Page 45 - 《中国药房》2022年21期

用量成本及纳米粒的载药量，本研究最终确定大豆油用 16
14
量为45 mg。 12
表2 大豆油用量对纳米粒性质的影响 强度/% 10 8
大豆油用量/mg 粒径/nm PDI T stability （室温）/h 6
4
0 － － － 2
20 127.0 0.400 ＜4 0
1 10 100 1 000 10 000
30 118.0 0.247 ＜8
粒径/nm
45 96.9 0.169 ＞48 A.粒径
55 98.4 0.190 ＞48
160 000
－：不能形成纳米粒，故无相关数据 140 000
120 000
2.2.3 超声功率的考察 固定CLT投药量为6.5 mg、大 100 000
豆油用量为 45 mg、超声时间为 8 min，考察超声功率分 总量 80 000
60 000
别为 330、400、490、520 W 时对纳米粒粒径、PDI 和稳定 40 000
性的影响，结果见表3。如表3所示：随着超声功率的增 20 000
0
大，纳米粒的粒径随之减小，稳定性随之增加；但过高的 －200 －100 0 100 200
Zeta电位/mV
超声功率会导致纳米粒 PDI 变大、稳定性变差，故本研 B. Zeta电位
究最终确定超声功率为490 W。 图1 CLT-AN的粒径和Zeta电位分布
表3 超声功率对纳米粒性质的影响
超声功率/W 粒径/nm PDI T stability （室温）/h
330 205.8 0.625 ＜4
400 122.8 0.246 ＜8
490 96.6 0.173 ＞48
520 75.8 0.389 ＜4
2.2.4 最佳处方工艺的确定 根据上述实验结果，最终
确定 CLT-AN 的处方工艺如下：在 2 mL 混合溶剂[V（二
氯甲烷）∶V（乙酸乙酯）＝7∶3]中加入 6.5 mg CLT 和 45
mg 大豆油作为油相；取 20%HSA 1 mL，加纯水溶解至
10 mL，得到 2%HSA 溶液，作为水相；两相混合后，在冰
浴中经超声波细胞粉碎仪超声（功率490 W）处理8 min， 图2 CLT-AN的透射电镜图
旋转蒸发除去有机溶剂，即得CLT-AN溶液。 AN，分别加入 5 mL 甲醇，超声（频率 400 W，功率 53
2.3 CLT-AN的表征 kHz，下同）10 min 破乳，然后以 13 000 r/min 离心 10
2.3.1 粒径、PDI 和 Zeta 电位的测定 取适量按最佳处 min，取上清液经0.22 μm微孔滤膜过滤，收集滤液，即得
方工艺制备的 CLT-AN，用纯水稀释至 1 mL，采用激光 空白对照溶液和供试品溶液。精密称取CLT对照品，用
粒度分析仪测定其粒径、PDI和Zeta电位，每份样品平行 甲醇溶解并定容至50 mL，即得对照品溶液。
检测 3 次。结果显示，CLT-AN 的粒径为（96.8±1.1） 2.4.3 方法学考察 专属性考察结果显示，CLT对照品
nm，PDI为0.174±0.020，Zeta电位为（－18.6±1.7）mV。 及 CLT-AN 在相同保留时间处均有类似的色谱峰，而空
CLT-AN 的粒径分布呈单峰且峰形较窄，说明粒径分布 白纳米粒中的辅料在CLT的出峰位置没有峰，表明辅料
较均一。CLT-AN的粒径和Zeta电位分布见图1。 不会干扰 CLT 的测定，专属性较好（图略）。用峰面积
2.3.2 形态学观察 取适量按最佳处方工艺制备的 （A）对CLT的质量浓度（c）进行线性回归，得到回归方程
CLT-AN滴至覆有支持膜的铜筛网上，用2%磷钨酸染色 为 A＝12.431c+0.844 8（R ＝0.999 3），表明 CLT 在 1～20
2
10 s，用滤纸吸去多余的染液，等自然干燥后，在透射电 g/mL内线性关系良好。精密度考察结果显示，低、中、高
镜下观察CLT-AN的轮廓和形态。结果显示，所制CLT-AN 质量浓度对照品溶液峰面积的 RSD 分别为 0.98%、
呈类球形，形态较规则、圆整，大小较均一，详见图2。 1.07%、0.55%（n＝5），表明仪器精密度良好。重复性考
2.4 CLT的含量测定 察结果显示，供试品溶液中 CLT 含量的 RSD 为 1.49%
2.4.1 色谱条件 色谱柱为 Kromasil-C18 （150 mm×4.6 （n＝6），表明该方法重复性良好。稳定性考察结果显
mm，5 µm）；流动相为甲醇-10% 乙酸溶液（95∶5，V/V）； 示，供试品溶液在室温放置 0、4、8、12、24 h 时峰面积的
流速为 1.0 mL/ min；检测波长为 425 nm；柱温为 35 ℃； RSD为1.28%（n＝5），表明供试品溶液在室温下放置24
进样量为10 µL。 h内稳定性良好。精密量取适量已知含量的CLT-AN，共
2.4.2 溶液的制备 取不含 CLT 的空白纳米粒和 CLT- 9 份，分别按已知含量的 80%、100%、120% 加入 CLT 对

中国药房 2022年第33卷第21期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21 ·2599·