Page 23 - 《中国药房》2022年22期
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g/L 进行实验。其次，对天麻提取物的 3 个质量浓度 [ 4 ] 柳威，邓林华，祁东利，等. 天麻及其有效成分的药理作
（150、300、600 g/L）进行检测，以明确化合物与线粒体结 用概述[J]. 中药药理与临床，2021，37（4）：240-244，12.
合的最佳质量浓度，并探讨随化合物质量浓度的增加， [ 5 ] 李云，王志伟，刘大会，等. 天麻化学成分研究进展[J]. 山
与线粒体结合的药物量是否随之增加。结果显示，天麻 东科学，2016，29（4）：24-29.
[ 6 ] 张成宸，石京山. 天麻的酚类成分及其中枢神经药理作
提取物达到 300、600 g/L 时，有 4 个峰 ΔP＞20%，但其中
用研究进展[J]. 中药药理与临床，2019，35（2）：167-174.
质量浓度为600 g/L时与线粒体结合成分含量更高。因
[ 7 ] YANG X X，LIANG L，LIU X，et al. Efficiently capturing
此，本研究选取600 g/L进行后续研究。最后，对孵育时
mitochondria-targeted constituents with hepatoprotective
间（30、60、90 min）进行筛选。当孵育时间较短时，可能
activity from medicinal herbs[J]. Oxid Med Cell Longev，
会错过与线粒体松散结合的活性分子，而较长的孵育时
2019，2019：4353791.
间可能会导致结合分子的结构变化。研究结果表明，活 [ 8 ] YANG X X，ZHOU Y Z，XU F，et al. Screening potential
性分子在孵育时间为 60 min 时与线粒体结合化合物的 mitochondria-targeting compounds from traditional
数量最多，达到4个。以上研究结果表明，药物质量浓度 Chinese medicines using a mitochondria-based centrifugal
为 600 g/L、孵育时间为 60 min 时，与失活线粒体组相 ultrafiltration/liquid chromatography/mass spectrometry
比，纯化线粒体组 4 个峰（P1～P4）的峰面积显著增强 method[J]. J Pharm Anal，2018，8（4）：240-249.
（ΔP＞20%）。这表明 4 个峰（P1～P4）与活性线粒体具 [ 9 ] MENG L W，LI X K，WANG X R，et al. Amoxicillin
有特异性结合。通过与对照品对比后，鉴定出结合量较 effects on functional microbial community and spread of
大的2个成分（P2为HBA，P3为HBD），并且这2个成分 antibiotic resistance genes in amoxicillin manufacture
可提高离体MMP，提示P2、P3具有线粒体保护作用。 wastewater treatment system[J]. J Environ Sci（China），
由于 HBA 提高 MMP 的作用强于 HBD，而且 2020 2017，61：110-117.
[10] DI BELLA S，LUZZATI R，PRINCIPE L，et al. Aspirin
年版《中国药典》中把 HBA 列入天麻质量控制成分之
and infection：a narrative review[J]. Biomedicines，2022，
一，本研究通过HT22细胞进一步验证HBA的神经保护
10（2）：263.
[13]
作用 。本研究结果显示，OGD/R可引起神经细胞结构
[11] CHIOZZI P，SARTI A C，SANZ J M，et al. Amyloid β-de‐
损伤和坏死，而HBA能明显改善这一情况，与之前的报
pendent mitochondrial toxicity in mouse microglia requires
[16]
道一致 。在本研究中，HBA 预处理可以减轻 OGD/R P2X7 receptor expression and is prevented by nimodipine
诱导的神经细胞病理改变，减少细胞的死亡率，起到神 [J]. Sci Rep，2019，9（1）：6475.
经保护作用。研究发现，当细胞 OGD/R 时产生大量 [12] LEE B J，EGI Y，VAN LEYEN K，et al. Edaravone，a free
ROS，线粒体容易受到氧化损伤，线粒体功能发生障碍 radical scavenger，protects components of the neurovascu‐
导致 ATP 水平降低，MMP 去极化，MPTP 开放异常并释 lar unit against oxidative stress in vitro[J]. Brain Res，
放细胞凋亡因子，最终导致细胞凋亡 。本研究结果显 2010，1307：22-27.
[7]
示，通过 HBA 处理逆转了 OGD/R 细胞模型中 ROS、 [13] LUO L，LYU L，LU Y H，et al. Effects of hypoxia on pro‐
ATP、MPTP、MMP的异常变化，表明HBA可通过减少氧 granulin expression in HT22 mouse hippocampal cells[J].
化损伤，保护线粒体功能，从而发挥神经保护作用。 Mol Med Rep，2014，9（5）：1675-1680.
[14] CHAIYARIT S，THONGBOONKERD V. Comparative
综上所述，本实验成功从天麻中获取 2 个脑线粒体
analyses of cell disruption methods for mitochondrial iso‐
靶向化合物（HBA、HBD），并且验证了结合率最高的
lation in high-throughput proteomics study[J]. Anal Bio‐
HBA 对 OGD/R 诱导的神经细胞损伤有明显的保护作
chem，2009，394（2）：249-258.
用，可能是通过线粒体靶向治疗而发挥神经保护作用。 [15] GEORGAKOPOULOS N D，WELLS G，CAMPANELLA
参考文献 M. The pharmacological regulation of cellular mitophagy
[ 1 ] HE Z，NING N Y，ZHOU Q X，et al. Mitochondria as a [J]. Nat Chem Biol，2017，13（2）：136-146.
therapeutic target for ischemic stroke[J]. Free Radic Biol [16] YU S S，ZHAO J，ZHENG W P，et al. Neuroprotective
Med，2020，146：45-58. effect of 4-hydroxybenzyl alcohol against transient focal
[ 2 ] CABRAL-COSTA J V，KOWALTOWSKI A J. Neurolo- cerebral ischemia via anti-apoptosis in rats[J]. Brain Res，
gical disorders and mitochondria[J]. Mol Aspects Med， 2010，1308：167-175.
2020，71：100826. （收稿日期：2022-05-17 修回日期：2022-08-26）
[ 3 ] 李振，王科，王凯强，等. 中药介导线粒体防治肝癌的研 （编辑：曾海蓉）
究进展[J]. 中草药，2022，53（2）：575-589.
中国药房 2022年第33卷第22期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 22 · 2705 ·
