Page 54 - 《中国药房》2022年19期

表2 新疆鼠尾草酚酸纯化物及单体成分对模型细胞凋
Nrf2 68 kDa
亡率的影响（x±s，n＝3，%%）
组别 浓度 细胞凋亡率/% 组别 浓度 细胞凋亡率/%
Keap1 70 kDa
对照组 10.65±2.33 丹参素组 50 μmol/L 25.65±2.33 bc
模型组 40.15±2.62 a 原儿茶醛组 50 μmol/L 27.95±1.34 bc
HO-1 33 kDa
卡格列净片组 15 μmol/L 17.10±0.14 b 咖啡酸组 50 μmol/L 34.60±0.85 bc
新疆鼠尾草酚酸纯化物组 10.8 μg/mL 19.35±0.92 b 迷迭香酸组 50 μmol/L 26.05±1.48 bc
NQO-1 31 kDa
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与新疆鼠
尾草酚酸纯化物组比较，P＜0.01
β-actin 42 kDa
3.4 新疆鼠尾草酚酸纯化物及单体成分对模型细胞中
氧化应激指标的影响结果 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：卡格列净片组；Ⅳ：新疆鼠尾草酚酸纯
与对照组比较，模型组细胞中 MDA 含量显著升高
化物组；Ⅴ：新疆鼠尾草酚酸提取物组；Ⅵ：迷迭香酸组
（P＜0.01），GSH 含量及 SOD 活性显著降低（P＜0.01）。 图3 各组细胞中 Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 蛋白表达
与模型组比较，各给药组细胞中 MDA 含量均显著降低 测定的电泳图
（P＜0.01），GSH 含量显著升高（P＜0.01）；卡格列净片
表4 各组细胞中 Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 蛋白表达
组、新疆鼠尾草酚酸纯化物组、原儿茶醛组、迷迭香酸组
水平测定结果（x±s，n＝3）
细胞中 SOD 活性均显著升高（P＜0.01）。新疆鼠尾草
组别 Nrf2/β-actin Keap1/β-actin HO-1/β-actin NQO1/β-actin
酚酸纯化物降低细胞中 MDA 含量以及升高 GSH 含 对照组 2.26±0.23 1.05±0.03 1.53±0.11 1.43±0.18
量、SOD 活性的作用均强于丹参素、原儿茶醛、咖啡酸 模型组 0.88±0.30 a 1.42±0.13 a 0.91±0.13 a 0.58±0.03 a
卡格列净片组 2.05±0.24 b 0.97±0.10 b 1.42±0.12 b 1.44±0.22 b
（P＜0.01）。在 4 个单体化合物中，迷迭香酸降低细胞
新疆鼠尾草酚酸纯化物组 1.79±0.20 b 1.20±0.03 b 1.34±0.15 b 1.34±0.20 b
中 MDA 含量以及升高 GSH 含量、SOD 活性的作用均 迷迭香酸组 1.74±0.32 b 0.99±0.08 bd 1.04±0.18 e 0.72±0.17 d
显著强于其余 3 个化合物（P＜0.05 或 P＜0.01）。结果 a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组
比较，P＜0.05；d：与新疆鼠尾草酚酸纯化物组比较，P＜0.01；e：与新疆
见表3。
鼠尾草酚酸纯化物组比较，P＜0.05
表3 各组细胞中 MDA、GSH 含量及 SOD 活性测定结
4 讨论
果（x±s，n＝3）
卡格列净片在临床上可以有效缓解DN患者的临床
组别 MDA/（nmol/mg prot） GSH/（μmol/L） SOD/（U/mg prot）
对照组 0.65±0.09 179.32±6.45 98.09±2.97 症状，控制患者血糖水平，改善患者炎症指标与尿蛋白
模型组 1.46±0.09 a 104.54±4.21 a 60.92±1.88 a 指标，同时其还可改善患者的肾功能，提高治疗的有效
卡格列净片组 0.30±0.07 b 313.40±12.62 b 115.21±7.01 b [10―11]
新疆鼠尾草酚酸纯化物组 0.43±0.11 b 283.43±9.15 b 98.35±4.93 b 率 。为此，本研究以卡格列净片作为阳性对照药物
丹参素组 1.14±0.08 bcd 145.79±5.03 bcd 65.60±4.42 cd 进行研究。
原儿茶醛组 0.99±0.20 bcd 201.81±28.24 bcd 77.70±13.67 bce
咖啡酸组 0.74±0.16 bcd 196.33±7.21 bcd 62.00±5.89 cd 高血糖以及由此诱发的氧化应激被认为是DN发生
[12]
迷迭香酸组 0.44±0.12 b 240.78±8.88 bc 90.21±2.96 b 发展的关键因素 。同时，在DN病变的高血糖、炎症和
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与新疆鼠 氧化背景下，脂质代谢出现异常，过多的脂质在肾脏中
尾草酚酸纯化物组比较，P＜0.01；d：与迷迭香酸组比较，P＜0.01；e：与 积累也会损害肾脏功能 。棕榈酸是血液中含量最高的
[4]
迷迭香酸组比较，P＜0.05
3.6 新疆鼠尾草酚酸纯化物及单体成分对模型细胞中 游离脂肪酸，棕榈酸含量的升高可能通过骨骼肌的胰岛
Keap1/Nrf2通路相关蛋白表达水平的影响结果 素抵抗机制，影响2型糖尿病的发生和发展，并且能够导
与对照组比较，模型组细胞中Nrf2、HO-1、NQO1蛋 致细胞脂质沉积、炎症反应、氧化应激损伤及细胞凋亡，
白表达水平显著降低（P＜0.01），Keap1蛋白表达水平显 从而导致细胞损伤 [13―14] 。因此，本研究采用葡萄糖联合
著升高（P＜0.01）。与模型组比较，卡格列净片组、新疆 棕榈酸建立高糖高脂诱导的HK-2细胞损伤模型。在该
鼠尾草酚酸纯化物组细胞中 Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白表 模型条件下，HK-2 细胞活力显著降低，细胞中 MDA 含
达水平显著升高（P＜0.01），Keap1蛋白表达水平显著降 量明显增多，GSH 含量和 SOD 活性显著下降，使 HK-2
低（P＜0.01）；迷迭香酸组细胞中 Nrf2 蛋白表达水平显 细胞发生氧化应激损伤，最终导致细胞凋亡。而给予新
著升高（P＜0.01），Keap1 蛋白表达水平显著降低（P＜ 疆鼠尾草酚酸纯化物及丹参素、原儿茶醛、咖啡酸和迷
0.01）。新疆鼠尾草纯化物对Keap1、NQO1及HO-1蛋白 迭香酸４个单体成分干预后，均可以抑制高糖高脂诱导
表达水平的影响明显强于迷迭香酸（P＜0.05 或 P＜ 损伤细胞的凋亡，降低损伤细胞中MDA含量，升高损伤
0.01），提示纯化物中各酚酸类成分协同发挥药效。结果 细胞中 GSH 含量和 SOD 活性，改善细胞的氧化应激损
见图3、表4。 伤。结合文献报道的丹参素、原儿茶醛、咖啡酸和迷迭

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