Page 58 - 《中国药房》2022年20期

2.3.2 供试品溶液的制备 按照“2.1.2”项下方法制备
600
400 全方供试品溶液，并于进样前稀释5倍。
200 2.3.3 对照品溶液的制备 精密称取哈巴苷、哈巴俄
0
t[2]
－200 苷、莫诺苷、马钱苷、阿魏酸、杯苋甾酮对照品适量，加甲
－400 醇制成质量浓度分别为0.019 4、0.011 4、0.017 4、0.013 4、
－600
－800 0.000 5、0.005 2 mg/mL 的混合对照品溶液；另精密称取
－800 －600 －400 －200 0 200 400 600
t[1] 二苯乙烯苷对照品适量，加甲醇制成质量浓度为0.273 0
A.得分图 mg/mL的对照品溶液。
0.5 2.3.4 专属性考察 取“2.3”项下供试品溶液、对照品溶
0.4
0.3 液（混合对照品与二苯乙烯苷对照品溶液各取适量混
0.2
0.1 合）和空白溶液（70% 甲醇）适量，按照“2.3.1”项下色谱
p[2] 0
－0.1 条件进样测定，记录色谱图。结果显示，各色谱峰分离
－0.2
－0.3
－0.4 度均大于 1.5，空白溶液对各成分的检测无干扰。结果
－0.5 见图7（空白图略）。
－0.1 0 0.1 0.2 0.3 0.4
p[1]
0.04 波长202 nm
B.载荷图 0.02 1
图5 15批潜阳育阴颗粒PCA得分图及载荷图 －0.02 0 7
－0.04
S10 为一类，S11 为一类，S12～S14 为一类，S15 为一类。 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
VIP 图（图 6B）显示，峰 3、9、6（莫诺苷）、7（马钱苷）、15、 0.08 波长250 nm
0.06
12（二苯乙烯苷）、16（哈巴俄苷）的 VIP 值分别为 1.77、 AU 0.04
0.02
0 2 3 6
1.51、1.38、1.34、1.12、1.09、1.05，提示莫诺苷、马钱苷、二 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
苯乙烯苷、哈巴俄苷等成分可能是影响潜阳育阴颗粒样 0.08 波长320 nm
0.06
品质量的差异性成分。 0.04 4 5
0.02
0
400 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
300
200 t/min
100 A.对照品色谱图
t[2] －100 0 0.04 波长202 nm
－200 0.02 1
－300 0 7
－400 －0.02
－500 －0.04
－800 －600 －400 －200 0 200 400 600
t[1] 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
A. PLS-DA得分图 0.06 波长250 nm
0.04
AU
3.0 0.02 2 3
2.5 0 6
2.0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
VIP值 1.5 0.040 5 波长320 nm
1.0
0.5
0 0.030
0.020
－0.5 0.010
－1.0 4
3 9 6 7 15 12 16 5 17 8 14 4 11 1 10 2 13 18 0
峰号 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
B. VIP图 t/min
图6 15批潜阳育阴颗粒PLS-DA得分图及各共有峰的 B.供试品溶液
1：哈巴苷；2：莫诺苷；3：马钱苷；4：阿魏酸；5：二苯乙烯苷；6：杯苋
VIP图
甾酮；7：哈巴俄苷
2.3 潜阳育阴颗粒多成分含量的测定 图7 潜阳育阴颗粒专属性考察的UPLC图
2.3.1 色谱条件 色谱柱为 Waters ACQUITY UPLC
2.3.5 标准曲线及线性范围考察 取“2.3.3”项下混合
BEH C18 （100 mm×3.0 mm，1.7 μm）；流动相 A 为乙腈，
对照品溶液，分别用甲醇稀释0、2、5、10、20倍；取“2.3.3”
流动相 B 为水（含 0.1% 磷酸），采用梯度洗脱方法（0～ 项下二苯乙烯苷对照品溶液，分别用甲醇稀释0、1.5、3、
15 min，5%A→15%A；15～30 min，15%A→30%A；30～ 7.5、15倍。取上述溶液，按照“2.3.1”项下色谱条件分别
40 min，30%A→80%A；40～42 min，80%A→95%A）；检 进样，记录峰面积。以待测成分质量浓度为横坐标（X）、
测波长分别为320 nm（阿魏酸、二苯乙烯苷）、250 nm（莫 峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，结果见表2。
诺苷、杯苋甾酮、马钱苷）、202 nm（哈巴苷、哈巴俄苷）； 2.3.6 精密度试验 取“2.3.3”项下混合对照品溶液和
流速为0.3 mL/min；柱温为35 ℃；进样量为2 μL。 二苯乙烯苷对照品溶液适量，混合后按照“2.3.1”项下色

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