Page 62 - 《中国药房》2022年20期
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研究表明，多酚类化合物可通过多重机制发挥抗肿                          1.3 细胞
                [1]
          瘤作用 。姜黄素（curcumin，CUR）是从姜黄属植物姜                          人前列腺肿瘤细胞 PC-3、DU-145 均购自中国科学
          黄 Curcuma longa L. 根茎中提取的一种多酚类化合物，                  院上海生物化学与细胞生物学研究所。
          可通过抑制肿瘤细胞转化、增殖、侵袭、转移和血管生成                           2 方法与结果
                          [2]
          等发挥抗肿瘤作用 。小檗碱（berberine，BER）是从毛茛                    2.1 CUR/BER-SMEDDs的制备
          科、芸香科等植物中分离出来的异喹啉类生物碱，可通                                按处方比例精密称取油相、乳化剂、助乳化剂，混合
          过诱导细胞凋亡而发挥一定的抗肿瘤作用                   [3―4] 。研究指     后，加入过量的 CUR 和 BER 原料药（摩尔比 2∶1）混匀，
          出，与CUR、BER单用相比，两药联用可更有效地抑制肝                         转移至含水 100 mL 的烧杯中，在（37.0±0.2）℃的水浴
          癌、乳腺癌、肺癌、骨癌细胞的生长和增殖                  [5―7] 。本课题     条件下磁力搅拌，即得CUR/BER-SMEDDS。
          组前期实验发现，CUR 联合 BER 对前列腺癌细胞具有                        2.2 CUR和BER含量测定方法的建立
          较强的增殖抑制作用，但由于溶解性差、生物利用度低                                采用紫外分光光度法测定CUR和BER的含量。
          等不足，二者的临床应用受到了限制。                                   2.2.1  溶液的制备      精密称取 CUR 对照品 8.45 mg 于
              利用纳米技术共载抗肿瘤药物，可有利于将药物精                          20 mL量瓶中，加无水乙醇溶解并定容，配制成质量浓度
          准地递送到肿瘤组织，并可实现药物的同时或连续释                             为 422.5 μg/mL 的母液。精密吸取上述母液 5 mL 于 50
          放 [8―9] 。自微乳给药系统（self-microemulsion drug deli-      mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，配制成质量浓度为
          very system，SMEDDS）是由药物、油相、乳化剂和助乳                   42.25 μg/mL的CUR对照品溶液，避光保存，备用。精密
          化剂等组成的均一透明溶液，在室温条件下遇水可自发                            称取 BER 对照品 11.93 mg 于 100 mL 量瓶中，加无水乙
                                     [10]
          乳化形成水包油型（O/W）微乳 。SMEDDS 可通过增                        醇溶解并定容，配制成质量浓度为 119.3 μg/mL 的 BER
          加难溶性药物溶解度、提高药物胃肠道黏膜渗透性和淋                            对照品溶液，备用。精密吸取某处方设计工艺制备的
          巴转运能力等方式来改善药物的口服吸收 。基于此，                            CUR/BER-SMEDDS 溶液 1.5 mL，加无水乙醇稀释至 6
                                               [11]
          本 实 验 利 用 自 微 乳 化 技 术 ，制 备 共 载 CUR/BER 的            mL，超声（功率500 W，频率40 kHz，下同）破乳20 min，以
          SMEDDS（CUR/BER-SMEDDS）以提高 2 种药物的溶解                  12 000 r/min 离心 10 min，取上清液 0.5 mL，用无水乙醇
          度和生物利用度；同时，本实验对其作用于人前列腺肿                            定容至5 mL，即得供试品溶液。
          瘤细胞PC-3和DU-145的体外抑制活性进行考察，旨在                        2.2.2  方法学考察      参照 2020 年版《中国药典》（四部）
          促进2种药物在抗肿瘤方面的临床应用。                                 “分析方法验证指导原则”进行方法学考察 ：分别将 2
                                                                                                   [12]
          1 材料                                                种对照品溶液用无水乙醇稀释后，置于紫外-可见分光
          1.1  主要仪器                                           光度计上进行全波长扫描，最终确定 CUR、BER 的检测
              本研究所用的主要仪器有T6型新世纪紫外-可光分                         波长分别为 425、352 nm。精密移取 CUR 对照品溶液，
          光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、Zatasizer                      分 别 用 无 水 乙 醇 稀 释 至 0.845、1.690、3.380、4.225、
          Nano ZS90 型纳米粒度分析仪（英国 Malvern 公司）、                  5.070、6.760、7.605 μg/mL，于 425 nm 波长处测定吸光
          Tecnai G2型透射电子显微镜（美国FEI公司）、BAS124S                  度。以吸光度（Y）对 CUR 质量浓度（X）进行线性回归，
                                                                                                   2
          型万分之一电子分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有                           得标准曲线方程为Y＝0.158 4X－0.013 3（R ＝0.999 8），
          限公司]、H1650W 型台式微量高速离心机（湖南湘仪实                        CUR 检测质量浓度的线性范围为 0.845～7.605 μg/mL。
          验室仪器开发有限公司）等。                                       精密移取 BER 对照品溶液，分别用无水乙醇稀释至
          1.2  主要药品与试剂                                        2.386、4.772、7.158、9.544、11.930 μg/mL，于352 nm波长
              CUR原料药（批号M13GS148382，纯度＞97%）购自                  处测定吸光度。以吸光度（Y）对BER质量浓度（X）进行
                                                                                                           2
          大 连 美 仑 生 物 技 术 有 限 公 司 ；BER 原 料 药（批 号              线性回归，得标准曲线方程为Y＝0.059 3X+0.021 6（R ＝
          J12GS151377，纯度＞95%）、中链甘油三酯、辛癸酸甘油                    0.999 9），BER 检 测 质 量 浓 度 的 线 性 范 围 为 2.386～
          酯、噻唑蓝（MTT）均购自上海源叶生物科技有限公司；                          11.930 μg/mL。CUR、BER 精密度、重复性、稳定性（12
          CUR对照品（批号110825-201804）购自中国食品药品检                    h）试验的 RSD 均小于 5.00%，平均加样回收率分别为
          定研究院，BER对照品（批号RQ18R1031）购自上海瑞永                      99.8%～101.5%、99.4%～104.4%（RSD 均 小 于 5.00%，
          生物科技有限公司，纯度均大于 98%；肉豆蔻酸异丙酯                          n＝9）。
          购自浙江物美生物科技有限公司；油酸乙酯购自上海飞                            2.3 CUR和BER在不同辅料中溶解度的测定
          祥化工厂；辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯（Labrasol）购自上                           将过量的 CUR 和 BER 原料药（摩尔比 1∶1）置于 2
          海凯茵化工有限公司；聚氧乙烯 40 氢化蓖麻油（RH40）                       mL 离心管中，分别加入不同的油相、乳化剂、助乳化剂
          购自阿拉丁试剂（上海）有限公司；吐温-80、吐温-20、聚                       至体系总质量为1 g，超声40 min使充分溶解，以10 000
          乙二醇400（PEG400）等均为分析纯，水为蒸馏水。                         r/min 离心 10 min，取上清液，用无水乙醇稀释至适宜浓


          ·2488·   China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 20                                 中国药房    2022年第33卷第20期
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