                     2.88           8.56   10.84
            20  0.56          6.12  7.88       12.58               -100 000
                          4.63  6.54 7.11    11.83                    -100 000         -40 000            0            40 000         80 000
                    2.84  3.80  5.79
               0.65
                                                                                    1.000 01t[1]
             0
             0          1       2         3        4        5        6         7        8        9      10        11      12     13      14      15  A.生佛手组-空白组
                                 t/min                                            M7(OPLS-DA)
                              A.正离子模式
                                                                    80 000
            100               6.32                                  60 000
                                                                    40 000
                                                                  1.227 35*to[1]                    制佛手组
            80                   7.33                               20 000 0                        空白组
                             5.93                 13.79            -20 000
                                                                   -40 000
           相对强度/%  60  0.55                                        -100 000
                                                                   -60 000
                                                                   -80 000
            40
                      3.26    6.13   8.92                             -150 000         -50 000             0         50 000          100 000
                               6.54
                            5.79  7.12  8.22 8.79  9.42  9.89                       1.000 31t[1]
            20              5.67  7.90 8.08  8.58  9.70  10.16  13.95
                     2.88  4.75 5.45         11.83                             B.制佛手组-空白组
               0.65     4.03 4.71  4.87  6.81  7.48
                    2.84  3.36
                                                                                  M10(OPLS-DA)
             0
             0          1       2         3        4        5        6         7        8        9      10        11      12     13      14      15
                                                                    100 000
                                 t/min
                              B.负离子模式                               50 000
             图2 正、负离子模式下质控样本的总离子流图                                1.136 89*to[1]  0                 生佛手组
                                                                                                    制佛手组
                              M1(PCA-X)                            -50 000
                  80                                               -100 000
                  60                                               -150 000
                  40                            质控样本                  -80 000       -40 000                      0                 40 000
                  20                            空白组                                  1.118 49t[1]
               t[2]  -20 0                      生佛手组                           C.生佛手组-制佛手组
                                                制佛手组
                 -40                                                   图4 各组样本OPLS-DA模型图
                 -60
                 -80
                -100                                         4 讨论
                  -150    -100      -50          0            50          100
                                         t[1]                    本研究选用健康大鼠,连续给药 35 d,大鼠经历了
                     图3 各组样本PCA得分图                           药物反应蓄积、症状表现和机体自我调节过程。从摄食
          率及预测能力。由图4可知,各组样本之间分离较好,组                          量、饮水量、尿液量3个指标的动态观察结果可以看出,
          内样本聚集,说明组间代谢物存在明显差异。                               给药 7 d,生、制佛手组间 3 个指标都出现了分化;给
                                                             药第 14天,两组间摄食量和饮水量分化最大,此后分化
          3.3.4 血清差异代谢物筛选 根据OPLS-DA模型筛选
                                                             出现波动。生佛手组和枳壳组大鼠饮水量较空白组和
          组间差异代谢物,以P<0.05、FC>3或FC<1/3作为筛选
                                                             制佛手组低,然而关于枳壳燥性的文献报道表明,生枳
             [9]
          条件 。分析得到制佛手组-空白组差异代谢物有20个,
                                                             壳组大鼠饮水量会显著高于空白组,文献采用的剂量为
          包括10个氨基酸、7个脂类、3个其他类;生佛手组-空白组
                                                             10 g/kg [5―6] 。本研究枳壳采用剂量为 1.2 g/kg(正常剂
          差异代谢物有3个,均为脂类;生佛手组-制佛手组差异代
                                                             量),给药剂量不同可能是本研究中饮水量指标结果无
          谢物有3个,包括2个氨基酸类、1个羧酸类,结果见表2。
                                                             显著性的原因。由此也说明以饮水量作为燥性评价指
          由表2可知,生佛手给药干预后在体内主要影响脂类,而
                                                             标并不适合所有燥性中药。制佛手组和枳壳组组间的
          制佛手给药后对脂类的影响降低,向氨基酸类迁移。
                                                             尿液量于给药第21天出现显著性差异,在此前后差异均
          3.3.5 代谢通路分析 将差异代谢物进行匹配,得到具
                                                             无统计学意义。血清AQP3在机体发挥的作用主要是促
          有KEGG信号的差异代谢物,通过KEGG pathway mapper                                                        [10]
                                                             进水在细胞内外的转运,促进肾小管的重吸收 。有实
          功能进行通路富集分析,获得代谢通路富集结果。筛选                           验证明,血清 AQP3 缺少小鼠会出现多尿症状 。本研
                                                                                                     [11]
          出 P<0.05 的通路,认为该代谢通路有显著性差异。结                       究对大鼠血清 AQP3 含量的检测结果显示,制佛手组血
          果显示,生佛手和制佛手均影响了亚油酸代谢和甘油磷                           清 AQP3 含量显著低于生佛手组(P<0.05)。相应尿液
          脂代谢。从通路P值来看,生佛手对甘油磷脂代谢的影                           量观察结果显示,制佛手组尿液量较生佛手组高。由此
          响显著高于制佛手,对亚油酸代谢的影响显著低于制佛                           得出,AQP3 含量变化可以有效反映佛手的燥性。佛手
          手;制佛手组-空白组和生佛手组-制佛手组的组间差异                          的燥可使大鼠机体内血清AQP3含量增加,尿液量减少。
          代谢物涉及多条代谢途径,结果见表3。                                 综合各项动态观察指标和尿液量与血清 AQP3 的关联
          中国药房  2022年第33卷第23期                                              China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 23    · 2929 ·
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