Page 46 - 《中国药房》2022年18期
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0.026 mg/kg；成人（体质量 60 kg）复方鱼鹅滴鼻剂临床                  0.01）。与模型组比较，各给药组（除复方鱼鹅滴鼻剂中
          用药剂量为9.6 mg/kg（以生药量计），根据大鼠与人体表                      剂量组鼻腔炎症评分、低剂量组擦鼻和鼻腔炎症评分
          面积等效比计算出等效剂量，大鼠高、中、低剂量分别相                           外）大鼠鼻部各项症状评分均显著下降（P＜0.05 或 P＜
          当于人临床等效剂量的2、1、0.5倍。                                 0.01）。结果见表2。
          2.3 指标检测                                            表2 复方鱼鹅滴鼻剂对 AR 模型大鼠鼻部症状评分的

          2.3.1  大鼠鼻部症状评分         在实验第36天，于2％卵清                    影响（x±s，n＝12，分）
          蛋白溶液滴鼻后1 h，按照表1的评分标准在30 min内对                       组别              擦鼻       喷嚏     鼻腔分泌物    鼻腔炎症
                                                              空白对照组            0       0        0        0
          大鼠的擦鼻次数、喷嚏个数、鼻腔分泌物和鼻腔炎症情
                                                              模型组            1.90±0.86 a  1.60±0.52 a  1.70±0.67 a  1.60±0.84 a
          况进行评分。                                              曲安奈德组          1.20±0.42 b  1.00±0.47 c  0.70±0.48 c  0.60±0.79 c
                                                              复方鱼鹅滴鼻剂高剂量组    1.20±0.36 b  1.10±0.32 c  0.30±0.48 c  0.70±0.67 c
          2.3.2  大鼠血清中IgE和炎症因子水平检测 采用ELISA
                                                              复方鱼鹅滴鼻剂中剂量组    1.20±0.63 b  0.90±0.32 c  0.60±0.35 c  1.00±0.94
          法进行检测。评分结束后，大鼠腹腔注射 0.3％戊巴比                          复方鱼鹅滴鼻剂低剂量组    1.50±1.20  1.10±0.32 c  0.90±0.57 c  1.40±0.84
          妥钠溶液（10 mL/kg）进行麻醉，取腹主动脉血，以 3 000                      a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模
                                                              型组比较，P＜0.01
          r/min 离心 10 min，取上清液，按照各 ELISA 试剂盒说明
                                                              3.2  复方鱼鹅滴鼻剂对AR模型大鼠血清中IgE和炎症
          书进行IgE、IL-2、IL-13、TNF-α水平检测。
                                                              因子水平的影响
          2.3.3  大鼠鼻黏膜病理学观察           采用HE染色法进行观
          察。大鼠处死后，每组随机取6只，分离鼻黏膜组织，用                               与空白对照组比较，模型组大鼠血清中 IgE、IL-2、
          多聚甲醛固定，乙醇梯度脱水，透明、浸蜡、包埋、切片、                          IL-13、TNF-α 水平均显著升高（P＜0.01）。与模型组比
          染色、脱水、透明、封片，在显微镜下观察鼻黏膜病理                            较，各给药组大鼠血清中IgE、IL-2、IL-13、TNF-α水平均
          情况。                                                 显著下降（P＜0.05或P＜0.01）。结果见表3。
          2.3.4  大鼠鼻黏膜组织中各炎症因子蛋白表达水平检                         表3   复方鱼鹅滴鼻剂对 AR 模型大鼠血清中 IgE 和炎

          测   采用蛋白质印迹法进行检测。取“2.3.3”项下每组                            症因子水平的影响（x±s，n＝12）
                                                              组别           IgE/（ng/mL）  IL-2/（pg/mL）  IL-13/（pg/mL）  TNF-α/（pg/mL）
          剩余6只大鼠，分离鼻黏膜组织，用液氮迅速冷冻，－80 ℃
                                                              空白对照组        11.92±3.61  5.33±1.87  4.75±2.01  106.67±31.39
          冰箱保存。检测时取出，在研钵中捣碎，加入细胞裂解                            模型组          72.42±12.51 a  18.75±3.84 a  28.25±7.76 a  298.75±48.05 a
          液，低温匀浆，以 12 000 r/min 离心 10 min 后，采用 BCA            曲安奈德组        40.67±9.22 b  12.25±4.92 b  21.92±5.59 c  228.54±57.31 b
                                                              复方鱼鹅滴鼻剂高剂量组  36.68±9.86 b  12.53±5.37 b  21.83±4.57 c  216.67±62.69 b
          法测定蛋白表达水平。将上述蛋白样品变性后，取 30                           复方鱼鹅滴鼻剂中剂量组  58.00±19.75 c  11.25±4.94 b  22.42±5.29 c  252.33±63.04 c
          μg 变性蛋白样品，用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶                          复方鱼鹅滴鼻剂低剂量组  42.08±9.32 b  14.33±5.23 c  20.17±4.59 b  252.17±74.39 c
                                                                 a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模
          电泳分离、转膜，以5％脱脂奶粉室温封闭2 h后，分别加
                                                              型组比较，P＜0.05
          入 TNF-α、IL-2、IL-13 和 β-actin 一抗，4 ℃孵育过夜；加
                                                              3.3  复方鱼鹅滴鼻剂对 AR 模型大鼠鼻黏膜病理情况
          入辣根过氧化物酶标记的IgG二抗，室温孵育1 h，显影，
                                                              的影响
          用全自动凝胶成像仪成像。采用Quantity One分析软件
                                                                  空白对照组大鼠鼻黏膜组织形态正常；模型组大鼠
          分析，以目标蛋白与内参蛋白的灰度值比值表示各目标
                                                              鼻腔上皮层脱屑、变性，固有层出现嗜酸性粒细胞浸润
          蛋白的表达水平。
                                                              及水肿，血管扩张、充血；各给药组大鼠鼻腔上皮层病理
          2.4 统计学方法
                                                              损伤较模型组均有所减轻，表现为鼻腔上皮层轻度变
              采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析。计量资料
          以 x±s 表示，符合正态分布时，多组间比较采用单因素                         性、固有层轻度水肿、嗜酸性粒细胞少量浸润。结果
          方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验；不符合正态分                         见图1。
          布时，采用非参数检验中的 Mann-Whitney U 检验。检                    3.4  复方鱼鹅滴鼻剂对 AR 模型大鼠鼻黏膜组织中炎
          验水准α＝0.05。                                          症因子蛋白表达水平的影响
          3 结果                                                    与空白对照组比较，模型组大鼠鼻黏膜组织中

          3.1  复方鱼鹅滴鼻剂对 AR 模型大鼠鼻部症状评分的                        TNF- α、IL-2、IL-13 蛋 白 表 达 水 平 均 显 著 升 高（P＜
          影响                                                  0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠鼻黏膜组织中TNF-
              与空白对照组比较，模型组大鼠鼻部症状明显，擦                          α、IL-2、IL-13蛋白表达水平均显著下降（P＜0.05或P＜
          鼻、喷嚏、鼻腔分泌物、鼻腔炎症评分均显著升高（P＜                           0.01）。结果见表4、图2。


          ·2216·   China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18                                 中国药房    2022年第33卷第18期
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