Page 41 - 《中国药房》2022年20期
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factor（bFGF）were detected. RESULTS Compared with model group，the latency of step-down was significantly prolonged（P＜
          0.05），and the number of step-down errors was significantly reduced（P＜0.05）in TCM group. The ultrastructural abnormalities of
          NVU in cerebral cortex and hippocampus were significantly improved，and the protein and mRNA expressions of VEGF and α7
          nAChRs and the contents of VEGF，Ang1 and bFGF in cerebral tissue were significantly increased（P＜0.05）. CONCLUSIONS
          The components of TCM for invigorating qi and activating blood circulation can improve CCI-induced cognitive dysfunction in
          mice，the mechanism of which may be associated with protecting NVU，recovering ultrastructural abnormalities of injured NVU，
          and regulating the expression of proteins closely related to NVU and memory function.
          KEYWORDS    the components of traditional Chinese medicine for invigorating qi and activating blood circulation；total ginsenoside；
          total ketone ester of Ginkgo biloba；total glucoside of Crocus sativus；chronic cerebral ischemia；neurovascular unit；vascular
          cognitive impairment；mice


              慢性脑缺血（chronic cerebral ischemia，CCI）又称慢        司）、H-7500 型透射电镜（日本 Hitachi公司）、Fresco17-1
          性脑低灌注，是一种由多种原因导致脑血流长期灌注不                           型低温冷冻离心机[赛默飞世尔科技（中国）有限公司]、
          足进而引发的慢性脑功能障碍综合征，早期表现为认知                           Tanon 1600型凝胶成像系统（上海天能科技有限公司）、
          功能受损，随后可发展为持久性或进展性的认知及神经                           ABI 7500 型荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪（美国 ABI
                  [1]
          功能障碍 ，是血管性认知功能障碍（vascular cognitive                公司）、Multisksn MK3 型全自动酶标仪（芬兰 Thermo
                                        [2]
          impairment，VCI）的重要危险因素 。神经血管单元                     Labsystems公司）等。
         （neurovascular unit，NVU）是由神经元、血脑屏障、星形               1.2 主要药品与试剂
          胶质细胞及细胞外基质组成的复合体，可发挥复杂的网                               益气活血中药组分[人参总皂苷（纯度≥90%）、银杏
          络协同作用，共同维持神经元微环境的稳定 。NVU理                          总酮酯（纯度≥90%）、西红花总苷（纯度≥90%）混合物，
                                               [3]
          论将NVU作为神经系统结构和功能的基本单位进行整                           质量比 5∶7∶1，批号 090914]由神威药业集团有限公司
          体研究，把以往对单一神经元的保护扩展为对 NVU 中                         提供；阿司匹林肠溶片（批号018170704，规格100 mg/片）
                          [4]
          各组成的全面保护 ，这一研究策略与中药多靶点、多环                          购自石药集团欧意药业有限公司；兔VEGF多克隆抗体
          节、多维度全面保护和整体调节的作用特点相吻合。探                          （批 号 GTX50153）购 自 美 国 GeneTex 公 司 ；兔 α7
          究 CCI 状态下脑内 NVU 的病变情况，并基于此调节和                      nAChRs多克隆抗体（批号ab216485）购自英国Abcam公
          促进 NVU 功能与结构的恢复，对改善 CCI 导致的认知                      司；ECL Western blot 底物试剂盒（批号 WBKLS0500）购
          功能障碍具有重要意义。                                        自美国 Millipore 公司；大鼠 β-肌动蛋白（β-actin）单克隆
              既往研究表明，益气活血中药组分（人参总皂苷、银                        抗体（批号YM3028）购自美国Immunoway公司；辣根过
          杏总酮酯、西红花总苷）能够透过血脑屏障，可改善VCI                         氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗（H+L）和
                                                [5]
          患者的认知功能、神经元活动和脑灌注损伤 ；同时，又                          辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠免疫球蛋白G二抗（H+
          可调节多发梗死性痴呆大鼠脑内与学习记忆相关的神                            L）（批号分别为 S004、S001）均购自天德悦（北京）生物
                                   [6]
          经递质水平，改善其认知功能 。然而目前该中药组分                           科技有限责任公司；TRNzol 总 RNA 提取试剂（批号
          对 CCI 所致认知功能障碍的作用及机制尚不清楚。本                         DP405-02）购自天根生化科技（北京）有限公司；VEGF、
          研究基于NVU理论，从动物学习记忆能力、NVU超微形                         Ang1、bFGF酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分
          态结构和相关蛋白[血管内皮生长因子（vascular endo‐                   别为20180519A、20180620A、20180625A）均购自北京欣
          thelial growth factor，VEGF）、血管生成素1（angiopoietin 1，  博盛生物科技有限公司；其余试剂均为分析纯或实验室
          Ang1）、碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子（basic fibroblast       常用规格，水为纯净水。
          growth factor，bFGF）、α7 烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nico‐          1.3 实验动物
          tinic acetylcholine receptor，α7 nAChRs）]表达等角度入         SPF 级雄性 C57BL/6J 健康小鼠 64 只，8 周龄，体质
          手，探讨益气活血中药组分对CCI模型小鼠认知功能障                          量为 18～20 g，购自北京华阜康生物科技股份有限公
          碍的影响及作用机制，以期为临床防治 VCI 提供科学                         司，动物生产许可证号为SCXK（京）2019-0008。所有小
          依据。                                                鼠均饲养于中国中医科学院西苑医院医学实验中心屏
          1 材料                                               障级动物房（室温 23～25 ℃，相对湿度 50%～70%）内，
          1.1  主要仪器                                          并自由摄食和饮水。本实验方案遵循科技部《关于善待
              本研究所用主要仪器包括BT87-3型体内血栓形成                       实验动物的指导性意见》的动物伦理要求，经中国中医
          测定仪（包头市昆仑生物化学应用技术开发研究所）、                           科学院西苑医院医学伦理委员会审核批准（批准号
          1049002 型跳台仪（北京众实迪创科技发展有限责任公                       2018XLC012-2）。


          中国药房    2022年第33卷第20期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 20  ·2467·
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